乙烯具有促进果实成熟的作用,ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的两个关键酶。利用反义DNA技术(原理如图1),可以抑制这两个基因的表达,从而使番茄具有耐储存、宜运输的优点。图2为融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反义表达载体的结构示意图。
(1)图2中的2A11为特异性启动子,则2A11应在番茄的 ____________(器官)中表达。
(2)从番茄成熟果实中提取 ___________为模板,利用反转录法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因,以进行拼接构成融合基因并扩增。
(3)合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位点,ACC合成酶基因两端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位点,用限制酶____________对上述两个基因进行酶切,再串联成融合基因,相应的Ti质粒应用限制酶 _______________进行切割,确保融合基因能够插入载体中。
(4)为了实现图1中反义基因的效果,应将融合基因 _______(正向/反向)插入在启动子 2A11 的下游即可构成反义融合基因。将表达载体与农杆菌菌液混合后,接种在含有___的培养基中,可筛选出含有反义融合基因的农杆菌,再利用农杆菌转化法获得转基因番茄。
(5)在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时,____________(填“能”/“不能”)用放射性物质标记的ACC氧化(合成)酶基因片段做探针进行检测,理由是____________。
高三生物综合题困难题
乙烯具有促进果实成熟的作用,ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的两个关键酶。利用反义DNA技术(原理如图1),可以抑制这两个基因的表达,从而使番茄具有耐储存、宜运输的优点。图2为融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反义表达载体的结构示意图。
(1)图2中的2A11为特异性启动子,则2A11应在番茄的 ____________(器官)中表达。
(2)从番茄成熟果实中提取 ___________为模板,利用反转录法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因,以进行拼接构成融合基因并扩增。
(3)合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位点,ACC合成酶基因两端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位点,用限制酶____________对上述两个基因进行酶切,再串联成融合基因,相应的Ti质粒应用限制酶 _______________进行切割,确保融合基因能够插入载体中。
(4)为了实现图1中反义基因的效果,应将融合基因 _______(正向/反向)插入在启动子 2A11 的下游即可构成反义融合基因。将表达载体与农杆菌菌液混合后,接种在含有___的培养基中,可筛选出含有反义融合基因的农杆菌,再利用农杆菌转化法获得转基因番茄。
(5)在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时,____________(填“能”/“不能”)用放射性物质标记的ACC氧化(合成)酶基因片段做探针进行检测,理由是____________。
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乙烯具有促进果实成熟的作用,ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的两个关键酶。利用反义DNA技术(原理如图1),可以抑制这两个基因的表达,从而使番茄具有耐储存、宜运输的优点。图2为融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反义表达载体的结构示意图。
(1)图2中的2A11为特异性启动子,则2A11应在番茄的 ____________(器官)中表达。
(2)从番茄成熟果实中提取 ___________为模板,利用反转录法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因,以进行拼接构成融合基因并扩增。
(3)合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位点,ACC合成酶基因两端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位点,用限制酶____________对上述两个基因进行酶切,再串联成融合基因,相应的Ti质粒应用限制酶 _______________进行切割,确保融合基因能够插入载体中。
(4)为了实现图1中反义基因的效果,应将融合基因 _______(正向/反向)插入在启动子 2A11 的下游即可构成反义融合基因。将表达载体与农杆菌菌液混合后,接种在含有___的培养基中,可筛选出含有反义融合基因的农杆菌,再利用农杆菌转化法获得转基因番茄。
(5)在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时,____________(填“能”/“不能”)用放射性物质标记的ACC氧化(合成)酶基因片段做探针进行检测,理由是____________。
