(16分)回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。pIJ702是一种常用质粒,其中tsr为硫链丝菌素(一种抗生素)抗性基因,mel是黑色素合成基因,其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落;而限制酶CLaⅠ、BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分别只有一处识别序列。
(1)质粒DNA分子中的两条链靠_______键维系成双链结构。
(2)以SacⅠ和SphⅠ切取的目的基因置换pIJ702上0.4kb(1kb=1000对碱基)的SacⅠ/SphⅠ片段,构成重组质粒pZHZ8。上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表4中。由此判断目的基因内部是否含有BglⅡ切割位点,并说明判断依据
(3)已知pIJ702上含mel基因的ClaⅠ/PstⅠ区域长度为2.5kb,若用ClaⅠ和PstⅠ联合酶切pZHZ8,则参照表4数据可断定酶切产物中最小片段的长度为_______kb。
(4)不含质粒的链霉菌在含硫链丝菌素固体培养基上的生长状况如表5所示。若要筛选接纳了pIJ702或pZHZ8的链霉菌细胞,所需的硫链丝菌素最小浓度应为_____μg/mL (填写表格中给定浓度);含有重组质粒pZHZ8的菌落呈______色。
(5)上述目的基因来源于原核生物,其蛋白质编码序列(即编码从起始密码子到终止密码子之间的序列)经测定为1256对碱基,试判断对这段序列的测定是否存在错误:_____,并说明依据_______________________________________________________。
高三生物综合题困难题
回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。(9分)
pIJ702是一种常用质粒(下图),其中tsr为刘链丝菌素(一种抗生素)抗性基因;mel是黑色素合成基因,其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落;而限制酶ClaI、BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在PIJ702上分别只有一处识别序列。
1.质粒DNA分子中的两条链靠______键维系成双链结构。
2.以SacI和SphI切取的目的基因置换PIJ702上0.4kb(1kb=1000对碱基)的SacI/SphI片段,构成重组质粒pZHZ8。上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在上表中。因此判断目的基因内部是否含有BglⅡ切割位点,并说明判断依据________。
3.已知PIJ702上含mel基因的ClaⅠ/PstⅠ区域长度为2.5kb,若用ClaⅠ和PstⅠ联合酶切pZHZ8,则参照表数据可断定酶切产物中最小片段的长度为______kb。
4.不含质粒的链霉菌在含硫链丝菌素固体培养基上的生长状况如下表所示。若要筛选接纳了PIJ702或pZHZ8 的链霉菌细胞,所需的硫链丝菌素最小浓度应为______μg/mL (填写表格中给定浓度);含有重组粒pZHZ8的菌落呈_____色。
5.上述目的基因来源于原核生物,其蛋白编码序列(即编码从起始密码子到终止密码子之间的序列)经测定为1265对碱基,试判断对这段序列的测定是否存在错误:_______,并说明依据_______.
