[生物——选修1:生物技术实践]某同学欲从土壤中筛选能够分解尿素的细菌，请回答以下问题：（...

[生物——选修1:生物技术实践]

某同学欲从土壤中筛选能够分解尿素的细菌，请回答以下问题：

（1）在筛选具有分解尿素能力的细菌时，应将土壤样品用________稀释，然后接种到以________为唯一氮源的培养基上。

（2）采用________或________法对初步筛选到的菌株进行纯化。

（3）若要测定培养液中菌体数，可在显微镜下用________直接计数，与涂布平板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较________，原因是______________。

（4）将lmL细菌溶液稀释100倍，在5个平板上用涂布法分别接入O.lmL稀释液经适当培养后，5个平板上的菌落数分别为2、41、115、126、486，据此可得出每升溶液中活菌数为________________。

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【生物﹣选修1生物技术实践】

某研究小组设计了以下实验探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）．实验步骤如图所示，培养基成分如表所示．请分析回答问题：

KH2PO4　　 1.4g

Na2HPO4　　 2.1g

MgSO4•7H2O　　 0.2g

葡萄糖　　 10.0g

尿素　　 1.0g

琼脂　　 15.0g

将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL　　

（1）培养基中加入尿素的目的是筛选 目的菌 ，这种培养基属于 选择 培养基．

（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的 尿素 和 葡萄糖 ，实验需要振荡培养，原因是 为目的菌提供氧气 ．

（3）转为固体培养时，常采用 涂布平板（划线） 的方法接种，获得 单菌落 后继续筛选．

（4）下列材料或用具中：①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管；③实验操作者的双手．需要灭菌的是 ①② ；需要消毒的是 ③ ．（填序号）

（5）在进行分离分解尿素的细菌的实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．A同学的实验结果产生的原因可能有 ①②③ （填序号）．

①由于土样不同　 ②由于培养基污染　　　 ③由于操作失误　 ④没有设置对照

（6）在该实验中，可以通过检测培养基pH的变化来判断尿素是否被分解，所依据的原理是 微生物产生的脲酶能将尿素分解成氨，氨会使培养基的pH升高 ．所用方法是在培养基中加入 酚红指示剂 ，若尿素被分解，则培养基变成红色．

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[生物—选修1：生物技术实践]

如图是从土壤中筛选细菌的过程。请回答下列问题：

（1）土壤中存在能分解尿素的细菌，这些细菌之所以能将尿素分解，是因为能合成_________。因此，图中选择培养基应以_________为唯一氮源。鉴别培养基还需添加______________作指示剂。

（2）若要从土壤中分离大肠杆菌，培养基中应加入牛肉膏、蛋白胨、NaCl、水和琼脂，其中作为碳源的是_____________；鉴别培养基中也需添加某些特定物质，根据培养基菌落的颜色变化来判断是否分离得到大肠杆菌，请简述鉴别大肠杆菌的方法：_________________。

（3）土霉素是一种可以治疗人类感染性疾病的抗生素类药物，可从土壤中放线菌的发酵产物中提取，但土壤中放线菌数目较少，可在逐级稀释前使用________（从培养基的物理状态和功能分析）培养基进行选择培养，以增加目的菌的数目。分析可知，土霉素易溶于有机溶剂，且是___________（填“挥发性”或“非挥发性”）物质，故可使用萃取法从放线菌中提取。萃取得到的样品可用纸层析法进行鉴定，用显色剂显色后结果如下图所示，点样时，A、D点是__________。

　　　 图2

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【生物——选修1：生物技术实践】某研究小组按下图所示过程从土壤中筛选能高效降解尿素的细菌。请回答下列问题。

某研究小组按下图所示过程从土壤中筛选能高效降解尿素的细菌。请回答下列问题。

（1）步骤②是________。实验①②均需要振荡培养，原因是为目的菌提供______。

（2）为了筛选目的菌，步骤③的培养基中加入的唯一氮源为____，这种培养基属于____（填“鉴别”或“选择”）培养基。

（3）步骤③中，需转为固定培养，常采用_______法接种，其中需要用到的接种工具是________（填字母）。

（4）为了对初步筛选出来的菌种作进一步的鉴定，可在培养基中加入_____指示剂，若指示剂变成_____色，则说明该菌种能够分解尿素。

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[生物——选修1:生物技术实践）有些细菌可以分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_____________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于_____________培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_____________和_____________。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_______。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常采用的灭菌方法有灼烧灭菌、_________和_______。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_____________（1分）附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

