蜂毒素是工蜂毒腺分泌的多肽，具有抗菌、抗病毒及抗肿瘤等广泛的生物学效应。体外研究发现，蜂毒...

蜂毒素是工蜂毒腺分泌的多肽，具有抗菌、抗病毒及抗肿瘤等广泛的生物学效应。体外研究发现，蜂毒素对多种癌细胞具有强烈的杀伤作用。

请回答下列问题：

（1）蜂毒素是在工蜂毒腺细胞的___________（细胞器）上合成的。

（2）图一1表示癌细胞在一定浓度的蜂毒素培养液中培养几小时后，DNA含量不同的细胞数目情况。据此推测，蜂毒素能将癌细胞阻断在有丝分裂的______________期。

（3）研究表明，阻断癌细胞增殖周期可引起细胞凋亡。科研人员为研究蜂毒素对人胃癌细胞的影响及作用机制，进行了以下实验。请完善实验并回答问题。

【方法步骤】

a．取4只相同的培养瓶，编号，分别加入等量的完全培养液并接种等量离体胃癌细胞。

b．1号培养瓶为空白对照，向2～4号培养瓶中分别加入2、4、8μg/mL蜂毒素溶液。

c．培养48小时后，检测并统计__________，结果如图2所示。

d．重复步骤，检测凋亡基因（Bax、Bel-2）的表达，结果如图3所示。

【分析讨论】

a．图2表明一定浓度的蜂毒素能够诱导胃癌细胞凋亡，并随浓度增大诱导效应____________。

b．图2、图3表明：从基因水平上看，蜂毒素诱导胃癌细胞凋亡与____________有关。

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蜂毒素是工蜂毒腺分泌的多肽，体外研究发现，蜂毒素对多种癌细胞具有强烈的杀伤作用。其作用机制之一是诱导细胞凋亡。以下是相关的实验研究过程及结果：

实验材料：人肝癌细胞（HepG2），培养液，0．02% 二甲亚砜溶液，用0．02% 二甲亚砜溶解的0．5ug/mL、lug/mL、1．5ug/mL的蜂毒素溶液，培养瓶等。

实验思路：

①将等量的人肝癌细胞（HepG2）悬液，分别接种于若干含有等量培养液的培养瓶中；将培养瓶放于37℃、5%C02培养箱中培养24h,静置、去掉上清液；

②　　　　　　　　 ，再加入等量的培养液，于37℃、5%C02培养箱中继续培养；

③培养72h，每24h用细胞计数仪检测癌细胞数。

（1）请完善上述实验思路中相关内容。

（2）本实验的自变量是　　　　 。实验中，每组细胞培养瓶不止一个，统计后求平均值，目的是　　　　　　　　　 。

（3）设对照组癌细胞增殖率为100%,用下面公式计算各用药组癌细胞增殖率：增殖率（％）=[（用药组各肘段癌细胞数-用药组开始癌细数）/（对照组各时段癌细胞数-对照组开始癌细胞数）]×l00。得到以下数据：

表1蜂毒素对HepG2细胞增殖率的影响

①请将表中前48小时的数据转化为相应给药组细胞增殖率随时间变化的柱形图。

②通过数据和柱形图分析可以得出蜂毒素对HepG2细胞的作用效果的特点是：　　　　　　　　　　　　　　 。

（4）人体内癌细胞凋亡　　　　　　 （会/不会）引起炎症。

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据报导最新的生物科技抗癌手段：是从患者体内抽血采集单个核细胞，经体外培养及诱导，以获取成熟的，具有识别肿瘤细胞能力的抗原递呈细胞和数量更多、更有活性和杀伤力的细胞因子诱导的杀伤细胞。再将这两种细胞分次回输到患者体内，用他们来对癌细胞进行特异性杀伤。下列与此相关的叙述中，不正确的是

A．单个核细胞类似于造血干细胞，具有分裂和分化能力

B．在体外培养单个核细胞的合成培养基中，通常需加入血清、血浆等一些天然成分

C．上述的两种细胞回输到患者体内不会发生排斥反应

D．单个核细胞经过诱导后，细胞内有部分基因发生了突变

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抗菌肽在生物体内广泛存在，是生物体用来抵御外来病原体的一类小分子蛋白质。它不仅具广谱抗菌活性，而且对某些病毒、真菌、病原虫和肿瘤细胞也有抑杀作用。在科研和临床上有很大的应用价值。请回答下列问题：

（1）抗菌肽是一类免疫活性物质，是生物体中________免疫的重要组成部分。研究发现，抗菌肽可以在细菌细胞膜上穿孔而形成离子孔道，从而使细菌细胞膜丧失_____性，引起细胞内容物大量外流，最终导致细菌死亡。

（2）人们从家蚕体内提取到了抗菌肽，但提取天然抗菌肽成本高、工序繁，因而采用基因工程的方法人工合成抗菌肽。将抗菌肽基因与运载体结合导入大肠杆菌细胞中，经过筛选获得重组型大肠杆菌，然后将重组大肠杆菌接种到________培养基中在37℃条件下振荡培养一段时间后，菌体内会积累大量抗菌肽。经分离、纯化后获得人工合成的抗菌肽。

