[生物一一选修3：现代生物技术专题]
Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图：
(1)在培养上皮细胞时应将其置于含______________的混合气体的培养箱中进行培养。
(2)步骤②中应将上皮细胞与___________细胞通过核移植技术构建出重组细胞。
(3)图中的ES细胞来源于______________。
(4)该治疗需要利用PCR技术扩增出大量的Rag2基因，假设Rag2基因的两条链的引物分别称为引物A和引物B，那么1个Rag2基因通过PCR技术扩增四轮之后，产物中含有引物A的DNA片段所占的比例理论上为_____。某同学设计的一组引物的部分碱基序列为：引物A为...CAGGCT...，引物B为...AGCCTG...，请问这组引物的不合理之处是____________。
(5)步骤④的培养基中应加入____________以诱导ES细胞的分化。
高三生物综合题中等难度题
【生物一选修3:现代生物科技专题】Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如图（图中数字序号表示的是相关过程）。请回答下列有关问题：
(1)过程②利用的技术是_______________,过程③中涉及到了基因工程技术，其中作为受体
细胞的是_______________。
(2)过程③中获取的目的基因是_______________，可以根据该基因的____________.设计引物，利用PCR技术扩增目的基因片段。按此方法和图示技术流程，完成 Rag2基因缺失小鼠的基因治疗涉及的酶有_______和耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)等。
(3)图中造血干细胞中的遗传物质至少有 __________来源。为检测 Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质,用_________________进行杂交实验。图中所述克隆技术属于_______克隆。
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【生物一选修3:现代生物科技专题】Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如图（图中数字序号表示的是相关过程）。请回答下列有关问题：
(1)过程②利用的技术是_______________,过程③中涉及到了基因工程技术，其中作为受体
细胞的是_______________。
(2)过程③中获取的目的基因是_______________，可以根据该基因的____________.设计引物，利用PCR技术扩增目的基因片段。按此方法和图示技术流程，完成 Rag2基因缺失小鼠的基因治疗涉及的酶有_______和耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)等。
(3)图中造血干细胞中的遗传物质至少有 __________来源。为检测 Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质,用_________________进行杂交实验。图中所述克隆技术属于_______克隆。
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[生物一一选修3：现代生物技术专题]
Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图：
(1)在培养上皮细胞时应将其置于含______________的混合气体的培养箱中进行培养。
(2)步骤②中应将上皮细胞与___________细胞通过核移植技术构建出重组细胞。
(3)图中的ES细胞来源于______________。
(4)该治疗需要利用PCR技术扩增出大量的Rag2基因，假设Rag2基因的两条链的引物分别称为引物A和引物B，那么1个Rag2基因通过PCR技术扩增四轮之后，产物中含有引物A的DNA片段所占的比例理论上为_____。某同学设计的一组引物的部分碱基序列为：引物A为...CAGGCT...，引物B为...AGCCTG...，请问这组引物的不合理之处是____________。
(5)步骤④的培养基中应加入____________以诱导ES细胞的分化。
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【生物—选修3：现代生物科技专题】Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图：
（1）步骤①中所选的卵母细胞应处于 期。
（2）步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其 分离出ES细胞，ES细胞在形态上表现为 的特点。
（3）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的 。可以根据Rag2基因的核苷酸序列设计合
成 ，利用 技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在目的基因
所在DNA片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有 酶的酶切位点。
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[生物——选修3，现代生物科技专题]利用基因工程可以治疗有基因缺陷的疾病。基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如下图：
(1)该项工程中目的基因的获取可以利用PCR技术，依据_________设计引物，利用_______为原料在PCR仪中进行扩增。
(2)该项基因工程的关键环节是需要构建含有Rag2基因的_______________.
(3)图中步骤①中所选的卵母细胞应处于___________期。而ES细胞一般从发育到________时期的
重组胚胎中分离获取。
(4)转化成功的ES细胞具有的结构特点是_______________。为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用抗Rag2蛋白的抗体进行________________。
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【选修3—现代生物科技专题】
Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。下图为科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗的技术流程图，据图回答有关问题：
（1）步骤①中，在核移植之前应该采集卵母细胞，采用的主要方法是用__________处理，使其排出更多的卵子，然后从__________中冲取。
（2）步骤②中，重组细胞培养到囊胚期，可从其__________中分离出ES细胞，该细胞在形态上表现为体积小、细胞核大、核仁明显；在功能上具有发育的__________。
（3）步骤③中，将含有Rag2基因的表达载体导入ES细胞，常采用__________法。为检测Rag2基因
是否表达出相应的蛋白质，通常采用__________的方法。
（4）转基因和细胞核移植（克隆）等生物技术存在安全性和伦理问题，如科学家赋予转基因生物某些特殊性状，它们有可能成为“入侵的外来物种”，威胁生态系统中其他生物的生存，这属于转基因生物的__________(“食品安全”、“生物安全”或“环境安全”）问题；我国政府对待克隆人的态度是__________,不反对治疗性克隆。
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(12分)【生物——现代生物科技专题】
Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
(1)步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的_________，此技术属于_________工程范畴。
(2)步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其__________中分离出ES细胞。培养ES细胞时，为满足细胞代谢的需要，可在培养基中加入的天然成分是_______________。
(3)步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的______设计引物，利用__________技术扩增Rag2基因片段。用HindIII和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有______________酶的酶切位点。
(4)为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后的小鼠骨髓细胞的______________，用抗Rag2 蛋白的抗体进行杂交实验。
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【生物——现代生物科技专题】Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的_________，此技术属于________工程范畴。
（2）步骤②中，重组胚胎培养到 期时，可从其__________中分离出ES细胞。培养ES细胞时，为满足细胞代谢的需要，可在培养基中加入的天然成分是_______________。
（3）步骤③中，在构建含有Rag2基因的表达载体时，可以根据Rag2基因的 设计引物，利用__________技术扩增Rag2基因片段。并且同时用HindIII和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段，这样做的目的是： 。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有_________酶的酶切位点。
（4）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后的小鼠骨髓细胞的蛋白质，用 进行杂交实验。
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Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
请回答：
（1）该技术流程所涉及的生物工程技术有_________。
①动物细胞培养 ②细胞核移植 ③干细胞 ④转基因 ⑤动物细胞融合
（2）在步骤①前，应采用________（普遍使用的方法）对卵母细胞进行处理。
（3）ES细胞在功能上的特性是______，而且在体外培养的条件下，具有______特点。
（4）左图表示含有Rag2基因的DNA片段，右图表示pZHZ11质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、EcoRⅠ、SmaⅠ4种限制酶识别的碱基序列和切割位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、G↓AATTC、CCC↓GGG。
Rag2基因的获得可以从鼠的胎盘细胞中提取_____，通过逆转录方法合成含Rag2基因的DNA片段。若将Rag2基因和右图4的质粒连接形成重组质粒，那么应选用____限制酶切割，而后加入DNA酶连接。
（5）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据_____设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。
（6）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞中的_____，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。
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Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的 。
（2）步骤②中，重组胚胎培养到 期时， 可从其内细胞团分离出ES细胞。
（3）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的 设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有 酶的酶切位点。
（4）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的 ，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。
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