乳头瘤病毒HPV可导致人患宫颈癌,科研人员将HPV某外壳蛋白A基因构建成表达载体,经包装或直接注入体内,表达出相应抗原,诱导机体产生免疫反应。该方法获得的疫苗称为DNA疫苗。请回答下列问题:
(1)获取A基因的方法:
①方法一:提取HPV的DNA,利用PCR技术扩增A基因时,至少经过_______次循环才能获得该基因,此过程中利用的原料是____________________。
②方法二:从宿主细胞中提取总RNA,以与__________________互补的一段单链DNA作为引物,加入____________酶获得cDNA,然后经PCR扩增获得大量的A基因。
(2)构建基因表达载体时,常用不同的限制酶切割质粒与目的基因,其具备的优势是________________________。
(3)DNA疫苗是预防性生物制品,与传统疫苗相比其具备的优点有__________________(至少一点),而单克隆抗体作为治疗性生物制品,具备的优点是_______________________,制备单克隆抗体需要以_________________技术为基础。
高三生物综合题中等难度题
乳头瘤病毒HPV可导致人患宫颈癌,科研人员将HPV某外壳蛋白A基因构建成表达载体,经包装或直接注入体内,表达出相应抗原,诱导机体产生免疫反应。该方法获得的疫苗称为DNA疫苗。请回答下列问题:
(1)获取A基因的方法:
①方法一:提取HPV的DNA,利用PCR技术扩增A基因时,至少经过_______次循环才能获得该基因,此过程中利用的原料是____________________。
②方法二:从宿主细胞中提取总RNA,以与__________________互补的一段单链DNA作为引物,加入____________酶获得cDNA,然后经PCR扩增获得大量的A基因。
(2)构建基因表达载体时,常用不同的限制酶切割质粒与目的基因,其具备的优势是________________________。
(3)DNA疫苗是预防性生物制品,与传统疫苗相比其具备的优点有__________________(至少一点),而单克隆抗体作为治疗性生物制品,具备的优点是_______________________,制备单克隆抗体需要以_________________技术为基础。
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(14分,每空2分)乳头瘤病毒(HPV)持续感染可导致宫颈癌发生。科研人员将HPV外壳L1蛋白基因与在人体中不能复制但能有效表达外源基因的痘苗病毒重组,制备新型疫苗。
(1)为研究重组疫苗的保护作用,将生长发育状况一致的小鼠随机均分为三组,1组注射 ,2组注射100μL PBS缓冲液配制的痘苗病毒作为对照,3组注射 作为空白对照。
(2)给上述三组小鼠皮下注射C3细胞(含有HPV基因的癌细胞),观察、记录小鼠成瘤情况,结果如下。
据实验结果分析,尽管各组小鼠都可成瘤,但实验组小鼠____________,说明重组病毒疫苗具有一定的免疫保护作用。接种重组病毒疫苗的小鼠体内表达____________作为抗原,刺激机体产生特异性免疫。皮下注射C3细胞时,HPV引起______________细胞迅速增殖、分化,产生大量抗体,从而起到免疫保护作用。根据免疫学知识,注射疫苗后,只有诱发出机体的_________免疫,才能有效清除癌细胞。
(3)若欲检验重组病毒疫苗是否有治疗作用,对小鼠进行的处理最恰当的是____(选填下列字母)。
a.先注射HPV病毒,一段时间后注射重组病毒疫苗
b.先注射重组病毒疫苗,一段时间后再注射HPV病毒
c.先注射C3细胞,一段时间后注射重组病毒疫苗
d.先注射重组病毒疫苗,一段时间后再注射C3细胞
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乳头瘤病毒(HPV)持续感染可导致宫颈癌发生。科研人员将HPV外壳L1蛋白基因与在人体中不能复制但能有效表达的痘苗病毒重组,制备新型疫苗。
(1)为研究重组疫苗的保护作用,将生长发育状况一致的小鼠随机均分为三组,1组注射用PBS缓冲液配制的重组病毒疫苗100 μL,2组注射100 μL PBS缓冲液配制的痘苗病毒作为对照,3组注射__________________作为空白对照。
(2)给上述三组小鼠皮下注射C3细胞(含有HPV基因的癌细胞),观察、记录小鼠成瘤情况,结果如下。
据实验结果分析,尽管各组小鼠都可成瘤,但实验组小鼠________________________(两点),说明重组病毒具有一定的免疫保护作用。接种重组病毒疫苗的小鼠体内表达L1蛋白作为__________,刺激机体产生特异性免疫。皮下注射C3细胞时,HPV引起____________细胞迅速增殖、分化,效应B细胞产生大量抗体,从而起到免疫保护作用。根据免疫学知识,注射疫苗后,只有诱发出机体的__________免疫,才能有效清除癌细胞。
(3)若欲检验重组病毒疫苗是否有治疗作用,对小鼠进行的处理恰当的是________(选填下列字母)。
a.先注射C3细胞,一段时间后注射重组病毒疫苗
b.先注射重组病毒疫苗,一段时间后再注射C3细胞
(4)若将小鼠B淋巴细胞注入家兔体内,产生免疫反应后,家兔血清能使小鼠T细胞凝集成细胞团,原因是________________________________________________。
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人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生。回答下列问题:
(1)制备抗HPV的单克隆抗体时,给小鼠注入的抗原是__________,然后从小鼠体内获得能产生相应抗体的细胞,这种细胞内参与抗体合成和分泌的细胞器有__________。
(2)制备单克隆抗体过程中用到了小鼠的骨髓瘤细胞,这是因为该细胞具有__________的特点。B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合时,常用的诱导因素有__________等。
(3)在HAT培养基上能够连续增殖的细胞是___________,该细胞所产生的抗体__________(填“一定”或“不一定”)能抗HPV。对HPV抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞进行克隆化培养时,先将培养液中的细胞浓度稀释到3~10个/mL,然后在多孔细胞培养板的每个孔中只能加入0.1 mL细胞稀释液,绝对不能多加,原因是__________。
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人感染乳头瘤病毒(HPV)可诱发宫颈癌等恶性肿瘤。国际上至今已经有预防性的四价疫苗(HPV6,11,16,18)等可以预防这四种病毒类型感染,下列说法错误的是( )
A.为制备该疫苗,将HPV外壳蛋白L1基因与载体连接,导入受体细胞。受体细胞将目的基因转录,再翻译出L1蛋白,这样就获得了疫苗的有效成分。
B.人体接种该疫苗后,疫苗作为抗原刺激机体产生特异性抗体。
C.免疫过的机体,再次接触HPV,浆细胞会迅速繁殖、分化,产生大量抗体。
D.HPV感染者接种疫苗后病变的比例没有明显差异,原因可能是该疫苗未能明显诱导细胞免疫清除体内HPV.