（3）为检测人工合成的家蚕抗菌肽的活性，研究人员进行了如下实验。

①首先配制适合金黄色葡萄球菌生长的培养基，将培养基用_______法处理后在酒精灯火焰附近倒平板，待平板冷却凝固后，将一定浓度的某金黄色葡萄球菌液_______在固体培养基上，然后在培养基上贴A、B、C三张无菌小纸片。

②在A处滴加含有人工合成的抗菌肽缓冲液，在B处滴加浓度相同且等量的含有________的缓冲液，在C处滴加________，培养一段时间后，测量_________推断抗菌肽抑菌活性的强弱。

③图示的实验结果说明：____________________。

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（6分）抗菌肽在生物体内广泛存在，是生物体用来抵御外来病原体的一类小分子蛋白质。它不仅具广谱抗菌活性，而且对某些病毒、真菌、病原虫和肿瘤细胞也有抑杀作用。在科研和临床上有很大的应用价值。请回答下列问题：

（1）抗菌肽是一类免疫效应因子，是生物体中________免疫的重要组成部分。研究发现，抗菌肽可以在细菌细胞膜上穿孔而形成离子孔道，从而改变细菌细胞膜的________，引起细胞内容物大量外流，最终导致细菌死亡。

（2）为检测人工合成的家蚕抗菌肽的活性，研究人员进行了如下实验。

①将一定浓度的某金黄色葡萄球菌培养液均匀涂布在固体培养基上，然后在培养基上贴A、B、C三张无菌小纸片。

②在A处滴加含有人工合成的抗菌肽缓冲液，在B处滴加浓度相同且等量的含有________的缓冲液，在C处只滴加，培养一段时间后，测量抑菌环的直径推断抗菌肽活性的强弱。

③实验结果：A、B处形成的抑菌环大小相近，说明：；

C处没有出现抑菌环，说明：。

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内皮素（ET）是一种多肽，它有强烈血管收缩和促进平滑肌细胞增殖等作用，研究发现内皮素功能异常与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联内皮素主要通过靶细胞膜上内皮素受体而发挥生物学效应。ETA是内皮素主要受体，科研人员试图通过构建表达载体，实现ETA在细胞中髙效表达，为后期体外研究以及拮抗剂筛选、活性评价等奠定基础。其过程如下（图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因，限制酶ApaI识别序列为C↓CCGGG,限制酶XhoI识别序列为C↓TCGAG）。请分析回答：

（1）完成过程①、④所需酶分别是　　　　　　　　 ，过程②相比，过程①特有碱基配对方式是　　　　　　 。

（2）过程③中，限制酶Xho I切割DNA,使　　　　　 键断开，形成的黏性末端是　　　　　　　　 ，与只使用限制酶XhoI相比，用两种限制酶切割获得的优点在于：既能防止　　　　　　　　　 ,还能保证目的基因定向连接到载体上。

（3）过程⑥中，要用　　　　　　　　 预先处理大肠杆菌，使其处于容易吸收外界DNA感受态。

（4）基因工程的核心是图中过程　　　　　　　　　 （填标号），重组质粒中氨苄青霉素抗性基因的作用是　　　 ；利用SNAP与因结合构成融合基因，目的是可以检测　　　　　　　　　　 。

（5）人皮肤黑色素细胞上有内皮素特异受体，内皮素与黑色素细胞膜上受体后，会刺激黑色素细胞分化、增殖并激活酪氨酸酶活性，从而使黑色素急剧增加，美容时可以注射ETA达到美白祛斑效果，原因是ETA与内皮素结合，　　　　　　　　　　 ，抑制了黑色素细胞的增殖和黑色素的形成。

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下列各项中，只属于细胞免疫的是 （  ）

A．抑制病毒的繁殖

B．使细菌外毒素失去作用

C．效应T细胞的杀伤作用

D．使病毒失去感染的作用

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下列各项中，只属于细胞免疫的是 （   ）

A.抑制病毒的繁殖 　　　

B.使细菌外毒素失去作用

C.效应T细胞的杀伤作用 　　

D．使病毒失去感染的作用

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研究表明在人体细胞免疫过程中，效应T细胞能够分泌一种称为穿孔素的蛋白质，可将被病毒感染的细胞或肿瘤细胞的膜溶解而形成孔洞，导致这些靶细胞解体死亡。下列与这一免疫过程有关的说法正确的是

A．效应T细胞分泌穿孔素的过程属于反应阶段

B．靶细胞裂解后，侵入靶细胞内的病毒也就失活了

C．在上述效应T细胞作用过程中产生的穿孔素属于淋巴因子

D．效应T细胞分泌的穿孔素以主动运输方式跨过细胞膜

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单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是(　　 )

A. 特异性强，灵敏度高

B. 与抗癌药物结合可制成“生物导弹”

C. 体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体

D. 由B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌

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