质粒A和质粒B各自有一个限制酶EcoR I和限制酶BamH I的识别位点，两种酶切割DNA产生的黏性末端不同。限制酶EcoR I剪切位置旁边的数字表示其与限制酶BamH I剪切部位之间的碱基对数(bp)。在含有质粒A和B的混合溶液中加入限制酶EcoR I和BamH I，令其反应充分；然后，向剪切产物中加入DNA连接酶进行反应，再将其产物导入大肠杆菌中。（实验中不考虑：无ori的质粒；拥有两个或以上ori的质粒；两个或以上质粒同时进入大肠杆菌；三个或以上DNA片段发生连接）请回答下列问题：
（1）只拥有质粒A的大肠杆菌________（填“可以”或“不可以”）在含有氨苄青霉素及乳糖作为唯一碳元素来源的培养基中生存？说明理由____________。
（2）DNA连接酶进行反应后，存在________种大小不同的质粒，有________种质粒使大肠杆菌能够在含有氨苄青霉素及乳糖作为唯一碳源的培养基中生存。
（3）绿色荧光蛋白基因是标记基因一种，标记基因的功能是________。
（4）质粒导入大肠杆菌通常要用________处理，其作用是________。
高三生物综合题中等难度题
质粒A和质粒B各自有一个限制酶EcoR I和限制酶BamH I的识别位点，两种酶切割DNA产生的黏性末端不同。限制酶EcoR I剪切位置旁边的数字表示其与限制酶BamH I剪切部位之间的碱基对数(bp)。在含有质粒A和B的混合溶液中加入限制酶EcoR I和BamH I，令其反应充分；然后，向剪切产物中加入DNA连接酶进行反应，再将其产物导入大肠杆菌中。（实验中不考虑：无ori的质粒；拥有两个或以上ori的质粒；两个或以上质粒同时进入大肠杆菌；三个或以上DNA片段发生连接）请回答下列问题：
（1）只拥有质粒A的大肠杆菌________（填“可以”或“不可以”）在含有氨苄青霉素及乳糖作为唯一碳元素来源的培养基中生存？说明理由____________。
（2）DNA连接酶进行反应后，存在________种大小不同的质粒，有________种质粒使大肠杆菌能够在含有氨苄青霉素及乳糖作为唯一碳源的培养基中生存。
（3）绿色荧光蛋白基因是标记基因一种，标记基因的功能是________。
（4）质粒导入大肠杆菌通常要用________处理，其作用是________。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
（2008秋•扬州期末）限制酶是一种核酸内切酶，可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列．如图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ和BglⅡ的识别序列和切割位点
切割出来的DNA黏性末端可以互补配对的是（ ）
A．BamHⅠ和EcoRⅠ B．BamHⅠ和 HindⅢ
C．BamHⅠ和BglⅡ D．EcoRⅠ和 HindⅢ
高三生物选择题中等难度题查看答案及解析
下图一为含有目的基因的DNA（外源DNA），图二为某质粒，表中是几种限制酶识别序列及其切割位点。用图中的外源DNA与质粒构建重组质粒。
| 限制酶 | BamHⅠ | SmaⅠ | EcoRⅠ | Hind Ⅲ |
| 识别序列及切割位点 |
|
|
|
|
请根据上述信息分析回答：
55、外源DNA、质粒分别有_______、_______个游离的磷酸基团。
56、DNA分子的一条多核苷酸链中，两个脱氧核苷酸之间以_________和_________相连。用SmaⅠ限制酶切割外源DNA，切开的是___________和__________之间相连的键。
57、如果用SmaⅠ酶切割外源DNA和质粒来重组质粒，其结果是_____________。
58、如果使用EcoRⅠ酶切割外源DNA和质粒，将目的基因片段与切割后的质粒混合，加入_________酶，获得的环状DNA可能有哪几种情况？______________。
59、如果使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理外源DNA和质粒，比用EcoRⅠ酶切割的优点是_____________________。
60、将重组质粒导入大肠杆菌中，培养基中需加入___________进行鉴别和筛选含有___________的细胞。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，它们的识别序列和黏性末端各不相同。质粒同时也含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题。
(1)将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状，这种变异属于________。
(2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞，一般情况下，烟草不会具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能________________________________。