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(16分)回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。pIJ702是一种常用质粒,其中tsr为硫链丝菌素(一种抗生素)抗性基因,mel是黑色素合成基因,其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落;而限制酶CLaⅠ、BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分别只有一处识别序列。
(1)质粒DNA分子中的两条链靠_______键维系成双链结构。
(2)以SacⅠ和SphⅠ切取的目的基因置换pIJ702上0.4kb(1kb=1000对碱基)的SacⅠ/SphⅠ片段,构成重组质粒pZHZ8。上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表4中。由此判断目的基因内部是否含有BglⅡ切割位点,并说明判断依据
(3)已知pIJ702上含mel基因的ClaⅠ/PstⅠ区域长度为2.5kb,若用ClaⅠ和PstⅠ联合酶切pZHZ8,则参照表4数据可断定酶切产物中最小片段的长度为_______kb。
(4)不含质粒的链霉菌在含硫链丝菌素固体培养基上的生长状况如表5所示。若要筛选接纳了pIJ702或pZHZ8的链霉菌细胞,所需的硫链丝菌素最小浓度应为_____μg/mL (填写表格中给定浓度);含有重组质粒pZHZ8的菌落呈______色。
(5)上述目的基因来源于原核生物,其蛋白质编码序列(即编码从起始密码子到终止密码子之间的序列)经测定为1256对碱基,试判断对这段序列的测定是否存在错误:_____,并说明依据_______________________________________________________。
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pIJ702是一种常用质粒,其中tsr为硫链丝菌素(一种抗生素)抗性基因,mel是黑色素合成基因,其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落:而限制酶A、B、C、D在pIJ702上分别只有一处识别序列。以B和C切取的目的基因置换pIJ702上0.4kb(1kb=1000对碱基)的B/C片段,构成重组质粒,如图。
1.构成重组质粒时除了限制酶还需用到工具酶是_____________。上述基因工程中的受体细胞是_____________(硫链丝菌/链霉菌)细胞。
2.将上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表中。
限制酶 | pIJ702 | 重组质粒 |
A | 5.7 | 1.6Kb,5.1Kb |
D | 5.7 | 2.2Kb,4.5Kb |
由此判断目的基因内部是否含有限制酶A、D切割位点,其情况是目的基因中 。
A.只有A酶切割位点 B.只有D酶切割位点
C.两者都有切割位点 D.两者都没有切割位点
不含质粒的链霉菌在含硫链丝菌素固体培养基上的生长状况如表所示。
固体培养基中硫链丝菌素浓度(ug/mL) | 0 | 1 | 2 | 5 | 10 |
不含质粒的链霉菌生长状况 | +++++ | +++ | + | - | - |
“+”表示生长;“-”表示不生长
3.若要筛选接纳了pIJ702或重组质粒的链霉菌细胞,所需的硫链丝菌素最小浓度应为____________ug/mL(填写表3中给定浓度);含有重组质粒的菌落呈____________(白/黑)色。
4.上述目的基因来源于原核生物,其蛋白质编码序列(即编码从起始密码子到终止密码子之间的序列)经测定为1256对碱基,试判断对这段序列的测定是否存在错误?并说明依据。____________。
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下图1是利用两种不同生物技术将小鼠培育成大鼠的过程。图2中质粒是基因工程中常用的质粒pIJ702,其中tsr为硫链丝菌素抗性基因,mel是黑色素合成基因,其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落;而限制酶Cla Ⅰ、Bgl Ⅱ、Pst I、Sac Ⅰ、Sph Ⅰ在pⅠJ702 上分别只有一处识别序列。
(1)图1中应用到的生物工程技术有_______________。c分子称为____________,其上的生长激素基因表达产物的受体分布在丁鼠的全身细胞的______________。
(2)若大鼠甲和大鼠乙体内X染色体上均带有某种致病基因,则培育出的大鼠丙和大鼠丁携带致病基因的是(不考虑基因突变)______________。
(3)以Sac Ⅰ和Sph Ⅰ同时切割大鼠生长激素基因和质粒PIJ702,获取的目的基因去置换PIJ702上0.4kb的片段,构成重组质粒pZHZ8。上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表1中。由此判断目的基因的片段长度为_____________kb。参照表1数据,如果用Pst Ⅰ和Cla l同时酶切重组质粒pZHZ8,则两种酶可将pZHZ8切成__________个片段。
(4)重组质粒pZHZ8上的标记基因是__________________,在含硫链丝菌素固体培养基上培养后,筛选过程中要淘汰__________色的菌落。
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回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。(9分)
