花生晚斑病是世界上危害严重、分布广泛的花生真菌性病害之一，晚斑病侵染可导致花生产量减少和品...

花生晚斑病是世界上危害严重、分布广泛的花生真菌性病害之一，晚斑病侵染可导致花生产量减少和品质降低，进而造成严重的经济损失。转基因技术已经成功应用于花生晚斑病的抗性研究，科学家将编码芥菜生物防御素的BjD基因转入感病花生品种，得到的转基因花生对晚斑病的抗性显著提高，据此请回答：

（1）基因工程操作的核心是________。

（2）将BjD基因转入花生植株中常用的方法是________，并根据________来鉴定BjD基因是否成功转入受体细胞中。除此之外，将目的基因导入植物细胞还可以用________法。

（3）为检测转基因花生的DNA上是否插入了BjD基因，可采用________进行检测，如果________，就表明该基因己成功插入花生染色体DNA中。若要进一步检测转基因花生中BjD基因是否表达，在分子水平上可采取________法进行检测。

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大豆疫霉根腐病和大豆灰斑病也是一种世界性病害，病原菌侵染大豆的叶和茎，形成蛙眼状病斑，影响光合作用，产量降低。我国科研工作者釆用多基因联合导入策略，将抗真菌病基因几丁质酶(chi)基因和核糖体失活蛋白(rip)基因导入到大豆细胞中培育出抗病大豆。据此回答下列问题：

(1)培育抗病大豆第一步是获取目的基因(chi基因和rip基因)。科研工作者常从___________中获取了chi基因和rip基因。获取目的基因后，常用PCR技术扩增，其原理是___________。

(2)构建表达载体时需用到限制酶，酶切后可能产生粘性末端和平末端，而平末端的连接效率比较低，其原因除了平末端连接过程中只有连接酶的作用外还缺乏___________。

(3)培育抗病大豆第三步将表达载体导入大豆(双子叶植物)细胞，该过程常用的方法是___________。检验目的基因导入成功与否的指标之一：是否翻译出蛋白质，其检测方法是___________。

(4)常规转化筛选方法得到的植株多为植株嵌合体(既有转基因细胞又有常规细胞的植株)较多，为得到纯合的转基因植株，科研工作者将植株嵌合体的根尖或者芽尖剪碎，用___________去掉细胞壁，分散成单个原生质体，显微镜下取去壁单个原生质体进行组织培养，得到组培苗，移栽后再筛选得到的抗病大豆植株即为纯合的转基因植株。

(5)基因工程除了在植物培育、药物开发等方面具有广阔的前景，动物基因工程在___________等方面也具有广阔的前景。

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水稻是我国最重要的粮食作物。稻瘟病是由一种真菌侵染水稻引起的病害，严重危害我国粮食生产安全。

（1）某品种水稻对稻瘟病菌有一定的抗性，为判断抗病性状的显隐性，可进行的操作是_________，然后通过观察子代的_________来确定。

（2）现有甲（R1R1r2r2r3r3）、乙（r1r1R2R2r3r3）、丙（r1r1r2r2R3R3）三个水稻抗病品种，抗病（R）对感病（r）为显性，三对抗病基因位于不同染色体上。

①为了将甲、乙、丙三个品种中的抗病基因整合，选育新的纯合抗病植株，_________（是/否）可以用传统的杂交育种的方法进行，原因是_________（用图解的形式表述）。

②研究人员根据基因的DNA序列设计特异性引物，用PCR方法可将样本中的R1、r1、R2、r2、R3、r3区分开。已知R比r片段短，推测所选育品种的电泳结果是_________。

（3）研究人员每年用稻瘟病菌人工接种水稻品种甲（R1R1r2r2r3r3），几年后甲品种丧失了抗病性，分析原因发现是稻瘟病菌发生了_________。为避免水稻品种抗病性丧失过快，请从种植和育种两个方面给出建议_________。

（4）上述研究可知，与使用农药相比，_________是控制稻瘟病更加有效、安全和经济的措施。

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水稻是我国最重要的粮食作物。稻瘟病是由稻瘟病菌(Mp)侵染水稻引起的病害，严重危害我国的粮食生产安全。与使用农药相比，抗稻瘟病基因的利用是控制水稻稻瘟病更加有效、安全和经济的措施。请回答下列问题：

(1)与水稻细胞相比，Mp细胞最突出的特点是__________。

(2)若采用高能射线处理正在萌发的水稻种子或幼苗，培育出抗稻瘟病水稻所依据的育种原理是__________；运用杂交实验或基因工程的方法，将抗稻瘟病基因“嫁接”到水稻细胞的染色体上，培育出抗稻瘟病水稻所依据的育种原理是__________。

