近年来烟草叶绿体基因工程在提高光合效率、抗性和品质等方面取得了研究进展。下图是将拟南芥果糖1，6-二磷酸醛缩酶基因（简称“醛缩酶基因”）转人烟草叶绿体基因组的部分流程示意图，请据图同答下列问题：
（1）在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是_______图1中，利用PCR技术扩增拟南芥醛缩酶基因时，应选用的引物是_______。
（2）图2重组质粒中未标注出的必需元件还有____，构建该重组质料用的限制性核酸内切酶有_______。
（3）将拟南芥醛缩酶基因导人烟草叶绿体基因组时，一般将含有目的基因的质粒包裹在金粉上，通过轰击进入叶绿体中，这种方法称为_______，叶绿体基因组中存在基因区和基因间隔区，应将目的基因导入叶绿体基因组中的基因间隔区，其原因是____。
（4）检测目的基因是否成功导入受体细胞的方法是_______，该项技术用到的基因探针的制作方法是：在____上用放射性同位素等做标记。
高三生物综合题简单题
近年来烟草叶绿体基因工程在提高光合效率、抗性和品质等方面取得了研究进展。下图是将拟南芥果糖1，6-二磷酸醛缩酶基因（简称“醛缩酶基因”）转人烟草叶绿体基因组的部分流程示意图，请据图同答下列问题：
（1）在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是_______图1中，利用PCR技术扩增拟南芥醛缩酶基因时，应选用的引物是_______。
（2）图2重组质粒中未标注出的必需元件还有____，构建该重组质料用的限制性核酸内切酶有_______。
（3）将拟南芥醛缩酶基因导人烟草叶绿体基因组时，一般将含有目的基因的质粒包裹在金粉上，通过轰击进入叶绿体中，这种方法称为_______，叶绿体基因组中存在基因区和基因间隔区，应将目的基因导入叶绿体基因组中的基因间隔区，其原因是____。
（4）检测目的基因是否成功导入受体细胞的方法是_______，该项技术用到的基因探针的制作方法是：在____上用放射性同位素等做标记。
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拟南芥AtNX1基因编码一个位于液泡膜上的Na+转运蛋白，可将Na+逆浓度梯度转运至液泡内，以降低Na+毒害和提高植物的耐盐性。研究人员利用根瘤农杆菌侵染法将AtNXl基因转化到烟草等植物中，能显著提高其耐盐特性。
（1）AtNX1基因提高耐盐机理为：Na+转运至液泡内使__________升高，利于吸水。
（2）AtNX1基因可从构建拟南芥cDNA文库中获取。
①构建cDNA文库需要的工具酶有__________。
a.限制酶 b.DNA连接酶 c.RNA聚合酶 d.逆转录酶
②利用PCR技术从cDNA文库中获取AtNX1基因（基因序列未知），需根据AtNX1蛋白氨基酸序列设计引物，引物序列可以有多种原因是____________________。在PCR体系中需加入其中__________引物（填“全部”或“任意1种”或“其中2种”）。
（3）如图为培育转基因苗的基本操作过程。
①步骤Ⅲ目是________________________________________。
②步骤Ⅳ目是获得耐盐的____________，其培养基中除营养物质和植物激素外还应有__________。
③步骤Ⅳ和Ⅴ过程要注意控制培养基中__________的浓度比例，以便获得幼苗。
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拟南芥AtNX1基因编码一个位于液泡膜上的Na+转运蛋白，可将Na+逆浓度梯度转运至液泡内，以降低Na+毒害和提高植物的耐盐性。研究人员利用根瘤农杆菌侵染法将AtNXl基因转化到烟草等植物中，能显著提高其耐盐特性。
（1）AtNX1基因提高耐盐机理为：Na+转运至液泡内使__________升高，利于吸水。
（2）AtNX1基因可从构建拟南芥cDNA文库中获取。
①构建cDNA文库需要的工具酶有__________。
a.限制酶 b.DNA连接酶 c.RNA聚合酶 d.逆转录酶
②利用PCR技术从cDNA文库中获取AtNX1基因（基因序列未知），需根据AtNX1蛋白氨基酸序列设计引物，引物序列可以有多种原因是____________________。在PCR体系中需加入其中__________引物（填“全部”或“任意1种”或“其中2种”）。
（3）如图为培育转基因苗的基本操作过程。
①步骤Ⅲ目是________________________________________。
②步骤Ⅳ目是获得耐盐的____________，其培养基中除营养物质和植物激素外还应有__________。
③步骤Ⅳ和Ⅴ过程要注意控制培养基中__________的浓度比例，以便获得幼苗。
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为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜叶片细胞并获得了转基因油菜品种．
（1）从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因，然后利用_____技术分别进行扩增．
（2）如图1，选用图中的限制酶_____处理两个基因后再用_____酶处理，得到_____（填图中字母）端相连的融合基因．
（3）将上述融合基因插入图2所示Ti质粒的T﹣DNA中，构建_____并导入农杆菌中．将获得的农杆菌接种在含_____的固体平板上培养得到单菌落，再利用液体培养基震荡培养，得到用于转化的浸染液．
（4）剪取油菜的叶片放入浸染液中一段时间，此过程的目的是_____，进一步筛选后获得转基因油菜．
（5）用DNA﹣RNA分子杂交技术确定融合基因是否完成了_____（转录、翻译）．
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【生物一选修3:现代生物科技】为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜叶片细胞并获得了转基因油菜品种。
（1）从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因，然后利用_____________技术分别进行扩增。
（2）选用下图中的限制酶________处理两个基因后再用__________酶处理，得到_______（填图中字母）端相连的融合基因。
（3）将上述融合基因插人上图所示Ti质粒的T一DNA中，构建_____________并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含____________的固体平板上培养得到单菌落，
