CAR-T细胞疗法是通过设计CAR基因，并导入癌症患者的T细胞中，使其转化为CAR-T细胞，CAR-T细胞膜上的CAR蛋白与癌细胞表面抗原特异结合后，激活CAR-T细胞使其增殖、分化，从而实现对癌细胞的特异性杀伤和记忆，主要过程如下图。请回答：
(1)过程①中，需要先要用____切割不同的DNA片段形成黏性末端，再利用____连接形成CAR基因。
(2)将CAR基因导入患者T细胞前，必须先完成过程②，一是因为CAR基因片段小，在细胞中容易丟失;二是因为缺少____，CAR基因在T细胞中不能复制。
(3)完成过程③常用方法是____。此外，还可以先将CAR基因整合到逆转录病毒载体中，再利用病毒的____性导入并将CAR基因整合到T细胞的____上。
(4)根据图示，CAR-T细胞对癌细胞的特异性杀伤主要取决于CAR蛋白____区。CAR-T细胞疗法具有持久性是因为CAR-T细胞能够在体内____。
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CAR-T细胞疗法是通过设计CAR基因，并导入癌症患者的T细胞中，使其转化为CAR-T细胞，CAR-T细胞膜上的CAR蛋白与癌细胞表面抗原特异结合后，激活CAR-T细胞使其增殖、分化，从而实现对癌细胞的特异性杀伤和记忆，主要过程如下图。请回答：
(1)过程①中，需要先要用____切割不同的DNA片段形成黏性末端，再利用____连接形成CAR基因。
(2)将CAR基因导入患者T细胞前，必须先完成过程②，一是因为CAR基因片段小，在细胞中容易丟失;二是因为缺少____，CAR基因在T细胞中不能复制。
(3)完成过程③常用方法是____。此外，还可以先将CAR基因整合到逆转录病毒载体中，再利用病毒的____性导入并将CAR基因整合到T细胞的____上。
(4)根据图示，CAR-T细胞对癌细胞的特异性杀伤主要取决于CAR蛋白____区。CAR-T细胞疗法具有持久性是因为CAR-T细胞能够在体内____。
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CAR-T细胞疗法是通过设计CAR基因，并导入癌症患者的T细胞中，使其转化为CAR-T细胞，CAR-T细胞膜上的CAR蛋白与癌细胞表面抗原特异结合后，激活CAR-T细胞使其增殖、分化，从而实现对癌细胞的特异性杀伤和记忆，主要过程如下图。请回答：
(1)过程①中，需要先要用____切割不同的DNA片段形成黏性末端，再利用____连接形成CAR基因。
(2)将CAR基因导入患者T细胞前，必须先完成过程②，一是因为CAR基因片段小，在细胞中容易丟失;二是因为缺少____，CAR基因在T细胞中不能复制。
(3)完成过程③常用方法是____。此外，还可以先将CAR基因整合到逆转录病毒载体中，再利用病毒的____性导入并将CAR基因整合到T细胞的____上。
(4)根据图示，CAR-T细胞对癌细胞的特异性杀伤主要取决于CAR蛋白____区。CAR-T细胞疗法具有持久性是因为CAR-T细胞能够在体内____。
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CAR-T细胞疗法是通过设计CAR基因，并导入癌症患者的T细胞中，使其转化为CAR-T细胞，CAR-T细胞膜上的CAR蛋白与癌细胞表面抗原特异结合后，激活CAR-T细胞使其增殖、分化，从而实现对癌细胞的特异性杀伤和记忆，主要过程如下图。请回答：
(1)过程①中，需要先要用____切割不同的DNA片段形成黏性末端，再利用____连接形成CAR基因。
(2)将CAR基因导入患者T细胞前，必须先完成过程②，一是因为CAR基因片段小，在细胞中容易丟失;二是因为缺少____，CAR基因在T细胞中不能复制。
(3)完成过程③常用方法是____。此外，还可以先将CAR基因整合到逆转录病毒载体中，再利用病毒的____性导入并将CAR基因整合到T细胞的____上。
(4)根据图示，CAR-T细胞对癌细胞的特异性杀伤主要取决于CAR蛋白____区。CAR-T细胞疗法具有持久性是因为CAR-T细胞能够在体内____。
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CAR-T细胞疗法是通过设计CAR基因，并导入癌症患者的T细胞中，使其转化为CAR-T细胞，CAR-T细胞膜上的CAR蛋白与癌细胞表面抗原特异结合后，激活CAR-T细胞使其增殖、分化，从而实现对癌细胞的特异性杀伤和记忆，主要过程如下图。请回答：
（1）要获取CAR基因，可采取PCR技术进行大量扩增，其原理是___________________。
（2）将CAR基因导入患者T细胞前，需完成过程①，该过程所需要的酶有__________，连接形成pCDH—CAR上除了目的基因外，还有一些必须的部分，比如__________，它可使转录在需要的地方停止下来。
（3）完成过程②的常用方法是__________法，受体细胞是__________。
（4）检测CAR-T细胞能够产生CAR蛋白所采取的方法是__________。
（5）构建好的CAR-T细胞还需要再体外进行扩增，扩增时需要定期更换培养液，这样做的目的是______________________________。
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CAR--T细胞疗法是通过设计CAR基因，并导人癌症患者的T细胞中，使其转化为CAR-T细胞，CAR--T细胞膜上的CAR蛋白与癌细胞表面抗原特异结合后，激活CAR-T细胞使其增殖、分化，从而实现对癌细胞的特异性杀伤和记忆。主要过程如下图。请回答：
（1）要获取CAR基因，可采取PCR技术进行大量扩增，前提是_________________________。