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乙烯具有促进果实成熟的作用,ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的两个关键酶。利用反义DNA技术(原理如图1),可以抑制这两个基因的表达,从而使番茄具有耐储存、宜运输的优点。图2为融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反义表达载体的结构示意图。
(1)图2中的2A11为特异性启动子,则2A11应在番茄的 ____________(器官)中表达。
(2)从番茄成熟果实中提取 ___________为模板,利用反转录法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因,以进行拼接构成融合基因并扩增。
(3)合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位点,ACC合成酶基因两端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位点,用限制酶____________对上述两个基因进行酶切,再串联成融合基因,相应的Ti质粒应用限制酶 _______________进行切割,确保融合基因能够插入载体中。
(4)为了实现图1中反义基因的效果,应将融合基因 _______(正向/反向)插入在启动子 2A11 的下游即可构成反义融合基因。将表达载体与农杆菌菌液混合后,接种在含有___的培养基中,可筛选出含有反义融合基因的农杆菌,再利用农杆菌转化法获得转基因番茄。
(5)在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时,____________(填“能”/“不能”)用放射性物质标记的ACC氧化(合成)酶基因片段做探针进行检测,理由是____________。
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乙烯具有促进果实成熟的作用,ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的关键酶。转反义ACC合成酶基因番茄具有耐储存、宜运输的优点。下图为反义ACC合成酶基因表达载体的结构示意图,请据图回答:
(1)提取ACC合成酶的mRNA时,宜选用成熟番茄的果实组织,原因是______________。以mRNA为模板合成DNA所需的酶是______________。原料是______________。
(2)将图中表达载体与农杆菌菌液混合后,加入含有______________的培养基中,可筛选出转化了反义ACC合成酶基因的农杆菌。将ACC合成酶基因反向接在35S后构成反义ACC成酶基因,在检测反义ACC合成酶基因是否整合到番茄植株的染色体DMA上时,_______(填“能”或“不能”)用放射性物质标记的ACC合成酶基因片段做探针进行检测,理由是_____________________。
(3)图中35S为特异启动子,推测35S应在番茄的______________(器官)中启动转录过程,转录启动后,检测发现番茄果实中乙烯含量显著降低,推测反义ACC合成酶基因的作用机理可能是______________。
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发育着的番茄果实产生较多生长素,生长素达到一定的浓度会促进乙烯合成而加快果实成熟,这不利于番茄贮存.为此科学家培育出了含乙烯合成酶基因反义拷贝的转基因番茄.下列分析正确的是( )
A. 普通番茄由于乙烯的催化而加速了果实中叶绿素分解、细胞壁变软
B. ③和④过程的模板相同,⑤中每条链的A+G/U+C的比值相同
C. 要获得转基因番茄,需要用到限制性核酸内切酶和DNA连接酶
D. 组织培养过程中,固体培养基的甘氨酸、维生素主要是提供碳元素
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番茄果实成熟过程中,某种酶(PG)开始合成并显著增加,促使果实变红变软。但不利于长途运输和长期保鲜。科学家利用反义RNA技术(见图解),可有效解决此问题。该技术的核心是,从番茄体细胞中获得指导PG合成的信使RNA,继而以该信使RNA为模板人工合成反义基因并将之导入离体番茄体细胞,经组织培养获得完整植株。新植株在果实发育过程中,反义基因经转录产生的反义RNA与细胞原有mRNA(靶mRNA)互补形成双链RNA,阻止靶mRNA进一步翻译形成PG,从而达到抑制果实成熟的目的。请结合图解回答:
(1)反义基因像一般基因一样是一段双链的DNA分子,合成该分子的第一条链时,使用的模板是细胞质中的信使RNA,原料是四种________________________________ ,所用的酶是________________________________ 。
(2)若要以完整双链反义基因克隆成百上千的反义基因,常利用________________________________________________ 技术来扩增。
(3)如果指导番茄合成PG的信使RNA的碱基序列是A U C—C—A—G-—G-一U-c一,那么,PG反义基因的这段碱基对序列是________________________________________。
(4)合成的反义基因在导入离体番茄体细胞之前,必须进行表达载体的构建,该表达载体的组成,除了反义基因外,还必须有启动子、终止子以及________________________________ 等,启动子位于基因的首端,它是________________________________ 酶识别和结合的部位。
