下图为吉林大学农学部培育出世界首例赖氨酸转基因克隆奶牛“织女”的大致过程，请回答：
（1）实施基因工程的核心操作步骤是________________，实现②过程的常用方法是_________________。
（2）获得黑白花奶牛成纤维细胞后，利用______________技术扩增细胞，培养液中除了提供必要的营养物质之外，还需要添加_____________等天然成分。
（3）获得重组细胞④时，以去核卵细胞为受体细胞的原因是____________________
__________________。
(4)将早期胚胎移入代孕母牛体内之前，需要对代孕母牛进行___________处理，目的是_____________________________。
(5)要通过⑤过程获得较多的遗传同质早期胚胎，应采用______________技术，操作时应选择发育至__________期的胚胎，并将内细胞团___________。“织女”牛⑦进入泌乳期后，可以通过分泌乳汁来生产人类所需的赖氨酸，因而称为________________。
高二生物非选择题中等难度题
下图为吉林大学农学部培育出世界首例赖氨酸转基因克隆奶牛“织女”的大致过程，请回答：
（1）实施基因工程的核心操作步骤是________________，实现②过程的常用方法是_________________。
（2）获得黑白花奶牛成纤维细胞后，利用______________技术扩增细胞，培养液中除了提供必要的营养物质之外，还需要添加_____________等天然成分。
（3）获得重组细胞④时，以去核卵细胞为受体细胞的原因是____________________
__________________。
(4)将早期胚胎移入代孕母牛体内之前，需要对代孕母牛进行___________处理，目的是_____________________________。
(5)要通过⑤过程获得较多的遗传同质早期胚胎，应采用______________技术，操作时应选择发育至__________期的胚胎，并将内细胞团___________。“织女”牛⑦进入泌乳期后，可以通过分泌乳汁来生产人类所需的赖氨酸，因而称为________________。
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下图为吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出的一头携带转人赖氨酸基因的克隆 牛“织女”的大致过程，请据图回答问题。
（1）克隆牛“织女”的诞生过程中涉及到的细胞水平的现代生物技术主要有:_________ (至少答出两项）
（2）实施基因工程包括四个基本操作步骤，其核心步骤是_______，实现②过程的常用方法是_______
（3）现有-长度为1000碱基对(by)的DNA分子,用限酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000 by，说明此DNA分子为_______ (填“线性”或“环状”），用Kpn I单独酶切得到400 by和600 by两种长度的DNA分子,用EcoR I、Kpn I同时酶切后得到 200by和600 by两种长度的DNA分子。请绘出该DNA分子的酶切图谱的示意图:_______ (请在图中标明限制酶的类型、酶切位点和碱基长度）。
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2011年8月，吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出一头携带转入赖氨酸基因的克隆牛犊“织女”，从其乳汁中获得大量的赖氨酸。它的诞生标志着国际克隆技术又取得了一次重大突破。以下与此有关的叙述中，正确的是
A．该题中赖氨酸基因表达载体的受体细胞的性染色体可以是XX也可以是XY
B．将赖氨酸基因导入牛的卵细胞中，通过组织培养也能形成转基因牛
C．人们只在“织女”的乳汁中才能获取赖氨酸，是因为只在转基因牛的乳腺细胞中才有赖氨酸基因
D．运用基因工程技术让牛合成大量的赖氨酸，该技术将导致定向变异
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（18分）下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，根据下图回答：
（1）在转基因克隆牛的培育过程中，科学家使用的生物工程技术主要有________。
（2）在基因工程中，我们称②为________，如果②的数量太少常用________技术来扩增，该技术所必需的酶有_____________的特点；在②进入③之前要用________等工具来构建基因表达载体，能实现②进入③的常用方法是________。
（3）图中①一般经________处理可以得到③，培养该细胞所用的培养基中加入的天然成分是______________。
（4）④发育到____________________期可以进行⑤步骤,该步骤的注意事项是_________
（5）⑦是⑥生出的后代，那么⑦的遗传性状和________最相似，要实现⑦批量生产血清白蛋白，则要求③的性染色体是________。
（6）请根据物质循环再生原理为养牛场提供建议使其节约资源、降低成本，同时有利于生态环境的保护。________
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(7分)我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：