再利用液体培养基震荡培养，得到用于转化的浸染液。剪取油菜的叶片放入浸染液中一段时间，此过程的目的是 ，进一步培养筛选后获得转基因油菜。
（4）用DNA—RNA分子杂交技术确定融合基因是否完成了_______________ 过程。
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为增加油菜种子的含油量，牙研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜叶片细胞并获得了转基因油菜品种。请回答下列问题：
（1）从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因，然后利用________技术分别进行扩增。
（2）如图1，选用图中的限制酶__________处理两个基因后再用__________酶处理，得到__________（填图中字母）端相连的融合基因。
（3）将上述融合基因插入图2所示Ti质粒的T-DNA中，构建_________并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含_________的固体平板上培养得到单菌落，再利用液体培养基振荡培养，得到用于转化的侵染液。
（4）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是_________，进一步筛选后获得转基因油菜。
（5）用DNA-RNA分子杂交技术确定融合基因是否完成了________（填“转录”或“翻译”)。
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科研人员获得了两种单基因被“敲除”的拟南芥突变体——C2和C5，与野生型比较，根毛长度或主根长度发生了变化，如下图所示。
(I)科研人员通过____法将T-DNA上插入了青霉素抗性基因的Ti质粒转入拟南芥细胞中，经筛选获得C2和C5突变体。从功能上来说，筛选转基因拟南芥时所使用的含有青霉素的培养基属于____培养基。
(2)据图可知，C2的表现型是____，推测C2的基因被“敲除”后，很可能影响了细胞的____生长。
(3)将C2和C5突变体杂交，F1全部表现为野生型，说明这两种突变均为____突变。让F1植株随机授粉，将所得的种子播种在含有青霉素的培养基中，发现有l%的种子不能完成萌发，推测这两对基因____。预测双突变体植株的表现型为____，双突变体植株在F2中所占比例为____。
(4)研究发现，C5植株根部的分生细胞在有丝分裂时缺乏一种周期性出现和消失的酶，这种酶与纤维素的合成有关。请解释C5植株出现突变性状的原因________________。
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科研人员获得了两种单基因被“敲除”的拟南芥突变体——C2和C5，与野生型比较，根毛长度或主根长度发生了变化，如下图所示。
(I)科研人员通过____法将T-DNA上插入了青霉素抗性基因的Ti质粒转入拟南芥细胞中，经筛选获得C2和C5突变体。从功能上来说，筛选转基因拟南芥时所使用的含有青霉素的培养基属于____培养基。
(2)据图可知，C2的表现型是____，推测C2的基因被“敲除”后，很可能影响了细胞的____生长。
(3)将C2和C5突变体杂交，F1全部表现为野生型，说明这两种突变均为____突变。让F1植株随机授粉，将所得的种子播种在含有青霉素的培养基中，发现有l%的种子不能完成萌发，推测这两对基因____。预测双突变体植株的表现型为____，双突变体植株在F2中所占比例为____。
(4)研究发现，C5植株根部的分生细胞在有丝分裂时缺乏一种周期性出现和消失的酶，这种酶与纤维素的合成有关。请解释C5植株出现突变性状的原因________________。
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为了研究拟南芥的基因A、B在减数分裂中的功能，研究人员开展了如下实验。
（1）通过_________法将含卡那霉素抗性基因的T-DNA插入到野生型（AABB）拟南芥基因组中，在含_________的培养基中培养，筛选得到基因型分别为AaBB和AABb的单突变体。
（2）将上述得到的两种单突变体杂交得到F1，F1中具有卡那霉素抗性的植株占_____。将具有卡那霉素抗性的F1分单株种植，收获F2单独统计，若F2中抗性：不抗性=15:1，则说明F1的基因型为_____, 其F2抗性植株中纯合子的比例为_____。
（3）F2中各植株的茎叶相似，无法区分。为进一步筛选得到F2中的突变体纯合子，提取F2抗性植株的叶片DNA，分别用引物“P1+ P3”组合及“P2+P3”组合进行PCR，检测是否扩增，鉴定原理如下图所示。（插入T-DNA的A基因过大，不能完成PCR）若_________，则相应植株为抗性纯合子aa。依据同样的原理，可得到bb。
（4）下图为两种突变体拟南芥减数分裂过程中的染色体行为变化。据图推测，基因A和B的突变会导致减数分裂发生的变化分别是_________和_________。
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叶绿体基因工程是将外源基因导入叶绿体中的一项工程技术，烟草叶绿体基因工程在基础研究、遗传改良以及生物反应器研究等方面都发挥了极为重要的作用，表现出巨大的应用前景。请回答下列间题:
(1)叶绿体基因工程常将含有外源基因的质粒包裹在金粉上，通过轰击进入叶绿体中从而实现目的基因的导入，这种目的基因导入的方法称为________。叶绿体基因组分为基因区和基因间隔区，叶绿体中基因间隔区序列通常被作为插入位点，其目的是____________________。检测目的基因是否成功导入的方法是_______________________。
(2烟草对壮观霉素(又名奇霉素，一种抗生素)具有较强的敏感性，构建基因表达载体时，质粒上的状观霉素抗性基因可作为_______________，其作用是___________；用于筛选和培养的培养基中应加入____________。
(3)与细胞核基因工程相比，叶绿体基因工程能防止细胞质内的蛋白酶对目标蛋白的消化作用。其原因是__________________________，并且由于_____________________________，不会造成基因污染。
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