(3)Mp是由不同基因型组成的群体，侵染和危害水稻的基因有多种。在水稻种植区，如大面积连续种植某个含单一抗稻瘟病基因的水稻品种，将会引起MP种群中相应群体的基因频率__________(填“上升”“不变”或“下降”)，而对Mp其他群体不起作用，使该单抗稻瘟病水稻的抗性逐渐减弱。

(4)采用高能射线处理，可培育出水稻染色体同一位点有多种不同等位基因的抗稻瘟病新品种(以针对Mp他群体)。该实例可以说明__________。

(5)为判断某抗稻瘟病水稻是否为纯合子，最优化的实验设计思路是__________。

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（12分）阅读下面材料：

据调查，随着化学农药的产量和品种的逐年增加，害虫的抗药性也不断增强，危害很严重。如近年来，棉铃虫在我国大面积暴发成灾，造成经济损失每年达100亿元以上。针对这种情况，我国科学工作者经研究发现一种生活在棉铃虫消化道内的苏云金杆菌能分泌一种毒蛋白使棉铃虫致死，而此毒蛋白对人无害。通过科技攻关，我国科技工作者已成功地将该毒蛋白基因导入棉花植株内并成功地实现表达。由于棉铃虫吃新品种“转基因抗虫棉”植株后就会死亡，所以棉花新品种在1998年推广后，已取得了很好的经济效益。

回答下列问题：

（1）害虫抗药性的增强是____________的结果。

（2）“转基因”抗虫棉新品种的培育应用了____________技术。

（3）在培育转基因抗虫棉新品种过程中，所用的基因的“剪刀”是____________，基因的“针线”是____________，基因的“运载工具”是________，作为运载体必须具备的条件是 。

（4）将毒蛋白基因转入棉花植株体内的操作步骤是：

①_______________；②______________；③_______________；④______________。

（5）控制毒蛋白合成的基因结构中的编码区的特点是__________________________。

（6）该科技成果在环保上的重要作用是______________________________________。

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番茄晚疫病是一种严重危害番茄生产的真菌性病害，培养抗番茄晚疫病品种是番茄稳产增产的有效经济手段。为培育抗病品种，必须对所培育的品种进行抗性测定，为进行抗性测定，首先要对番茄晚疫病菌（疫霉菌）进行分离培养。下表为某科研人员研究了培养基种类对疫霉菌分离率的影响，请回答下列问题（PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，选择性PDA：是在PDA熔化后晾至不烫手时依次加入多菌灵、青霉素、利福平和五氮硝基苯）：

培养基种类对分离率的影响

（1）从物理性质上划分，PDA培养基属于____培养基。实验室常用__________法对培养皿进行灭菌。

（2）升汞（含Hg2+）在本实验中是一种很好的______（填“灭菌”或“消毒”）剂，但番茄晚疫病菌对重金属离子很敏感，故使用升汞时，一定要掌握好___________，否则会造成分离的失败。

（3）菌落特征包括菌落的______、大小、隆起程度和______等方面，实验中是根据菌落特征来鉴定疫霉菌的。

（4）选择性PDA能抑制杂菌尤其是细菌的生长，所以有较高的_______，但在“PDA+链霉素”培养基中实验结果出现反常现象，可能与___________有关。

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水稻是我国最重要的粮食作物。稻瘟病是由稻瘟病菌（Mp）侵染水稻引起的病害，严重危害我国粮食生产安全。与使用农药相比，抗稻瘟病基因的利用是控制稻瘟病更加有效、安全和经济的措施。

（1）水稻对Mp表现出的抗病与感病为一对相对__________。为判断某抗病水稻是否为纯合子，可通过观察自交子代____________来确定。

（2）现有甲（R1R1r2r2r3r3）、乙（r1r1R2R2r3r3）、丙（r1r1r2r2R3R3）三个水稻抗病品种，抗病（R）对感病（r）为显性，三对抗病基因位于不同染色体上。根据基因的DNA序列设计特异性引物，用PCR方法可将样本中的R1、r1、R2、r2、R3、r3区分开。这种方法可用于抗病品种选育中基因型的鉴定。

①甲品种与感病品种杂交后，对F2不同植株的R1、r1进行PCR扩增。已知R1比r1片段短。从扩增结果（下图）推测可抗病的植株有____________。

②为了在较短时间内将甲、乙、丙三个品种中的抗病基因整合，选育新的纯合抗病植株，下列育种步骤的正确排序是________。

a．甲×乙，得到F1

b．用PCR方法选出R1R1R2R2R3R3植株

c．R1r1R2r2r3r3植株×丙，得到不同基因型的子代

d．用PCR方法选出R1r1R2r2R3r3植株，然后自交得到不同基因型的子代

（3）研究发现，水稻的抗病表现不仅需要自身抗病基因（R1、R2、R3等）编码的蛋白，也需要Mp基因（A1、A2、A3等）编码的蛋白。只有R蛋白与相应的A蛋白结合，抗病反应才能被激活。若基因型为R1R1r2r2R3R3和r1r1R2R2R3R3的水稻，被基因型为a1a1A2A2a3a3的Mp侵染，推测这两种水稻的抗病性表现依次为___________。

