“脑彩虹”是一项最新的大脑成像技术,通过荧光蛋白“点亮”大脑内的神经元,帮助科学家了解大脑。
(1)Cre酶是该技术的关键酶,能随机识别两个相同的loxP序列,催化如图1所示的反应。
通过Cre-loxP系统敲除基因的基本原理是:Cre酶随机识别DNA分子上两个相同的loxP序列并从特定位点切断DNA双链,切口被重新连接后,保留片段_____,从而实现目标基因的敲除。
(2)研究者设计图2所示的DNA片段,转人小鼠体内,获得仅含一个图2所示片段的转基因小鼠。
①构建基因表达载体时,需用限制酶和_____酶处理三种荧光蛋白基因、两种loxP序列,将它们与脑组织特异表达启动子M相连接。
②研究者用显微注射法将图2所示表达载体导入小鼠的_____中,得到仅含一个图2 所示片段的转基因小鼠,再经过进一步筛选,获得纯合的转基因小鼠a。
(3)图2所示序列的两个loxP1之间或两个loxP2之间的基因,只会被Cre酶识别并切割一次。为使脑组织细胞中Cre酶的表达受调控,研究者将Cre酶基因与启动子N(由信号分子X开启)连接,获得纯合转基因小鼠b,将图3所示纯合小鼠a和b杂交,得到F1。
①无信号分子X作用时,F1脑组织和其他组织细胞的色彩分别是_____。
②有信号分子X作用时,F1:出现“脑彩虹”,请阐述机理:_____。
(4)研究者希望具有更丰富的颜色组合,即在一个细胞内随机出现两种或两种以上颜色叠加,形成更多颜色的“脑彩虹”,请依据题目信息,写出设计思路:_____。
高三生物综合题困难题
“脑彩虹”是一项最新的大脑成像技术,通过荧光蛋白“点亮”大脑内的神经元,帮助科学家了解大脑。
(1)Cre酶是该技术的关键酶,能随机识别两个相同的loxP序列,催化如图1所示的反应。
通过Cre-loxP系统敲除基因的基本原理是:Cre酶随机识别DNA分子上两个相同的loxP序列并从特定位点切断DNA双链,切口被重新连接后,保留片段_____,从而实现目标基因的敲除。
(2)研究者设计图2所示的DNA片段,转人小鼠体内,获得仅含一个图2所示片段的转基因小鼠。
①构建基因表达载体时,需用限制酶和_____酶处理三种荧光蛋白基因、两种loxP序列,将它们与脑组织特异表达启动子M相连接。
②研究者用显微注射法将图2所示表达载体导入小鼠的_____中,得到仅含一个图2 所示片段的转基因小鼠,再经过进一步筛选,获得纯合的转基因小鼠a。
(3)图2所示序列的两个loxP1之间或两个loxP2之间的基因,只会被Cre酶识别并切割一次。为使脑组织细胞中Cre酶的表达受调控,研究者将Cre酶基因与启动子N(由信号分子X开启)连接,获得纯合转基因小鼠b,将图3所示纯合小鼠a和b杂交,得到F1。
①无信号分子X作用时,F1脑组织和其他组织细胞的色彩分别是_____。
②有信号分子X作用时,F1:出现“脑彩虹”,请阐述机理:_____。
(4)研究者希望具有更丰富的颜色组合,即在一个细胞内随机出现两种或两种以上颜色叠加,形成更多颜色的“脑彩虹”,请依据题目信息,写出设计思路:_____。
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基因工程中,GUS基因编码的酶可将无色底物生成蓝色产物,GFP基因会产生绿色荧光蛋白,这两种基因都可作为标记基因来研究发育生物学的问题。利用双CRISPR/Cas9系统和Cre/loxP重组酶系统技术可更好地实现该研究。请据图作答:
(1)生长在太平洋西北部的一种海蜇能发出绿色荧光,原因是________________________。
(2)图1为双CRISPR/Cas9系统作用示意图。该系统能够特异性识别DNA序列并切割特定位点,行使这些功能的分子结构分别 是___________、___________。
(3)图中向导RNA与DNA结合的原理是___________。将删除区切割后,转入基因与原DNA片段可通过形成_______拼接起来,形成新的DNA序列。
(4)双CRISPR/Cas9系统可直接在靶细胞内起作用,与传统的基因工程相比,该操作无需___________(填写工具)。与质粒载体导入外源基因比,双CRISPR/Cas9系统编辑的基因可以不含___________。
(5)图2为Cre/loxP重组酶系统作用示意图。利用双CRISPR/Cas9系统可精准地将loxP序列、GUS基因及GFP基因连接,接上35S启动子之后可在组织中检测出蓝色区而无绿色荧光区,这是由于_________而无法表达。Cre基因是重组酶基因,经38℃热处理后可被激活表达,在此前提下组织中可检测出绿色荧光区。
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目前癫痫治疗技术是E-神经元超导技术,这种技术是以大脑神经元治疗为核心,通过抑制大脑神经元异常放电,再介入有针对性的神经因子,帮助修复大脑神经元,同时双向调节机体免疫等来巩固治疗效果。
(1)大脑皮层是整个神经系统的高级中枢,具有________________(至少答出两点)等方面的高级功能。
(2)癫痫发作时,细胞膜往往会发生异常的离子流,导致了神经元的过度兴奋,此时内流的离子主要是________________。
(3)神经递质是大脑重要的化学信使物,对癫痫治疗有着重要的价值,治疗用的神经递质对突触后膜的作用是________________________。
(4)研究人员在研究E-神经元超导技术对癫痫病人的体液免疫和细胞免疫的影响时,理论上可采用对处理前后血液中的________数量进行定量测定,并与对照组进行比对的方法。
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目前癫病治疗技术是E---神经元超导技术。这种技术是以大脑神经元治疗为核心通过抑制大脑神经元异常放电,再介人有针对性的神经因子,帮助修复大脑神经元,同时双向调节机体免疫等来巩固治疗效果。
(1)癫病发作时,细胞膜往往会发生异常的离子流,导致了神经元的过度兴奋,此时内流的离子主要是________。
