[生物——选修3：现代生物科技专题]（10分）
油菜的株高由等位基因G和g决定，GG为高杆，Gg为中杆，gg为矮杆。B基因是另一种植物的高杆基因，B基因与G基因在油菜的株高上有相同的效果，并且株高与这两个基因的数量正相关。下图是培育转基因油菜的操作流程。请回答下列问题：
（1）构建表达载体需用的工具酶有
（2）经转化获得的农杆菌能够侵染油菜细胞并将插入了B基因的 整合到受体细胞的 上。可用含 的培养基来筛选含有目的基因的油菜受体细胞。培育转基因油菜主要运用了转基因技术和 技术。
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[生物——选修3：现代生物科技专题]（10分）
油菜的株高由等位基因G和g决定，GG为高杆，Gg为中杆，gg为矮杆。B基因是另一种植物的高杆基因，B基因与G基因在油菜的株高上有相同的效果，并且株高与这两个基因的数量正相关。下图是培育转基因油菜的操作流程。请回答下列问题：
（1）构建表达载体需用的工具酶有
（2）经转化获得的农杆菌能够侵染油菜细胞并将插入了B基因的 整合到受体细胞的 上。可用含 的培养基来筛选含有目的基因的油菜受体细胞。培育转基因油菜主要运用了转基因技术和 技术。
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【生物——选修3:现代生物科技专题】为增加油菜种子的含油量，科研人员将转运肽基因与酶D基因相连，导人油菜细胞并获得了转基因油菜品种。
（1）研究人采用PCR技术获取酶D基因和转运肽基因，该技术是利用 的原理，使相应基因呈指数增加。所含三种限制酶（XbaI、ClaI、SacI）的切点如图所示，则用 和
（2）将上述融合基因插人上图所示Ti质粒的 中，构建基因表达载体并导人农杆菌中。为了获得含融合基因的单菌落，应进行的操作是 。随后再利用液体培养基将该单菌落振荡培养，可以得到用于转化的侵染液。
（3）剪取油菜的叶片放人侵染液中一段时间，此过程的目的是 ，进一步筛选后获得转基因油菜细胞，依据 的原理，可将其培育成转基因油菜植株。
（4）用 法可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达。
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［生物—选修3:现代生物科技专题](15分)
为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导人油菜细胞并获得了转基因油菜品种。
(1)研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用____________法从陆地棉基因文库中获取酶D基因.从拟南芥基因文库中获取转运肽基因.所含三种限制酶(Cla I、Sac I、Xba I)的切点如下图所示。则用______________和_____________酶处理两个基因后，可得到____________ (填图中字母)端相连的融合基因。
(2)将上述融合基因插入右上图所示质粒的T-DNA中.构建____________并导入农杆菌中.将获得的农杆菌接种在含____________的固体平板上培养得到含融合基因的单菌落，再利用培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液.
(3)剪取油菜的叶片放入染液中一段时间后筛选获得转获因油菜细胞.该细胞通过____________技术.可培育成转基因油菜植株。
(4)提取上述转基因油菜的mRNA.在逆转录酶的作用下获得cDNA.再依据______的DNA片段设计引物进行扩增.对扩增结果进行检侧.可判断融合基因是否完成___ ___。
(5)用_______________法可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达.
