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[生物﹣选修3：现代生物科技专题]
1981年Evans和Kaufman首次成功分离出小鼠胚胎干细胞（ES细胞），医学界对其的研究虽颇有争议但也如火如荼．2008年1月17日《干细胞》杂志报道，美国加州的科学家使用了进行试管受精的年轻女性捐献的卵子去核，以及2名志愿者的皮肤成纤维细胞的细胞核，成功克隆出了5个人体胚胎，进而可以开发出有研究价值的干细胞．请回答下列问题．
（1）胚胎干细胞是从动物胚胎发育至囊胚期的 或胎儿的 中分离得到的一类细胞．
（2）上述过程中主要应用的动物细胞工程技术有 、 ．
（3）胚胎干细胞可诱导分化为皮肤干细胞，进而分化成皮肤细胞的根本原因是 ．
（4）某患者不能产生正常的白细胞，通过骨髓移植可以达到治疗的目的，骨髓移植治疗的实质是将 移植到患者体内．
（5）在培养胚胎干细胞时，培养基中通常需要加入 等天然成分，培养过程中所需气体主要有 ．
（6）胚胎干细胞也可作为基因工程的受体细胞，将目的基因导入胚胎干细胞最常用的方法是 ，将获得的目的基因转入胚胎干细胞前需构建基因表达载体，其目的是 ．
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自1981年Evans和Kaufman首次成功分离小鼠胚胎干细胞（ES细胞），医学界对其的研究虽颇有争议但也如火如荼，下图表示利用胚胎干细胞（ES细胞）所做的一系列研究，请据图分析回答：
（1）过程Ⅰ将胚胎干细胞置于用γ射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞的饲养层上，并加入动物血清、抗生素等物质，维持细胞不分化的状态。在此过程中，饲养层提供干细胞增殖所需的________，加入抗生素是为了________，这对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义。
（2）过程Ⅱ将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物器官形成的时间、发育过程以及影响的因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有________的特点。在哺乳动物早期发育过程中，囊胚的后一个阶段是________。
（3）过程Ⅲ中目的基因导入胚胎干细胞最常用的方法是________，将获得的目的基因转入胚胎干细胞前需构建基因表达载体，其目的是__________________ 。
（4）过程Ⅳ得到的小鼠畸胎瘤里面全是软骨、神经管、横纹肌和骨骼等人类组织和器官。实验时，必须用X射线照射去除胸腺的小鼠，获得免疫缺陷小鼠，其目的是_____________该过程研究的意义在于解决
问题。
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（15分）
1981年Evans和Kaufman首次成功分离出小鼠胚胎干细胞(ES细胞)，医学界对其的研究虽颇有争议但也如火如荼。2008年1月17日《干细胞》杂志报道，美国加州的科学家使用了进行试管受精的年轻女性捐献的卵子去核，以及2名志愿者的皮肤成纤维细胞的细胞核，成功克隆出了5个人体胚胎，进而可以开发出有研究价值的干细胞。请回答下列问题。
(1)胚胎干细胞是从动物胚胎发育至囊胚期的________或胎儿的________中分离得到的一类细胞。
(2)上述过程中主要应用的动物细胞工程技术有____________、________。
(3)胚胎干细胞可诱导分化为皮肤干细胞，进而分化成皮肤细胞的根本原因是_____________________。
(4)某患者不能产生正常的白细胞，通过骨髓移植可以达到治疗的目的，骨髓移植治疗的实质是将________移植到患者体内。
(5)在培养胚胎干细胞时，培养基中通常需要加入______等天然成分，培养过程中所需气体主要有________。
(6)胚胎干细胞也可作为基因工程的受体细胞，将目的基因导入胚胎干细胞最常用的方法是________，将获得的目的基因转入胚胎干细胞前需构建基因表达载体，其目的是______________________。
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1981年Evans和Kaufman首次成功分离小鼠ES细胞，如图为利用小鼠胚胎干细胞（ES细胞）进行疾病治疗的相关研究图解。请回答下列问题：
（1）致癌基因通过a、c、d等过程最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程称为_______，使用PCR技术扩增致癌基因时，若对一个含致癌基因的DNA扩增n代，则需消耗_______对引物。
（2）ES细胞除可取自桑椹胚外，还可取自_________，过程b需要在培养液中加入_______，可诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，再进行细胞移植以治疗相应的疾病。但要治疗人类因胰岛素B受损，胰岛素分泌不足引起的I型糖尿病，却不能移植该图中的胰岛B细胞，理由是______________。
（3）b过程体现了ES细胞在功能上具有______________的特点。
（4）小鼠还可以用于制备单克隆抗体，制备过程中用到了小鼠的骨髓瘤细胞，这是因为该细胞具有_______的特点。在对抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞进行克隆化培养时，要先将培养液中的细胞浓度稀释到3~10个/mL，然后在多孔细胞培养板的每个孔中只能加入0．1mL细胞稀释液，绝对不能多加，原因是______________。
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自1981年Evans和Kaufman首次成功分离小鼠ES细胞，国内外研究人员已在仓鼠、大鼠、鬼、猪、恒河猴以及人类都分离获得了ES细胞。ES细胞不仅可以作为体外研究细胞分化和发育调控机制的模型，而且还可以作为一种载体，将通过同源重组产生的基因组的定点突变导入个体，更重要的是，ES细胞将会给人类移植医学带来一场革命。如图为利用小鼠胚胎干细胞（ES细胞）进行疾病治疗的相关研究图解。请回答下列问题：
（1）致癌基因通过a、c、d等过程最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程称为__________，使用PCR技术扩增致癌基因时，在PCR反应体系中需添加的物质除了缓冲液、致癌基因模板，四种脱氧核苷酸原料、ATP、过量的引物，还需要添加___________。若对一个含致癌基因的DNA扩增n代，则需消耗___________对引物。
（2）ES细胞除可取自囊胚的内细胞团外，还可取自___________，过程b需要在培养液中加入___________，可诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，再进行细胞移植以治疗相应的疾病。但要治疗人类因胰岛素B受损，胰岛素素分泌不足引起的I型糖尿病，却不能通过移植该胰岛B细胞，理由是_____________________。
