先导编辑技术是利用经过改造的Cas9蛋白，在基因组中的特定位点切断DNA，随后逆转录酶在R...

先导编辑技术是利用经过改造的Cas9蛋白，在基因组中的特定位点切断DNA，随后逆转录酶在RNA链的引导下在切断处进行基因编辑，其能实现更精准地对DNA进行编辑，该过程流程如图所示。该技术可以实现基因的定点突变和整合，将修饰好的基因导入胚胎干细胞，治疗人类某些单基因遗传病。

（1）基因重组技术工具中的_______酶与先导编辑工具中Cas9蛋白作用相似，但二者的不同之处是前者____________________________________________________________。

（2）下图为由经过修饰的pku基因构建的重组载体，在转化胚胎干细胞时，只有重组载体中整合区域正确整合到胚胎干细胞染色体DNA上才表示转化成功，而重组载体的其他区域将被靶向分解。在转化中会出现错误整合，整合错误才会出现重组载体中的两个HSV-tk中至少会有一个与neor一起整合到染色体DNA上而不被分解。已知含有标记基因neor的细胞具有G418的抗性。HSV-tkl、HSV-tk2的产物都能把DHPG转化成有毒物质而使细胞死亡。

①题干中的胚胎干细胞可以来自_____________________________，利用胚胎干细胞为受体细胞是因为其功能上具有________________________。

②胚胎干细胞在体外培养时需要满足的条件除一定的气体环境、充足营养、适宜的温度和PH外，还应保证____________条件，气体环境中的CO2的作用是_____________________。

③转化后的各类胚胎干细胞要依次在含有G418和____________________的培养液中培养，在双重选择下存活并增值的是正确整合的胚胎干细胞，原因是________________________________________。

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CRISPR/Cas9基因编辑技术是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行准确切割的技术，通过设计向导RNA中的识别序列，可人为选择DNA上的目标位点进步切割（如图）。下列相关叙述的正确是（　　 ）

A. Cas9蛋白通过破坏氢键实现对特定基因的准确切割

B. 向导RNA中的双链区遵循碱基配对方式为A﹣T，C﹣G

C. 向导RNA可在逆转录酶催化下合成

D. 若α链剪切点附近序列为…TCCAGAATC…则相应的识别序列为…UCCAGAAUC…

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CRISPR/Cas9基因编辑技术是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行准确切割的技术，通过设计向导RNA中的识别序列，可人为选择DNA上的目标位点进步切割（如图）。下列相关叙述的正确是（　　 ）

A. Cas9蛋白通过破坏氢键实现对特定基因的准确切割

B. 向导RNA中的双链区遵循碱基配对方式为A﹣T，C﹣G

C. 向导RNA可在逆转录酶催化下合成

D. 若α链剪切点附近序列为…TCCAGAATC…则相应的识别序列为…UCCAGAAUC…

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CRISPR/Cas9基因编辑技术的原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中的识别序列，可人为选择DNA 上的目标位点进行切割（见下图）。下列相关叙述错误的是

A. 向导RNA可通过转录形成

B. 向导RNA中的双链区遵循碱基互补配对原则

C. Cas9蛋白由相应基因指导在核糖体中合成

D. Cas9蛋白通过破坏目标DNA的氢键实现对DNA的切割

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CRISPR/Cas9基因编辑技术的原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中的识别序列，可人为选择DNA 上的目标位点进行切割（见下图）。下列相关叙述错误的是

A.向导RNA可通过转录形成

B.向导RNA中的双链区遵循碱基互补配对原则

C.Cas9蛋白由相应基因指导在核糖体中合成

D.Cas9蛋白通过破坏目标DNA的氢键实现对DNA的切割

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CRISPR/Cas9基因编辑技术的原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中的识别序列，可人为选择DNA 上的目标位点进行切割（见下图）。下列相关叙述错误的是

A. 向导RNA可通过转录形成

B. 向导RNA中的双链区遵循碱基互补配对原则

C. Cas9蛋白由相应基因指导在核糖体中合成

D. Cas9蛋白通过破坏目标DNA的氢键实现对DNA的切割

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CRISPR/Cas9 基因编辑技术可简单、准确地进行基因定点编辑。其原理是由一条单链向导RNA 引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列， 可人为选择DNA上的目标位点进行切割（如图）。下列相关叙述错误的是（　　 ）

A.向导 RNA 中的局部双链区遵循碱基配对原则

B.向导 RNA 中的识别序可能是…TCAGATC…

C.向导 RNA 只能与目标 DNA 的一条单链相结合

D.Cas9 蛋白能切割 DNA 特定部位的磷酸二酯键

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近年诞生的具有划时代意义的CRISPR/Cas9基因编辑技术可简单、准确地进行基因定点编辑。其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列，可人为选择DNA上的目标位点进行切割(见图)。下列相关叙述错误的是(　　)

A. Cas9蛋白由相应基因指导在核糖体中合成

B. 向导RNA中的双链区遵循碱基配对原则

C. 向导RNA可在逆转录酶催化下合成

D. 若α链剪切位点附近序列为-TCCAGAATC-则相应的向导RNA中的识别序列为-UCCAGAAUC-

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近年诞生的具有划时代意义的CRISPR/Cas9基因编辑技术可简单、准确地进行基因定点编辑。其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列，可人为选择DNA上的目标位点进行切割。下列相关叙述错误的是

A. Cas9蛋白由相应基因指导在核糖体中合成

B. 向导RNA中的双链区遵循碱基配对原则

C. 向导RNA可在逆转录酶催化下合成

D. 若α链剪切点附近序列为……TCCACAATC……则相应的识别序列为……UCCACAAUC……

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近年诞生的具有划时代意义的CRISPR/Cas9基因编辑技术可简单、准确地进行基因定点编辑。其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列,可人为选择DNA上的目标位点进行切割(如图)。下列相关叙述错误的是　(　　)

A. Cas9蛋白由相应基因指导在核糖体中合成

B. 向导RNA中的双链区遵循碱基配对原则

C. 向导RNA可在逆转录酶催化下合成

D. 若α链剪切位点附近序列为……TCCAGAATC……则相应的识别序列为……UCCAGAAUC……

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