(1)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。重组质粒除了带有绿色荧光蛋白基因以外，还必须含有＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿等才能构成一个完整的基因表达载体。
(2)将所采集到的卵母细胞在体外培养到＿＿＿＿＿＿＿＿期即可通过显微操作将其细胞核去除并形成重组细胞，然后再通过＿＿＿＿＿＿＿＿技术培养成早期胚胎。
(3)早期胚胎的培养液成分较复杂，人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，通常加入＿＿＿＿等一些天然成分。
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我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：
（1）一个完整的基因表达载体除了带有绿色荧光蛋白基因以外，还必须含有复制原点、启动子、终止子和________________。启动子是一段有特殊结构的DNA片段，它是___________酶识别和结合的部位；而起始密码子的化学本质则是________（DNA或RNA）。
（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞后，要通过DNA分子杂交技术，来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的__________________上。
（3）从猪中取胎儿成纤维细胞，用__________________处理，然后进行分散培养。培养时，将培养瓶置于含一定量CO2的培养箱中进行培养，CO2的作用是_____________。
（4）过程④表示通过显微操作法吸出卵母细胞中的细胞核，微型吸管除了将细胞核吸除外，往往还要将__________________一并吸出。
（5）本实验所用到的现代生物科学技术有____________________________（填序号）。
A.动物细胞培养 B.胚胎移植
C.胚胎细胞核移植 D.DNA重组技术
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下图是转基因绿色荧光鼠的培育过程，回答问题
（1）过程 （填标号）是转基因技术的核心步骤，为使GFP基因在小鼠细胞中高效表达，需要构建重组表达载体，重组表达载体中目的基因前端必须有 （结构）
（2）③过程在使用合成培养基进行培养时，除了水、无机盐、氨基酸、葡萄糖，还需加入等天然成分
（3）②过程的受体细胞通常为 ，在转录水平上检测GFP基因是否表达的方法是
（4）④过程通过胚胎移植技术实现，科学家想获得多个相同性状的绿色荧光小鼠，则应该选择发育良好的，形态正常的 ，将其移入盛有操作液的培养皿中，然后用分隔刀或分割针进行处理
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转基因生物可用于生产人类所需要的药用蛋白，如激素、抗体、疫苗、酶等。下图甲是通过生物工程培育能产生人胰岛素的烟草的过程。请据图回答下列问题：
（1）基因工程的核心步骤是 （填字母）。此过程所需的工具酶是 。
（2）下图乙是载体和反转录得到的胰岛素基因的片段，已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。Gene Ⅰ和Gene Ⅱ为质粒上的标记基因，根据图示分析，应用限制酶 切割质粒，用限制酶 切割目的基因。构建的重组质粒中，除含有外源基因、标记基因外，还必须含有 。
（3）B过程中，常用 处理使细菌成为感受态细胞，从而利于重组质粒的导入。
（4）如果从分子水平检测人胰岛素基因是否表达成功，可以采用 方法。
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下图表示转基因烟草的培育过程。请据图回答:
（1）图示过程中将外源基因导入受体细胞的方法是________________________。
（2）基因工程的核心步骤是____________，该过程用到的工具酶有____________和____________。
（3）图示过程中用到的植物细胞工程技术是________________________，这一技术的原理是离体的植物细胞____________。
（4）最后通过________________________技术检测外源基因在烟草体内是否翻译出了对应的蛋白质。
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转基因生物可用于生产人类所需要的药用蛋白，如激素、抗体、疫苗、酶等。下图甲是通过生物工程培育能产生人胰岛素的烟草的过程。请据图回答下列问题：
（1）基因工程的核心步骤是___________（填字母）。此过程所需的工具酶是___________。
（2）下图乙是载体和反转录得到的胰岛素基因的片段，已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。Gene Ⅰ和Gene Ⅱ为质粒上的标记基因，根据图示分析，应用限制酶_____切割质粒，用限制酶________切割目的基因。构建的重组质粒中，除含有外源基因、标记基因外，还必须含有________________。
（3）B过程中，常用_________处理使细菌成为感受态细胞，从而利于重组质粒的导入。
（4）如果从分子水平检测人胰岛素基因是否表达成功，可以采用__________方法。
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