（3）b过程体现了ES细胞在功能上具有___________的特点。图中b、c和d都属于胚胎工程的技术手段，胚胎工程是指对动物的________________所进行的多种显微操作和处理技术。
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自1981年Evans和Kaufman首次成功分离小鼠ES细胞，国内外研究人员已在仓鼠、大鼠、鬼、猪、恒河猴以及人类都分离获得了ES细胞。ES细胞不仅可以作为体外研究细胞分化和发育调控机制的模型，而且还可以作为一种载体，将通过同源重组产生的基因组的定点突变导入个体，更重要的是，ES细胞将会给人类移植医学带来一场革命。如图为利用小鼠胚胎干细胞（ES细胞）进行疾病治疗的相关研究图解。请回答下列问题：
（1）致癌基因通过a、c、d等过程最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程称为__________，使用PCR技术扩增致癌基因时，在PCR反应体系中需添加的物质除了缓冲液、致癌基因模板，四种脱氧核苷酸原料、ATP、过量的引物，还需要添加___________。若对一个含致癌基因的DNA扩增n代，则需消耗___________对引物。
（2）ES细胞除可取自囊胚的内细胞团外，还可取自___________，过程b需要在培养液中加入___________，可诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，再进行细胞移植以治疗相应的疾病。但要治疗人类因胰岛素B受损，胰岛素素分泌不足引起的I型糖尿病，却不能通过移植该胰岛B细胞，理由是_____________________。
（3）b过程体现了ES细胞在功能上具有___________的特点。图中b、c和d都属于胚胎工程的技术手段，胚胎工程是指对动物的________________所进行的多种显微操作和处理技术。
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【选修3——现代生物科技专题】
下图为某科研小组采用“基因靶向”技术先将小鼠的棕褐毛基因导入黑色纯种小鼠的胚胎干细胞（ES细胞）中，再将改造后的胚胎干细胞移植回囊胚继续发育成小鼠的过程。据图分析回答：
（1）天然质粒往往需要经过改造才能作为基因工程中的运载体，经改造后的质粒同时具备的条件有___________（填序号）。
①标记基因 ②多个限制酶切割位点 ③对受体细胞无害 ④启动子 ⑤起始密码子
（2）该过程使用了工具酶___________和DNA连接酶，完成目的基因的获取和___________。
（3）过程III常用的方法是___________，第III步操作后，还需经过筛选出含___________的重组DNA分子胚胎干细胞的过程，才能将该胚胎干细胞注射到囊胚中。
（4）改造后的胚胎干细胞移植回囊胚能继续发育成小鼠，其根本原因是______________________。
（5）胚胎干细胞在功能上具有发育的全能性，形成组织、器官必须要进行______________________。
（6）若经过图示过程培育成的小鼠仍为黑色，则能否说明未成功导入棕褐毛基因？_________。你的理由是____________________________________________________________。
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[生物——选修3，现代生物科技专题]利用基因工程可以治疗有基因缺陷的疾病。基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如下图：
(1)该项工程中目的基因的获取可以利用PCR技术，依据_________设计引物，利用_______为原料在PCR仪中进行扩增。
(2)该项基因工程的关键环节是需要构建含有Rag2基因的_______________.
(3)图中步骤①中所选的卵母细胞应处于___________期。而ES细胞一般从发育到________时期的
重组胚胎中分离获取。
(4)转化成功的ES细胞具有的结构特点是_______________。为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用抗Rag2蛋白的抗体进行________________。
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【生物一选修3:现代生物科技专题】Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如图（图中数字序号表示的是相关过程）。请回答下列有关问题：
(1)过程②利用的技术是_______________,过程③中涉及到了基因工程技术，其中作为受体
细胞的是_______________。
(2)过程③中获取的目的基因是_______________，可以根据该基因的____________.设计引物，利用PCR技术扩增目的基因片段。按此方法和图示技术流程，完成 Rag2基因缺失小鼠的基因治疗涉及的酶有_______和耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)等。
(3)图中造血干细胞中的遗传物质至少有 __________来源。为检测 Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质,用_________________进行杂交实验。图中所述克隆技术属于_______克隆。
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【生物一选修3:现代生物科技专题】Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如图（图中数字序号表示的是相关过程）。请回答下列有关问题：
(1)过程②利用的技术是_______________,过程③中涉及到了基因工程技术，其中作为受体
细胞的是_______________。
(2)过程③中获取的目的基因是_______________，可以根据该基因的____________.设计引物，利用PCR技术扩增目的基因片段。按此方法和图示技术流程，完成 Rag2基因缺失小鼠的基因治疗涉及的酶有_______和耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)等。
(3)图中造血干细胞中的遗传物质至少有 __________来源。为检测 Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质,用_________________进行杂交实验。图中所述克隆技术属于_______克隆。
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