人肌红蛋白(Myo)是早期诊断急性心肌梗塞的生化标志物之一。为制备抗Myo的单克隆抗体,科研人员进行研究。
(1)科研人员以Myo作为抗原免疫小鼠,取小鼠的脾脏细胞与_________细胞诱导融合。用_________培养基筛选融合细胞,得到杂交瘤细胞。
(2)将得到的杂交瘤细胞接种到多孔培养板上,进行抗体阳性检测,之后稀释、培养、再进行抗体阳性检测并多次重复上述操作,多次重复该过程的目的是筛选获得抗Myo抗体_________的杂交瘤细胞。
(3)双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法,具体原理如下图:
固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合,这是由于不同抗体与同一抗原表面的_________结合。该检测方法中,酶标抗体的作用是_________。
(4)研究人员获得三种抗Myo单克隆抗体,分别记为A、B、C。为检测它们之中哪两种适合用于双抗体夹心法,科研人员需要进行_________组实验,检测并比较各组实验的_________。
高三生物实验题中等难度题
人肌红蛋白(Myo)是早期诊断急性心肌梗塞的生化标志物之一。为制备抗Myo的单克隆抗体,科研人员进行研究。
(1)科研人员以Myo作为抗原免疫小鼠,取小鼠的脾脏细胞与_________细胞诱导融合。用_________培养基筛选融合细胞,得到杂交瘤细胞。
(2)将得到的杂交瘤细胞接种到多孔培养板上,进行抗体阳性检测,之后稀释、培养、再进行抗体阳性检测并多次重复上述操作,多次重复该过程的目的是筛选获得抗Myo抗体_________的杂交瘤细胞。
(3)双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法,具体原理如下图:
固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合,这是由于不同抗体与同一抗原表面的_________结合。该检测方法中,酶标抗体的作用是_________。
(4)研究人员获得三种抗Myo单克隆抗体,分别记为A、B、C。为检测它们之中哪两种适合用于双抗体夹心法,科研人员需要进行_________组实验,检测并比较各组实验的_________。
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人心肌细胞中的肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)在血液中含量上升是心肌损伤的特异指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体,科研人员完成了以下过程。
(1)细胞体外培养一般需要在合成培养基中添加_______等天然成分。细胞培养中,为防止有害代谢物的积累,可采用________的方法。细胞培养所需气体主要有________。
(2)实验之初,每隔1周用cTnI作为抗原注射小鼠一次,共注射三次,其目的是___________。注射抗原一段时间后,取部分脾脏组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合,常用的诱导因素有____________。
(3)图中②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上,进行抗体阳性检测,之后稀释、培养、再检测,并多次重复上述操作,其目的是筛选获得能产生_______的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞具有的特点是___________。
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布鲁菌病是一种由 布鲁菌引起的人鲁共患传染病,简称布病。为研制快速检测布病的产品,科研人员对布鲁菌单克隆抗体的制备进行了相关研究。回答下列问题:
(1)布鲁菌单克隆抗体能用于布病的检测,其原理是依据了__________________________的特性。
(2)在制备布鲁菌单克隆抗体时,要先在小鼠体内注射布鲁菌的脂多糖(LPS), 才能在小鼠的____________________细胞中形成相应B淋巴细胞,注射LPS后能形成相应B淋巴细胞的原因是_______________________________________________________________。
(3)在获得相应B淋巴细胞后,要将其与鼠的______________________融合,并用特定的选择性培养基进行筛选,在该培养基上_____________细胞和____________的细胞都会死亡,从而可筛选出具有___________________________________________________特点的杂交瘤细胞。
(4)利用杂交瘤细胞进行体外培养获得单克隆抗体后,可用该抗体分别与布鲁菌和其他细菌的裂解抗原进行反应,若____________________________,则说明该单克隆抗体的特异性强。
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Graves病(GD)可导致甲状腺功能亢进。研究发现,GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间粘附分子1(ICAM-1),导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体,对治疗GD进行了尝试。
(1)用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠,几周后取这些免疫小鼠的血清,分别加入多孔培养板的不同孔中,多孔培养板中需加入________以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果,选出抗原-抗体反应最________(强/弱)的培养孔所对应的小鼠M。