如图A所示,质粒pZHZ9上含有X抗生素抗性基因(XR)和Y抗生素抗性基因(YR)。其中XR内部含有限制酶KasI识别序列,YR内部含有限制酶FseI、HpaII、NaeI、NgoMIV识别序列,五种酶的识别序列如图B(▼表示切割位点),且这些识别序列在整个质粒上均仅有一处,目的基因内部不存在这些识别序列。
(1)若要将结构如图C所示的目的基因直接插入到YR内形成重组质粒pZHZ10,则pZHZ9需用限制酶_____切开。
(2)将上述切开的质粒溶液与目的基因溶液混合,加入DNA连接酶连接后,进行大肠杆菌受体细胞导入操作。之后,受体细胞的类型(对两种抗生素表现出抗性R或敏感性S)包含_____(多选)。
A.XR、YR B.XR、YS C.XS、YR D.XS、YS
(3)若用KasI和FseI联合酶切重组质粒pZHZ 10(只含单个目的基因),则可能产生的酶切片段数为____(多选)。
(4)动物基因工程通常以受精卵作为受体细胞的根本原因是________。
A.受精卵能使目的基因高效表达 B.受精卵可发育成动物个体
C.受精卵基因组更易接受DNA的插入 D.受精卵尺寸较大,便于DNA导入操作
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回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。
在图27所示的质粒PZHZ11(总长为3.6 kb,1 kb=1 000对碱基因)中,lacZ基因编码β-半乳糖苷酶,后者催化生成的化合物能将白色的大肠杆菌染成蓝色。
(1)若先用限制酶BamHI切开pZHZ11,然后灭活BamHI酶,再加DNA连接酶进行连接,最后将连接物导入足够数量的大肠杆菌细胞中,则含3.1 kb质粒的细胞颜色为 ;含3.6 kb质粒的细胞颜色为 。
(2)若将两端分别用限制酶BamHI和BglHI切开的单个目的基因片段置换pZHZ11中0.5 kb的BamHI酶切片段,形成4.9 kb的重组质粒,则目的基因长度为 kb。
(3)上述4.9 kb的重组质粒有两种形式,若用BamHI和EcoRI联合酶切其中一种,只能获得1.7 kb和3.2 kb两种DNA片段;那么联合酶切同等长度的另一种重组质粒,则可获得
kb和 kb两种DNA片段。
(4)若将人的染色体DNA片段先导入大肠杆菌细胞中克隆并鉴定目的基因,然后再将获得的目的基因转入植物细胞中表达,最后将产物的药物蛋白注入小鼠体内观察其生物功能是否发挥,那么上述过程属于 。
A.人类基因工程 B.动物基因工程 C.植物基因工程 D.微生物基因工程
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回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。(9分)
在图所示的质粒PZHZ11(总长为3.6 kb,1 kb=1000对碱基因)中,lacZ基因编码β-半乳糖苷酶,后者催化生成的化合物能将白色的大肠杆菌染成蓝色。
(1)若先用限制酶BamHI切开pZHZ11,然后灭活BamHI酶,再加DNA连接酶进行连接,最后将连接物导入足够数量的大肠杆菌细胞中,则含3.1 kb质粒的细胞颜色为 ;含3.6 kb质粒的细胞颜色为 。
(2)若将两端分别用限制酶BamHI和BglHI切开的单个目的基因片段置换pZHZ11中0.5 kb的BamHI酶切片段,形成4.9 kb的重组质粒,则目的基因长度为 kb。
(3)上述4.9 kb的重组质粒有两种形式,若用BamHI和EcoRI联合酶切其中一种,只能获得1.7 kb和3.2 kb两种DNA片段;那么联合酶切同等长度的另一种重组质粒,则可获得
kb和 kb两种DNA片段。
(4)若将人的染色体DNA片段先导入大肠杆菌细胞中克隆并鉴定目的基因,然后再将获得的目的基因转入植物细胞中表达,最后将产物的药物蛋白注入小鼠体内观察其生物功能是否发挥,那么上述过程属于 。
A.人类基因工程 B.动物基因工程 C.植物基因工程 D.微生物基因工程
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用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述错误的是
A.常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒
B.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达
C.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
D.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达
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下列有关质粒的叙述中,正确的是 ( )
A.质粒是存在于细菌中的一种细胞器
B.质粒改造后可用作基因工程的载体
C.质粒上基因的表达不遵循中心法则
D.质粒必须具有抗生素抗性以便筛选
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下列有关基因工程中载体的说法正确的是
A.质粒是一种独立于细菌拟核外的链状DNA分子 B.所有的质粒都可以作为基因工程中的载体
C.质粒载体的复制和表达不遵循中心法则 D.作为载体的质粒常含有抗生素抗性基因
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