下图为吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出的一头携带转人赖氨酸基因的克隆 牛“织女”的大致过程，请据图回答问题。
（1）克隆牛“织女”的诞生过程中涉及到的细胞水平的现代生物技术主要有:_________ (至少答出两项）
（2）实施基因工程包括四个基本操作步骤，其核心步骤是_______，实现②过程的常用方法是_______
（3）现有-长度为1000碱基对(by)的DNA分子,用限酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000 by，说明此DNA分子为_______ (填“线性”或“环状”），用Kpn I单独酶切得到400 by和600 by两种长度的DNA分子,用EcoR I、Kpn I同时酶切后得到 200by和600 by两种长度的DNA分子。请绘出该DNA分子的酶切图谱的示意图:_______ (请在图中标明限制酶的类型、酶切位点和碱基长度）。
高二生物综合题中等难度题
下图为吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出的一头携带转人赖氨酸基因的克隆 牛“织女”的大致过程，请据图回答问题。
（1）克隆牛“织女”的诞生过程中涉及到的细胞水平的现代生物技术主要有:_________ (至少答出两项）
（2）实施基因工程包括四个基本操作步骤，其核心步骤是_______，实现②过程的常用方法是_______
（3）现有-长度为1000碱基对(by)的DNA分子,用限酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000 by，说明此DNA分子为_______ (填“线性”或“环状”），用Kpn I单独酶切得到400 by和600 by两种长度的DNA分子,用EcoR I、Kpn I同时酶切后得到 200by和600 by两种长度的DNA分子。请绘出该DNA分子的酶切图谱的示意图:_______ (请在图中标明限制酶的类型、酶切位点和碱基长度）。
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2011年8月，吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出一头携带转入赖氨酸基因的克隆牛犊“织女”，从其乳汁中获得大量的赖氨酸。它的诞生标志着国际克隆技术又取得了一次重大突破。以下与此有关的叙述中，正确的是
A．该题中赖氨酸基因表达载体的受体细胞的性染色体可以是XX也可以是XY
B．将赖氨酸基因导入牛的卵细胞中，通过组织培养也能形成转基因牛
C．人们只在“织女”的乳汁中才能获取赖氨酸，是因为只在转基因牛的乳腺细胞中才有赖氨酸基因
D．运用基因工程技术让牛合成大量的赖氨酸，该技术将导致定向变异
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下图为吉林大学农学部培育出世界首例赖氨酸转基因克隆奶牛“织女”的大致过程，请回答：
（1）实施基因工程的核心操作步骤是________________，实现②过程的常用方法是_________________。
（2）获得黑白花奶牛成纤维细胞后，利用______________技术扩增细胞，培养液中除了提供必要的营养物质之外，还需要添加_____________等天然成分。
（3）获得重组细胞④时，以去核卵细胞为受体细胞的原因是____________________
__________________。
(4)将早期胚胎移入代孕母牛体内之前，需要对代孕母牛进行___________处理，目的是_____________________________。
(5)要通过⑤过程获得较多的遗传同质早期胚胎，应采用______________技术，操作时应选择发育至__________期的胚胎，并将内细胞团___________。“织女”牛⑦进入泌乳期后，可以通过分泌乳汁来生产人类所需的赖氨酸，因而称为________________。
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（8分）据新华社北京2008年8月11日电 ：由中国农业大学李宁院士领导的研发团队与生物技术有限公司合作，日前在北京转基因动物试验基地成功培育出了一头健康的转人“抗CD20抗体基因”的转基因奶牛——贝贝。抗人CD20单克隆抗体是目前治疗B淋巴细胞瘤等恶性肿瘤的特效药物。该研发团队通过转基因技术获得转基因奶牛乳腺生物反应器，其生产的抗人CD20单克隆抗体表达量显著高于采用哺乳动物细胞系的表达量。
（1）下列各图表示采用哺乳动物细胞系制备单克隆抗体过程的各阶段图解，请据图回答下列问题：
①请用箭头和图中字母表示出单克隆抗体制备的过程： 。
②图B注射的特定抗原是指 抗原，图H中进行克隆化培养和抗体检测呈阳性的细胞是 细胞。
（2）转基因牛贝贝可通过分泌乳汁来生产抗人CD20抗体，在基因表达载体中，人CD20抗体基因的首端必须含有乳腺蛋白基因的____________，它是______________识别和结合点位点。将基因表达载体通过特定技术导入到受精卵，再受精卵移植到母牛的输卵管或子宫内，使其发育成为转基因牛犊。
（3）科学家从某些能无限增殖的细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因（prG），该基因能激发许多动物细胞的分裂，这为单克隆抗体的制备提供了新的途径。有人提出，可以直接通过基因工程制备单克隆抗体，其思路如下图所示。请回答：
形成重组质粒过程中，对核苷酸序列有严格要求的工具酶是 （用图中字母回答）。导入的受体细胞Ⅱ是 ，对导入重组质粒的II进行“检测”的目的是 。
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1997年，美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达的奶牛，年产奶量为30.8t，创造了世界奶牛产量最高纪录。科学家希望利用体细胞核移植技术克隆卢辛达，加速优良品种奶牛的繁育，请结合图回答下列问题：
（1）取卢辛达的耳部组织，用________________将组织块分散成单个细胞。再用培养液稀释制成细胞悬液，置于CO2培养箱中进行培养，CO2的作用是__________________。培养时细胞增殖还表现出_______________和接触抑制等现象。