(2)取小鼠M的脾脏细胞制备成细胞悬液,与实验用骨髓瘤细胞进行融合,用选择培养基筛选得到具有________能力的细胞。核苷酸合成有两个途径,物质A可以阻断其中的全合成途径(如下图)。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶,制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。可用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”筛选特定的杂交瘤细胞。
融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养,一段时间后培养基中________(有/无)骨髓瘤细胞生长,说明培养基符合实验要求。杂交瘤细胞可以在HAT培养基上大量繁殖的原因是________________。
(3)将获得的上述细胞在多孔培养板上培养,用ICAM-1检测,从中选择________的杂交瘤细胞,植入小鼠腹腔中克隆培养,一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。
(4)若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用,可将若干GD模型小鼠等分为三组,请补充下表中的实验设计。
对照组(A) | 131I治疗组(B) | 单克隆抗体治疗组(C) |
给GD模型小鼠腹腔注射0.1mL无菌生理盐水 | 给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1mL无菌生理盐水的131I | ________ |
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Graves病(GD)可导致甲状腺功能亢进。研究发现,GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间粘附分子1(ICAM-1),导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体,对治疗GD进行了尝试。
(1)用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠,几周后取这些免疫小鼠的血清,分别加入多孔培养板的不同孔中,多孔培养板中需加入________以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果,选出抗原-抗体反应最________(强/弱)的培养孔所对应的小鼠M。
(2)取小鼠M的脾脏细胞制备成细胞悬液,与实验用骨髓瘤细胞进行融合,用选择培养基筛选得到具有________能力的细胞。核苷酸合成有两个途径,物质A可以阻断其中的全合成途径(如下图)。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶,制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。可用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”筛选特定的杂交瘤细胞。
融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养,一段时间后培养基中________(有/无)骨髓瘤细胞生长,说明培养基符合实验要求。杂交瘤细胞可以在HAT培养基上大量繁殖的原因是________________。
(3)将获得的上述细胞在多孔培养板上培养,用ICAM-1检测,从中选择________的杂交瘤细胞,植入小鼠腹腔中克隆培养,一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。
(4)若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用,可将若干GD模型小鼠等分为三组,请补充下表中的实验设计。
对照组(A) | 131I治疗组(B) | 单克隆抗体治疗组(C) |
给GD模型小鼠腹腔注射0.1mL无菌生理盐水 | 给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1mL无菌生理盐水的131I | ________ |
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Graves病(GD)可导致甲状腺功能亢进.研究发现,GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间粘附分子1(ICAM﹣1),导致甲状腺肿大.科研人员通过制备单克隆抗体,对治疗GD进行了尝试.
(1)用ICAM﹣1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠,几周后取这些免疫小鼠的血清,分别加入多孔培养板的不同孔中,多孔培养板中需加入 以检测这些小鼠产生的抗体.依据反应结果,选出 反应最强的培养孔所对应的小鼠M.
(2)实验用骨髓瘤细胞置于 恒温培养箱中37℃培养,融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择性培养基中培养,一段时间后培养基中 (填“有”或“无”)骨髓瘤细胞生长,说明培养基符合实验要求.
(3)取小鼠M的脾脏细胞制备成细胞悬液,与实验用骨髓瘤细胞进行融合,用选择培养基筛选得到具有 能力的细胞.将获得的上述细胞在多孔培养板上培养,用ICAM﹣1检测,从中选择大量产生 的杂交瘤细胞,植入小鼠腹腔中 培养,一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体.
(4)若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用,可将若干GD模型小鼠等分为三组,请补充下表中的实验设计.