(2)神经递质是大脑重要的化学信使物,对癫痫治疗有着重要的价值,治疗用的神经理质对突触后膜的作用是_________________。
(3)研究人员在研究E—神经元超导技术对癫痫病人的体液免疫和细胞免疫的影响时,最好对处理前后血液中的______________数量进行定量测定,并与对照组进行比对。
(4)一般健康的成年人的下丘脑渗透压感受器接受某种刺激后会产生释放抗利尿激素增多面使尿量减少。这里描述的“某种刺激”是指________。正常婴幼儿经常尿床的主要原因是_________。
(5)大脑皮层是整个神经系统的高级中枢,具有____________(答出四点)等方面的高级功能。
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三位美国遗传学家发现了控制生物节律(即生物钟)的分子机制,其核心组件的简化示意图如下(PER蛋白是与生物节律有关的关键蛋白)。下列有关叙述正确的是
A. 人体大脑皮层中有调节生物节律的神经中枢
B. PER/TIM蛋白复合物、mRNA可通过核孔自由进出细胞核
C. PER/TIM蛋白复合物对PER基因表达的调控属于翻译水平的调控
D. PER蛋白积累后抑制PER基因的活性属于负反馈调节
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三位美国遗传学家发现了控制生物节律(即生物钟)的分子机制,其核心组件的简化示意图如下(PER蛋白是与生物节律有关的关键蛋白)。下列有关叙述正确的是
A. 人体大脑皮层中有调节生物节律的神经中枢
B. PER/TIM蛋白复合物、mRNA可通过核孔自由进出细胞核
C. PER/TIM蛋白复合物对PER基因表达的调控属于翻译水平的调控
D. PER蛋白积累后抑制PER基因的活性属于负反馈调节
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三位美国遗传学家发现了控制生物节律(即生物钟)的分子机制,其核心组件的简化示意图如下(PER蛋白是与生物节律有关的关键蛋白)。下列有关叙述正确的是
A. 人体大脑皮层中有调节生物节律的神经中枢
B. PER/TIM蛋白复合物、mRNA可通过核孔自由进出细胞核
C. PER/TIM蛋白复合物对PER基因表达的调控属于翻译水平的调控
D. PER蛋白积累后抑制PER基因的活性属于负反馈调节
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来自约翰霍普金斯医学院,细胞动力学中心等处的研究人员利用一种新技术,观测到每一刻人类活细胞中一个分子的精确运动,从而帮助科学家们了解一个蛋白为什么和如何在一个位点是用于细胞分裂和生长,而在另外一个位点却是意味着细胞死亡。“一种特殊蛋白的激活位点,以及这种活性的长短能影响细胞对外界刺激作出的反应”,Takanari Inoue博士表示,“我们的目标就是通过这种新型技术,在细胞的各处快速操纵蛋白活性。下列关于蛋白质的叙述正确的是:
A.所有的蛋白质都是由氨基酸构成的,所有的生物都有必需氨基酸和非必需氨基酸
B.所有的生物都有独立合成蛋白质的能力
C.蛋白质提前表达或过量表达可能导致生物性状发生改变
D.研究蛋白质的激活位点,只对治疗癌症有重要作用
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科学家利用生物工程技术,探究猪骨形态发生蛋白15(bmP15)基因具有表达特异性和示踪干细胞诱导分化为类卵母细胞的潜能。通过扩增猪bmP15基因的启动子片段与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因构建表达载体,该工程技术基本流程如下图。请回答下列问题:
(1)利用___________技术扩增bmP15基因的启动子片段的前提,是要有一段已知核苷酸序列,以便合成__________。
(2)过程①中,应先用限制酶________________处理表达载体1,以便插入bmP15基因的启动子构建表达载体2。
(3)过程②中,常采用___________技术将表达载体2成功导入受体细胞。
(4)培养受体细胞时,通常需在培养液中添加一定量的___________,以防污染;还需通入一定浓度的C02,目的是_________________。
(5)在实验结果的基础上,利用标记的_______基因作探针,与猪羊水干细胞的mRNA进行分子杂交,可进一步探究猪bmp基因特异性表达的原因。
(6)实验说明,bmP15基因启动子调控下EGFP基因在____________细胞表达。
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(6分)2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白(GFP)会发出绿色荧光,可借助荧光跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况,帮助推断蛋白质的功能。下图表示培育绿色荧光小鼠的基本流程:
请根据上述材料回答下列问题:
(1)在某种生物中检测不到绿色荧光,将水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内后,结果可以检测到绿色荧光。由此可知( )
A.该生物的基因型是杂合的
B.该生物与水母有很近的亲缘关系
C.绿色荧光蛋白基因在该生物体内得到了表达
D.改变绿色荧光蛋白基因的1个核苷酸对,就不能检测到绿色荧光
(2) 在培育绿色荧光小鼠的过程中,基因表达载体的构建是核心。完整的基因表达载体至少包括目的基因、________、终止子和启动子等部分。
(3) 上图操作流程中用到的工具酶有________。
(4) 为迅速增加绿色荧光小鼠的数量,可采用胚胎工程技术有超数排卵受精,________、________。
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