（2）将CAR基因导人患者T细胞前，需完成过程[①]___________________该过程中先要用___________切割含有CAR基因的DNA片段和_______， 以形成相同的黏性末端，再用DNA连接酶连接形成pCDH-CAR， pCDH- -CAR上除了目的基因外，还有一些必须的部分，比如_________________，它是RNA聚合酶识别和结合的部位。
（3）完成过程②常用方法是____________法。此外，还可以先将CAR基因整合到逆转录病毒载体中，再利用病毒的________________性导人并将CAR基因整合到T细胞的_________________上。
（4）检测CAR- T 细胞中的CAR基因是否转录出了mRNA所采用的方法是_________________________。
（5）在将CAR--T细胞输给病人进行治疗之前，还需在实验室内进行细胞扩增培养。体外培养CAR-T细胞的培养液中除合成培养基的成分外，一般还需添加_____________________________________等天然成分。
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CAR-T疗法即嵌合抗原受体T细胞免疫疗法，其治疗过程：首先从患者体内分离具有癌症杀伤潜力的T细胞，通过基因工程改造让其带上一种 癌症抗原特异性的嵌合性受体，使它们可以发现和攻击癌细胞，将这些细胞在体外扩增后再输入到患者体内。下列有关叙述正确的是（ ）
A.借助嵌合抗原受体，T细胞能定向杀伤肿瘤细胞
B.基因改造后，T细胞内的RNA和蛋白质种类增多
C.体外扩增CAR-T细胞时，需要用选择培养基进行筛选
D.CAR-T 细胞输回体内后，能有效激活各类肿瘤细胞的溶酶体酶活性
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CAR—T技术是近几年治疗肿瘤的一种新型细胞疗法，它通过收集患者T细胞对其进行遗传修饰，使之携带能指导嵌合抗原受体（CAR）合成的新基因（具体修饰过程如图）。最后，将这些修饰过的CAR—T细胞输回患者体内，从而使CAR指导T细胞靶向高效杀死肿瘤细胞。据图分析，下列说法正确的是（ ）
A.构建CAR-T细胞所使用的目的基因是TCR跨膜区基因和抗体基因
B.①是指目的基因的获取，②是指基因表达载体的构建
C.重组分子导入T细胞后，应当采用DNA分子杂交法来检验指导CAR合成的基因是否转录成功
D.CAR—T技术融合了体外基因治疗的方法
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目前，针对多种血液肿瘤细胞的CAR—T细胞免疫疗法已获成功，应用前景广阔。CAR—T细胞免疫疗法是指将嵌合抗原受体(CAR)导入T细胞中，从而产生肿瘤特异性识别的T细胞，以激发人体自身免疫系统来消灭肿瘤。回答下列问题：
(1)CAR—T细胞免疫疗法能对不同肿瘤细胞进行靶向治疗的原因是_________________，该过程体现了细胞膜的__________功能。
(2)T细胞受抗原刺激后可增殖分化成_____，进一步行使免疫功能，最终消灭自身肿瘤细胞，这体现了免疫系统的____________功能。
(3)在临床试验中，部分患者在接受CAR—T细胞免疫疗法后，出现呼吸困难的症状说明该疗法可能对神经系统中的__________造成不良影响。
(4)为探究机体清除肿瘤是否与体液免疫有关，某同学设计实验方案如下：将肿瘤体积大小相同的若干小鼠(体内已有的免疫细胞和造血干细胞已被射线杀死)均分为A、B两组， A组做手术但不切除骨髓，B组切除骨髓，一段时间后比较两组小鼠肿瘤体积大小。该实验方案不能达到探究目的，原因是______________________________。
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CAR-T 是一种免疫细胞疗法，通过改造人体自身的免疫 T 细胞，实现对癌细胞精确化、个体化的治疗。下图是该疗法的原理示意图。请结合图示，回答下列问题：
（1）该疗法的第一步需要从患者机体采血，分离出 T 细胞，放入_____________ （仪器）中保温培养。在培养过程中除了添加糖、氨基酸等必要的营养成分外，往往还添加动物血清，原因是 _________。
（2）然后，在体外利用一种树突状细胞（可以呈递癌细胞抗原的一种吞噬细胞），将 T 细胞激活，使其增殖并分化为________ 。
（3）理论上，构建的基因组文库中含有生物的 ______基因。在体外利用 DNA 重组技术，将编码癌细胞抗原受体（AR）的基因插入到某种病毒的 DNA 中，使病毒作为 AR 的____________，在感染激活的 T 细胞时，将 AR 基因整合到 T 细胞的_____ 中。
（4）T 细胞表面嵌合了 AR，就成为 CAR-T 细胞，通常采用 ______________________ 技术检测AR 基因是否在 T 细胞中转录成功。CAR-T 再经过必要的质量检测，回输至患者体内，该方法采用的是自身 T 细胞，而不用异体 T 细胞，其原因是______。
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CAR-T疗法就是嵌合抗原受体T细胞免疫疗法，是把一个含有能识别肿瘤细胞且激活T细胞的嵌合抗原受体的病毒载体转入T细胞，即把T细胞改造成CAR-T细胞这是一种治疗肿瘤的新型精准靶向疗法，近几年通过优化改良在临床肿瘤治疗上取得很好的效果，是一种非常有前景的，能够精准、快速、高效，且有可能治愈癌症的新型肿瘤免疫治疗方法。下面相关叙述错误的是（ ）
A.将T细胞改造成CAR-T细胞过程中，运用了基因工程技术
B.在体外培养以大量扩增CAR-T细胞时，培养基中需加入动物血清
C.CAR-T疗法是从病人身上收集足够的高质量的T细胞，进行改造后回输入人体，所以不会有任何不良反应
D.有案例显示，T细胞中混入了B细胞杂质，导致病人对CAR-T疗法产生抗性，说明细胞的纯度非常重要
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