(3)在构建重组质粒时，应选用________和________两种酶对质粒和含抗盐基因的DNA进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性。
(4)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，下图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。
培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有________、________。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是________(填数字)菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用__________标记的含抗盐基因的DNA片段作探针进行分子杂交检测，又要用______________的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。
(5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用________技术，愈伤组织经________进而形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加______。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
限制性内切酶的特点是： （ ）
A.只能识别GAATTC序列 B.识别特定的核苷酸序列和具有特定的酶切位点
C.识别黏性末端 D.切割质粒DNA的标记基因
高三生物选择题中等难度题查看答案及解析
科学家利用植物生产药用蛋白，研究出了用转基因马铃薯生产人的血清白蛋白的方法。下图表示EcoRⅠ、 BamH I两种限制酶在质粒上的切割位点，两种酶识别和切割位点见下表。回答下列相关问题。
(1)该工程中适宜用来切割质粒的限制酶是___________，原因是___________。
(2)取血清白蛋白基因可以利用反转录法构建的___________文库中获取，若利用PCR技术扩増血清蛋白基因，设计引物序列的主要依据是___________，还需要在引物的一端加上___________序列，以便于后续的剪切和连接。
(3)将目的基因和质粒进行连接后，需先用___________处理农杆菌以便将基因表达载体导入马铃薯细胞，筛选含有目的基因的细胞需在培养基中添加___________。
(4)从含有血清白蛋白基因的马铃薯细胞中提取血清白蛋白，需通过___________过程养到愈伤组织，从其中提取有效成分。
高三生物非选择题中等难度题查看答案及解析
近几十年来，植物基因工程取得相当大的进展，科学家将药用蛋白转向植物生产，研究出了用转基因马铃薯生产人的血清白蛋白的方法。如图表示EcoRⅠ、BamHⅠ两种限制酶在质粒上的切割位点，两种酶识别和切割位点见表。回答下列相关问题。
| 限制酶 | 识别序列和切割位点 |
| EcoRⅠ |
|
| BamHⅠ |
|
（1）该工程中适宜用来切割质粒的限制酶是_____，原因是_____。
（2）获取血清白蛋白基因可以利用反转录法构建的_____文库中获取，若利用PCR技术扩增血清蛋白基因，设计引物序列的主要依据是_____，还需要在引物的一端加上_____序列，以便于后续的剪切和连接。
（3）将目的基因和质粒进行连接后，需先用_____处理农杆菌以便将基因表达载体导入马铃薯细胞，筛选含有目的基因的细胞需在培养基中添加_____。
（4）从含有血清白蛋白基因的马铃薯细胞中提取血清白蛋白，需通过_____过程培养到愈伤组织，从其中提取。
高三生物非选择题困难题查看答案及解析
限制酶是一种核酸内切酶，可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、Hind Ⅲ和BglⅡ的识别序列和切割位点：
切割出来的DNA片段可以互补配对的是：
A．BamHⅠ和EcoRⅠ B．BamHⅠ和 Hind Ⅲ
C．BamHⅠ和BglⅡ D．EcoRⅠ和 Hind Ⅲ
高三生物单选题中等难度题查看答案及解析
限制酶是一种核酸内切酶，可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、Hind Ⅲ和BglⅡ的识别序列和切割位点：
切割出来的DNA片段可以互补配对的是（ ）
A．BamHⅠ和EcoRⅠ B．BamHⅠ和 Hind Ⅲ
C．BamHⅠ和BglⅡ D．EcoRⅠ和 Hind Ⅲ
高三生物选择题简单题查看答案及解析
下图为质粒限制酶酶切图谱。图中限制酶的识别序列及切割形成的黏性末端均不相同。若加入目的基因需用的限制酶是
A．HindIII和XbaI B．BamHI或NdeI
C．EcoRI或BamH I D．PstI 或KpmI
高三生物选择题简单题查看答案及解析