对照组(A) 131I治疗组(B) 单克隆抗体治疗组(C)
给GD模型小鼠腹腔注射0.1mL无菌生理盐水 给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1mL无菌生理盐水的131I
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Graves病(GD)可导致甲状腺功能亢进。研究发现,GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间粘附分子1(ICAM-1),导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体,对治疗GD进行了尝试。
(1)用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠,几周后取这些免疫小鼠的血清,分别加入多孔培养板的不同孔中,多孔培养板中需加入__________以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果,选出__________反应最强的培养孔所对应的小鼠M。
(2)实验用骨髓瘤细胞置于______恒温培养箱中37℃培养,融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养,一段时间后培养基中__________(填“有”或“无”)骨髓瘤细胞生长,说明培养基符合实验要求。
(3)取小鼠M的脾脏细胞制备成细胞悬液,与实验用骨髓瘤细胞进行融合,用选择培养基筛选得到具有__________能力的细胞。将获得的上述细胞在多孔培养板上培养,用ICAM-1检测,从中选择__________的杂交瘤细胞,植入小鼠腹腔中__________培养,一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。
(4)若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用,可将若干GD模型小鼠等分为三组,请补充下表中的实验设计。
对照组(A) | 131I治疗组(B) | 单克隆抗体治疗组(C) |
给GD模型小鼠腹腔注射0.1mL无菌生理盐水 | 给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1mL无菌生理盐水的131I |
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Graves病(GD)可导致甲状腺功能亢进。研究发现,GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间粘附分子I(ICAM-1),导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体,对治疗GD进行了尝试。
(1)用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠,几周后取这些免疫小鼠的血清,分别加入多孔培养板的不同孔中,多孔培养板中需加入________以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果,选出____________反应最强的培养孔所对应的小鼠M。
(2)实验用骨髓瘤细胞置于_______恒温培养箱中37℃培养,融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养,一段时间后培养基中_______.(填“有”或“无”)骨髓瘤细胞生长,说明培养基符合实验要求。
(3)取小鼠M的脾脏细胞制备成细胞悬液,与实验用骨髓瘤细胞进行融合,用选择培养基筛选得到具有____能力的细胞。将获得的上述细胞在多孔培养板上培养,用ICAM-1检测,从中选择________的杂交瘤细胞,植入小鼠腹腔中__________培养,一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。
(4)若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用,可将若干GD模型小鼠等分为三组,请补充下表中的实验设计。
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EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体,科研人员用小鼠进行实验。
(1)将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2作为______分别注射到3组小鼠体内,引发小鼠机体的_______免疫,产生相应的抗体。
(2)多次免疫后,分别取上述3组小鼠的血清和未免疫小鼠血清,测定抗体与抗原的结合强度,结果如图所示。
①EV71免疫的小鼠血清抗体_______(填“是”或“不是”)单一抗体,判断依据是___________。
②测定各组小鼠血清与非EV71蛋白结合强度,目的是排除___________________的影响。
③制备抗EV71单克隆抗体时,选用_______免疫的小鼠脾脏细胞效果最佳,依据是___________________________________________。
(3)取相应免疫组小鼠的脾脏,剪碎并用________酶处理得到小鼠脾脏细胞,用灭活的病毒诱导,与________细胞融合,筛选获得5个不同的杂交瘤细胞株。
(4)为进一步研究抗体的作用效果,科研人员培养上述杂交瘤细胞株,获得5种单克隆抗体,分别将它们与等量EV71混合,加入到5组RD细胞(EV71的宿主细胞)中,测定______________,以分析抗体的作用效果。
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EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体,科研人员用小鼠进行实验。
(1)将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2作为______分别注射到3组小鼠体内,引发小鼠机体的_______免疫,产生相应的抗体。
(2)多次免疫后,分别取上述3组小鼠的血清和未免疫小鼠血清,测定抗体与抗原的结合强度,结果如图所示。
①EV71免疫的小鼠血清抗体_______(填“是”或“不是”)单一抗体,判断依据是___________。
②测定各组小鼠血清与非EV71蛋白结合强度,目的是排除___________________的影响。
③制备抗EV71单克隆抗体时,选用_______免疫的小鼠脾脏细胞效果最佳,依据是___________________________________________。
(3)取相应免疫组小鼠的脾脏,剪碎并用________酶处理得到小鼠脾脏细胞,用灭活的病毒诱导,与________细胞融合,筛选获得5个不同的杂交瘤细胞株。
(4)为进一步研究抗体的作用效果,科研人员培养上述杂交瘤细胞株,获得5种单克隆抗体,分别将它们与等量EV71混合,加入到5组RD细胞(EV71的宿主细胞)中,测定______________,以分析抗体的作用效果。
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