（4）研究人员每年用Mp（A1A1a2a2a3a3）人工接种水稻品种甲（R1R1r2r2r3r3），几年后甲品种丧失了抗病性，检测水稻的基因未发现变异。推测甲品种抗病性丧失的原因是______________。

（5）水稻种植区的Mp是由不同基因型组成的群体。大面积连续种植某个含单一抗病基因的水稻品种，将会引起Mp种群__________，使该品种抗病性逐渐减弱直至丧失，无法在生产中继续使用。

（6）根据本题所述水稻与Mp的关系，为避免水稻品种抗病性丧失过快，请从种植和育种两个方面给出建议__________________________。

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随着科学技术的发展，化学农药的产量和品种逐年增加。但害虫的抗药性也在不断增强，对农作物危害仍然严重，如近年来，棉铃虫在我国大面积爆发成灾，造成经济损失每年达100亿元以上。针对这一情况，科学家开展了“转基因抗虫棉”的科技攻关研究，成功地将抗虫基因导入棉花细胞中，得到的棉花新品种对棉铃虫的毒杀效果高达80％以上。

请据此回答下列问题：

(1)“转基因抗虫棉”抗害虫的遗传信息传递过程可以表示为____________________。

（2）该项科技成果在环境保护上的重要作用是________。

（3）科学家们预言，此种“转基因抗虫棉”在独立种植若干代以后，也将出现不抗虫的植株，此现象来源于_________。

（4）来自细菌的抗虫基因能连接到棉花细胞中的DNA分子上，原因是________________。

（5）细菌的抗虫基因能在棉花细胞内成功的表达，使棉花产生新性状。这种变异的原理属于______。这种成功的表达也说明__________________________。

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番茄病毒病可以造成植株长势衰退、产量降低。“卡特琳娜”是从荷兰引进的番茄新品种，而在我国推广种植过程中，该品种普遍表现为植株矮化、顶部叶片常出现稍褪绿发黄等病毒病症状，严重影响果实产量和品质。探明“卡特琳娜”番茄病毒病的主要致病病毒，对培育脱毒苗至关重要。请回答下列相关问题：

（1）对“卡特琳娜”番茄植株进行致病病毒检测可采用RT-PCR技术，该方法是从番茄植株的组织细胞中提取mRNA，以mRNA为模板在__________酶的作用下合成cDNA，再以其为模板进行PCR扩增，然后与现有病毒核酸进行杂交检测。若要构建“卡特琳娜”番茄的cDNA文库，具体操作是__________。

（2）利用PCR技术扩增目的基因所具备的前提是__________序列，以便根据这一序列合成所需的__________。

（3）“卡特琳娜”番茄病毒病无有效药剂可以防治，种植脱毒苗木是较有效的防控措施培育脱毒苗常选择__________作为外植体，原因是____________________。培养该脱毒苗所用的技术称为__________。

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水稻是我国最重要的粮食作物。稻瘟病是由稻瘟病菌（Mp）侵染水稻引起的病害，严重危害我国粮食生产安全。

（1）水稻对Mp表现出的抗病与矮茎不属于一对相对性状的原因是_______。

（2）研究发现，水稻的抗病表现不仅需要自身抗病基因（R1、R2、R3等）编码的蛋白，也需要Mp基因（A1、A2、A3等）编码的蛋白。只有R蛋白与相应的A蛋白结合，抗病反应才能被激活。若基因型为R1R1r2r2r3r3和r1r1R2R2R3R3的水稻（抗病（R）对感病（r）为显性），被基因型为A1A1a2a2a3a3（A对a为显性）的Mp侵染，推测这两种水稻的抗病性表现依次为_______。R1基因控制R1蛋白合成的过程包括的两个阶段分别是_______。

（3）水稻的有芒和无芒是一对相对性状，受多对独立遗传的等位基因控制。现有两个无芒的纯和品系，定为X、Y。让X、Y分别与一纯合有芒的植物杂交，在每个杂交组合中，F1都是有芒，再自花授粉产生F2代，每个组合的F2代性状分离比如下：

X产生的F2代：27有芒：37无芒

Y产生的F2代：27有芒：21无芒

根据上述______品系的实验结果，可初步推断水稻的有芒和无芒至少受三对等位基因控制。请从上述实验中选择合适的材料，设计实验通过一代杂交证明推断的正确性（要求：写出实验思路，并预测实验结果）。_______

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