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油菜的株高由等位基因G和g决定，GG为高杆，Gg为中杆，gg为矮杆。B基因是另一种植物的高杆基因，它与G基因在油菜的株高时有相同的效果，株高与这两个基因的数量正相关，将B基因导入油菜可培育出转基因油菜。请回答下列问题：
（1）图一表示含有目的基因的B的DNA片段和部分碱基序列，图二表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspI、BamHI、MboI、SmaI 4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGC、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。若需将目的基因B导入图二中的质粒，应选择的限制酶是 ；为了筛选出含重组质粒的受体细胞，培养基上需要分别添加 。
（2）所用的质粒是双链闭合环状的DNA分子，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶M和N切割，通过凝胶电泳分离分析得下表。限制酶M和N的识别序列和切割位点如图三所示。
①该质粒的长度为 kb。在该质粒中，M酶与N酶的切割位点分别有 个。
②M酶与N酶切出的能相互粘连的末端在酶的作用下相互连接，连接后的序列 （填“可以”或“不可以”）用M酶、N酶进行切割。
（3）若将一个B基因转移到矮杆油菜的染色体上，且B基因与g基因位于非同源染色体上，并在植株中得到成功表达，可观察到转基因油菜植株表现型为 。从基因工程的操作步骤上看，这属于在
水平上来鉴定检测重组性状的表达。
（4）若将一个B基因转移到中杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，培育了甲～丁四种转基因油菜（如图四），其中与甲的株高相同的是 。
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分析有关资料，回答有关遗传、基因工程问题。（13分）
油菜的株高由等位基因 G 和 g 决定，GG 为高杆，Gg 为中杆，gg 为矮杆。B基因是另一种植物的高杆基因，B 基因与 G 基因在油菜的株高上有相同的效果，并且株高与这两个基因的数量正相关。下图是培育转基因油菜的操作流程。请回答下列问题：
（1）步骤①中用到的工具酶是________，培育转基因油菜主要运用了转基因技术和________技术。
（2）图中质粒是双链闭合环状的DNA分子，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶M和N切割，通过凝胶电泳分离分析得下表。限制酶M和N的识别序列和切割位点如图甲所示。
①该质粒的长度为___________kb。在该质粒中，M酶与N酶的切割位点分别有__________、________个。
②M酶与N酶切出的能相互粘连的末端在酶的作用下相互连接，请将连接的结果表示出来：____________。连接后的序列是否可以用M酶、N酶进行切割：_______________。
下图为B基因的结构示意图以及限制酶M和N的切割位点。
③现用图中基因作为目的基因，若采用直接从供体细胞中分离，可选用酶______来切割。
④已知Ⅱ区的碱基数是2000个，其中阴影区域碱基数是800个，空白区域中G和C的总数共有400个，则由该区转录的mRNA中A和U总数是________。
（3）若将一个 B 基因转移到矮杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，且 B 基因与 g 基因位于非同源染色体上，这样的转基因油菜植株表现型为________。
（4）若将一个 B 基因转移到中杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，培育了甲～丁四种转基因油菜（如下图）。
①与甲的株高相同的是________。四种转基因油菜分别自交，在不考虑交叉互换的前提下，子代有 3 种表现型的是________。
②另有一种转基因油菜自交子代也有3 种表现型，请在下图中的染色体上标出B 基因的位置。
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油菜的株高由等位基因G和g决定，GG为高杆，Gg为中杆，gg为矮杆。B基因是另一种植物的高杆基因，B基因与G基因在油菜的株高上有相同的效果，并且株高与这两个基因的数量正相关。下图是培育转基因油菜的操作流程。请回答下列问题：
（1）可用含 的培养基来筛选含有目的基因的油菜受体细胞。培育转基因油菜主要运用了转基因技术和 技术。
（2）若将一个B基因连接到了矮杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，且B基因与g基因位于非同源染色体上，这样的转基因油菜表现为 。写出该转基因油菜自交产生子一代的遗传图解（无目的基因表示为b）。
（3）若将一个B基因连接到了中杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，培育了甲～丁四种转基因油菜（如下图）。
①与甲的株高相同的是 。四种转基因油菜分别自交，在不考虑交叉互换的前提下，子代有3种表现型的是 。
②另有一种转基因油菜的自交子代也有3种表现型，请在右图中的染色体上标出B基因的位置