（2）用物理或化学方法激活重组细胞，使其完成_____________和______________，最终形成重组胚胎，优良品种奶牛的克隆成功，说明了动物____________具有全能性。
（3）牛的早期胚胎通常要发育到____________阶段才进行移植。移入当地普通黄牛子宫内的胚胎之所能够存活，是因为______________________________ 。
（4）克隆出的犊牛与卢辛达奶牛的性状基本相同，但不是百分百的复制，原因是______________________________。（答出两点即可）
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美国科学家发现一头能天然抵抗结核病的奶牛“86牛”，其体内存在针对结核菌的抗毒素基因。据此，科学家利用这头奶牛的体细胞进行一系列的研究并成功克隆出抗结核病的“抗病牛”。过程如下：
(1)过程②中，应去除卵母细胞的_________；此时的卵母细胞应处于_________期。
(2)过程④表示_________，进行此过程需对B牛用激素进行_________处理。
(3)③过程中，重组胚胎培养到_________期时，可从其内细胞团分离出ES细胞，此细胞在功能上具有发育的__________________。
(4)ES细胞培养过程中在培养液中加入一定量的_______，以防止培养过程中的污染；同时在使用合成培养基时，为保证细胞正常生长，在培养基中还要添加_________等天然成分。
(5)ES细胞在_________上，或在添加抑制因子的培养液中能够维持不分化状态，因此进行过程⑤时，需在培养液中加入_________，以获得产抗毒素细胞。
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科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(如图所示)。请结合图示回答下列问题：
(1)在进行细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分散处理，形成单个细胞，这个过程中需要利用________酶处理。
(2)用于核移植的供体细胞，一般都选用传代10代以内的细胞，原因是________________________。
(3)在进行原代培养时，细胞增殖的方式是________，此外，细胞增殖还表现出________和接触抑制等特点。
(4)将进行培养的供体细胞注入去核的卵母细胞中，去除卵母细胞细胞核的目的是_______________________________________________________。
(5)将重组细胞在培养液中培养成的重组胚胎移入受体母牛后，该母牛就会生出与供体奶牛遗传物质相同的犊牛，但也不是100%的复制，原因最可能是________________________。
(6)上述动物细胞工程中涉及的技术有________________________。转基因奶牛的克隆成功，说明了动物________具有全能性。
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科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(如下图)，请结合图示回答下列问题：
(1)在进行细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分散处理，形成单个细胞，这个过程中需要利用____________酶处理。
(2)在进行原代培养时，细胞增殖的方式是______________，此外，细胞增殖还表现出______________和接触抑制等特点。
(3)将重组细胞在培养液中培养成的重组胚胎移入受体母牛后，该母牛就会生出与供体奶牛遗传物质相同的犊牛，但也不是100%的复制，原因最可能是①__________________②______________。
(4)用于核移植的供体细胞，一般选用10代以内的细胞，原因是________________________
(5)上述动物细胞工程中涉及的技术有________________________________。
转基因奶牛的克隆成功，说明了动物_______________________具有全能性。
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科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆（如下图所示），请结合图示回答下列问题：
（1）在进行细胞培养之前，要对取自转基因奶牛的组织进行分离，形成单个细胞，这 一过程中需要利用_____酶处理，不能用纤维素酶与果胶酶的原因是_________________。
（2）形成重组细胞时应选用_________期的卵母细胞，去掉其细胞核的原因是____________。
（3）如果重组细胞为贴附性细胞，则在进行原代培养时，会表现出_____和_____等 特 点 。
（4）重组细胞在培养液中培养成的重组胚胎移入受体母牛体内会生出与供体奶牛遗传性状大致相同的犊牛，但某些性状上也会有差异，原因是__________________________________；__________________________________。
（5）上图中所示的生物技术整体被称为_____。转基因奶牛的克隆成功，说明了动物_____具有全能性。
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（7分）科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(如下图所示)，请结合图示回答下列问题：
(1)在进行动物细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分散处理，形成单个细胞，这个过程中需要利用____________酶处理。
(2)在进行原代培养时，细胞增殖的方式是_______，此外，细胞增殖还表现出_________和接触抑制等特点。
(3)将重组细胞在培养液中培养成的重组胚胎移入受体母牛后，该母牛所生犊牛与供体奶牛遗传物质是否 100%相同？______________，原因是___________ 。
(4)转基因奶牛的克隆成功，说明了动物__________具有全能性。此过程遵循孟德尔定律？_____________。
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