(5)将人工合成的反义基因导入番茄叶肉细胞,最后达到抑制果实成熟,该生物发生了变异,这种可遗传的变异属于________________________________ 。在受体细胞中该基因指导合成的最终产物是________________ 。
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番茄果实成熟过程中,某种酶(PG)开始合成并显著增加,促使果实变红变软。但不利于长途运输和长期保鲜。科学家利用反义RNA技术(见下图),可有效解决此问题。该技术的核心是,从番茄体细胞中获得指导PG合成的信使RNA,继而以该信使RNA为模板人工合成反义基因并将之导入离体番茄体细胞,经组织培养获得完整植株。新植株在果实发育过程中,反义基因经转录产生的反义RNA与细胞原有mRNA(靶mRNA)互补形成双链RNA,阻止靶mRNA进一步翻译形成PG,从而达到抑制果实成熟的目的。请结合图解回答:
(1)反义基因像一般基因一样是一段双链的DNA分子,合成该分子的第一条链时,使用的模板是细胞质中的信使RNA,原料是四种 ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________,所用的酶是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
(2)如果指导番茄合成PG的信使RNA的碱基序列是,那么,PG反义基因的这段碱基对序列是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
(3)通常情况下利用农杆菌转化法将人工合成的反义基因导入番茄叶肉细胞原生质体内,其原因在于农杆菌质粒上含有T-DNA片段,它的特点是 。
(4)该目的基因与运输工具相结合需要使用的酶有________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ 。在受体细胞中由该基因指导合成的最终产物是 。
(5)导入反义基因的番茄叶肉细胞最终形成完整的转基因番茄植株,但这样的转基因生物在 、 、 三个方面带来了安全担忧。
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番茄果实成熟过程中,某种酶(PG)开始合成并显著增加,促使果实变红变软。但不利于长途运输和长期保鲜。科学家利用反义RNA技术(见图解),可有效解决此问题。该技术的核心是,从番茄体细胞中获得指导PG合成的信使RNA,继而以该信使RNA为模板人工合成反义基因并将之导入离体番茄体细胞,经组织培养获得完整植株。新植株在果实发育过程中,反义基因经转录产生的反义RNA与细胞原有mRNA(靶mRNA)互补形成双链RNA,阻止靶mRNA进一步翻译形成PG,从而达到抑制果实成熟的目的。请结合图解回答:
(1)反义基因像一般基因一样是一段双链的DNA分子,合成该分子的第一条链时,使用的模板是细胞质中的信使RNA,原料是四种 ,所用的酶是 。
(2)若要以完整双链反义基因克隆成百上千的反义基因,常利用 技术来扩增。
(3)如果指导番茄合成PG的信使RNA的碱基序列是A-U- C-C-A-G-G-U-C-,那么,PG反义基因的这段碱基对序列是_______________。
(4)合成的反义基因在导入离体番茄体细胞之前,必须进行表达载体的构建,该表达载体的组成,除了反义基因外,还必须有启动子、终止子以及_____________等,启动子位于基因的首端,它是 |酶识别和结合的部位。
(5)将人工合成的反义基因导入番茄叶肉细胞,最后达到抑制果实成熟,该生物发生了变异,这种可遗传的变异属于 。在受体细胞中该基因指导合成的最终产物是_________________。
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(5分)番茄果实成熟过程中,某种酶(PG)开始合成并显著增加,促使果实变红变软,但不利于长途运输和长期保鲜。科学家利用反义RNA技术(见图解),可有效解决此问题。该技术的核心是:从番茄体细胞中获得指导PG合成的信使RNA,继而以该信使RNA为模板,人工合成反义基因并将之导入离体番茄体细胞,经组织培养获得完整植株;新植株在果实发育过程中,反义基因经转录产生的反义RNA与细胞原有mRNA(靶mRNA)互补形成双链RNA,阻止靶mRNA进一步翻译形成PG,从而达到抑制果实成熟的目的。请结合图解回答:
(1)反义基因像一般基因一样是一段双链的DNA分子,合成该分子的第一条链时,使用的模板是细胞质中的信使RNA,原料是四种 ,所用的酶是 。
(2)将人工合成的反义基因导入番茄叶肉细胞原生质体的运输工具是__________;该目的基因与运输工具相结合需要使用的酶有______________;在受体细胞中该基因指导合成的最终产物是_____________________
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乙烯能够促进番茄果实细胞中某种酶A基因表达,促使果实变红变软,但不利于番茄果实的长期保存。科学家以指导酶A合成的mRNA为模板合成反义基因,反义基因转录形成反义RNA,反义RNA与mRNA杂交形成双链杂交分子,导致酶A基因不能表达。下列有关叙述错误的是( )
A.以mRNA为模板合成反义基因需逆转录酶
B.反义基因与酶A基因相比嘌呤与嘧啶的比例发生改变
C.若酶A基因含3000个碱基对,则构成酶A的氨基酸数少于1000个
D.反义RNA与mRNA杂交,说明反义RNA与mRNA碱基序列互补
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