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人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生,以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程,请据图回答:
(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有 。
(2)若要分析杂交瘤细胞中染色体,可通过 等过程制成装片,然后在显微镜下观察。杂交瘤细胞中染色体数目与普通淋巴细胞相比具有的特点是 ,在HAT培养基上存活的细胞可能包括 (填下列序号)。①无抗体分泌的细胞 ②抗HPV抗体的分泌细胞③其它无关抗体的分泌细胞
(3)对于抗体检测呈 性的杂交克隆应尽早进行克隆化,克隆化的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3~l0个细胞/mL,每孔加入细胞稀释液 mL(0.1/1/10),使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的。
(4)由上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体,理由是 。
(5)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG),该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的一种制备单克隆抗体技术外,请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路 。
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近年来许多实验资料显示,人乳头状瘤病毒(HPV)在宫颈癌发生过程中可能起了更重要的作用。抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生,以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程。请据图回答下列问题:
(1)将特定的抗原注入小鼠的目的是_____________。上述单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有_____________。
(2)在HAT培养基上存活的细胞可能包括_____________(填下列序号)①无抗体分泌的细胞②抗HPV抗体的分泌细胞③其它无关抗体的分泌细胞,但能生长的只有_____________,该细胞的特点是__________。
(3)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖的调控基因(prG),该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路:通过基因工程向_____________(细胞)中导入prG,还可以利用_____________技术,将浆细胞的细胞核移植到去核的_____________中。
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近年来许多实验资料显示,人乳头状瘤病毒(HPV)在宫颈癌发生过程中可能起了更重要的作用。抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生,以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程。请据图回答下列问题:
(1)将特定的抗原注入小鼠的目的是_____________。上述单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有_____________。
(2)在HAT培养基上存活的细胞可能包括_____________(填下列序号)①无抗体分泌的细胞②抗HPV抗体的分泌细胞③其它无关抗体的分泌细胞,但能生长的只有_____________,该细胞的特点是__________。
(3)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖的调控基因(prG),该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路:通过基因工程向_____________(细胞)中导入prG,还可以利用_____________技术,将浆细胞的细胞核移植到去核的_____________中。
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人乳头瘤病毒(HPV)是一种双链环状DNA病毒,由病毒蛋白衣壳和病毒基因组DNA构成,高危型HPV可诱发宫颈癌。回答以下问题:
(1)下列各项中对于HPV的杀伤力最小的是____________。
A.高温 B.γ射线 C.强酸 D.脂溶剂
(2)体内的宫颈癌细胞可被__________________细胞特异性清除,该过程中的细胞识别是通过____________(方式)进行的。
(3)为研究药物力达霉素(LDM)对人宫颈癌细胞周期的影响,在体外培养的人宫颈癌细胞培养基中加入不同浓度的LDM,统计G1期(DNA复制前期)、S期(DNA复制期),G2期(DNA复制后期)细胞数目,部分结果如图。结果表明。在施用LDM后,人宫颈癌细胞的细胞周期变____________,LDM可能影响了人宫颈癌细胞的____________(填“核DNA复制”或“蛋白质合成”)过程。若要研究LMD对人宫颈癌细胞转移能力的影响,可对人宫颈癌细胞膜的____________成分进行分析。
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乳头瘤状病毒(HPV,遗传物质为DNA)的基因E6、E7编码的蛋白质与抑癌基因结合可使细胞成为恶性增殖细胞,导致宫颈癌的发生。目前HPV疫苗已获批准上市。以下说法正确的是
A. HPV只含有核糖体一种细胞器
B. 宫颈癌细胞的抑癌基因可能没有发生突变
C. 接种了HPV疫苗的女性不会有宫颈癌发病危险
D. HPV感染人体后,可在人体内环境中繁殖
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