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（12分）油菜的株高由等位基因 G 和 g 决定，GG 为高杆，Gg 为中杆，gg 为矮杆。B基因是另一种植物的高杆基因，B 基因与 G 基因在油菜的株高上有相同的效果，并且株高与这两个基因的数量正相关。下图是培育转基因油菜的操作流程。请回答下列问题：
（1）步骤①中用到的工具酶是________，可用含________的培养基来筛选含有目的基因的油菜受体细胞。培育转基因油菜主要运用了转基因技术和 ________技术。
（2）若将一个 B 基因连接到了矮杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，且 B 基因与 g 基因位于非同源染色体上，这样的转基因油菜表现为________。写出该转基因油菜自交产生子一代的遗传图解（无目的基因表示为 b）。________
（3）若将一个 B 基因连接到了中杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，培育了甲～丁四种转基因油菜（如图）。
①与甲的株高相同的是________。四种转基因油菜分别自交，在不考虑交叉互换的前提下，子代有 3 种表现型的是________。
②另有一种转基因油菜自交子代也有3 种表现型，请在右图中的染色体上标出B 基因的位置。
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油菜的株高由等位基因G和g决定，GG为高杆，Gg为中杆，gg为矮杆。B基因是另一种植物的高杆基因，B基因与G基因在调控油菜的株高上有相同的效果，并且株高与B基因和G基因的数量呈正相关，科学家利用B基因培育转基因油菜。请回答问题：
（1）操作时，一般先将B基因转入农杆菌，常用质粒作为______，质粒是一种双链闭合环状的_______分子。
（2）若用两种识别切割序列完全不同的限制酶M和N（如图1所示）分别切割质粒和目的基因，得到的粘性末端在________酶的作用下相互连接，形成的碱基对序列是______（依照图1的形式作答）,连接后的序列______（“可以”或“不可以”）用M酶或N酶进行切割。
（3）在含有B基因的DNA片段上，限制酶M和N的切割位点如图2所示，Ⅱ所示空白部分为B基因位置。若采用直接从供体细胞中分离方法提取B基因，可选用酶_____来切。
（4）若将一个B基因转移到矮杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，且B基因与g基因位于非同源染色体上，这样的转基因油菜植株表现型为__________。
（5）若将一个B基因转移到中杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，培育了甲～丁四种转基因油菜（如图3所示）。
①与甲的株高相同的是_______________。四种转基因油菜分别自交，在不考虑交叉互换的前提下，子代有3种表现型的是_____________________。
②另有一种转基因油菜的B基因插入位置与前四种不同，自交子代也有3种表现型，请在图4中的染色体上标出B基因的插入位置__________。
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油菜的株高由等位基因G和g决定，GG为高杆，Gg为中杆，gg为矮杆。B基因是另一种植物的高杆基因，B基因与G基因在调控油菜的株高上有相同的效果，并且株高与B基因和G基因的数量呈正相关，科学家利用B基因培育转基因油菜。请回答问题：
（1）操作时，一般先将B基因转入农杆菌，常用质粒作为 ，质粒是一种双链闭合环状的 分子。
（2）若用两种识别切割序列完全不同的限制酶M和N（如图1所示）分别切割质粒和目的基因，得到的粘性末端在 酶的作用下相互连接，形成的碱基对序列是______（依照图1的形式作答）,连接后的序列 （“可以”或“不可以”）用M酶或N酶进行切割。
（3）在含有B基因的DNA片段上，限制酶M和N的切割位点如图2所示，Ⅱ所示空白部分为B基因位置。若采用直接从供体细胞中分离方法提取B基因，可选用酶 来切。
（4）若将一个B基因转移到矮杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，且B基因与g基因位于非同源染色体上，这样的转基因油菜植株表现型为 。
（5）若将一个B基因转移到中杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，培育了甲～丁四种转基因油菜（如图3所示）。
①与甲的株高相同的是 。四种转基因油菜分别自交，在不考虑交叉互换的前提下，子代有3种表现型的是 。
②另有一种转基因油菜的B基因插入位置与前四种不同，自交子代也有3种表现型，请在图4中的染色体上标出B基因的插入位置。
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[生物选修3:现代生物科技专题]回答下列有关现代生物科技专题的问题：
（1）基因工程中能连接两种末端的“分子缝合针”是 ,基因工程的核心步骤是 。
（2）进行植物体细胞杂交时，化学法一般是用 作为诱导剂来诱导细胞融合。用动物细胞制备的单克隆抗体最主要的优点是 。
（3）胚胎工程中的最后一道“工序”是 。
（4）囊胚时期可发育成胎儿各种组织，个体较大的细胞是 细胞，而 细胞可以用于性别鉴定，该处细胞将来会发育成 。
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