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【生物—选修1：生物技术实践】

有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以　　　　　 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于　　　　　　 培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即　　　　　　 和　　　　　　 。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力　　 。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、　　　　　 和　　　　 。无菌技术要求实验操作应在　　　　　　　 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

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同学们为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高

效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示，实验步骤如下图所示。请分析回答问题：

（1）简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入　　　　 指示剂，细菌合成的　　　　　 将尿素分解为　　　　 ，pH升高，使指示剂变为红色。

（2）培养基中加入尿素的目的是筛选目的菌，这种培养基属于　　　　 培养基。

（3）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的　　　　　　 和　　　　　　　 ，实验中需要振荡培养，原因是　　　　　　　　　　　　　 。

（4）如图是利用　　　　　　　 法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

（5）关于如图的操作方法和结果，叙述正确的是　　　　　 。

A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌。

B．划线操作须在火焰上进行。

C．在5区域中才可以提到所需菌落。

D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌。

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[生物－选修I生物技术实践](15分)

尿素是一种重要的农业肥料，经微生物分解后能更好的被植物利用。某生物兴趣小组试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计实验并成功筛选到能高效分解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示。将表中物质溶解后，用蒸馏水定容到100mL。实验过程如右图所示:

回答下列问题:

(1)该培养基能筛选出目的菌的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(2)图中将细菌转到固体培养基上接种时，可采用的方法是　　　　　　　　　　 。初步筛选出来的菌种还需要进一步的鉴定：在培养基中加入　　　　　　　 指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若指示剂变成　　　　　　 色，则可说明该菌种能够分解尿素。

(3)在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是　　　 　　 ，需要消毒的是 　　 　 （填序号）。

①培养细菌的培养基与培养皿 　　 ②玻棒、试管、锥形瓶和吸管 　　 ③实验操作者的双手

(4)在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约50个菌落，而其他同学只选择出大约20个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有　　　 　 （填序号）。

①所取土样不同　 　 ②培养基被污染 　 ③接种操作错误 　 ④没有设置对照实验

(5)实验结束后，使用过的培养基应该进行　　　　　　　　 处理后，才能倒掉。

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某同学欲从土壤中筛选能够分解纤维素的细菌，请回答以下问题：

（1）在筛选具有分解纤维素能力的细菌时，应将土壤样品用____________________进行稀释，然后接种到以____________为唯一碳源的培养基上。

（2）采用____________法对初步筛选到的菌株进行纯化。

（3）对纯化的菌种再采用____________方法进行鉴定。

（4）若将稀释105倍的上述纤维素分解菌菌液，用直接计数法和稀铎涂布平板法进行计数。

①直接计数法：用吸管吸取0.1ml该菌液，滴于血球计数板上的盖玻片边缘，待该细菌全部沉降到计数室底部，用显微镜直接计数，并计算出每升菌液的细菌数目。

②稀释涂布平板法计数：在五个固体培养基上分别接种O.lmL该细菌菌液，适宜条件下培养一段时间后，培养基上的菌落数分别为：40、152、154、156，则每升菌液中细菌数量为_________个。

③正常操作情况下，上述两种计数法中，_________统计获得的细菌数量数目目偏多，原因是_________。

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[生物——选修1：生物技术实践]（15分）尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能很好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们设计了以下实验来探究土壤中微生物对尿素的分解作用，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示。

回答问题

（1）“目的菌”生长所需的碳源和氮源分别来自培养基中的　　　　　　 和　　　　　　 。

（2）为说明上表所示培养基具有选择作用，应配置含有　　　　　　　　　 （填物质名称）的培养基作为实验对照，如果对照培养基上的菌落数明显　　　　　　 （选填“多于”或“少于”）表中培养基中的菌落数目，说明表中培养基已筛选出一些目的菌。

（3）此培养基　　　　　 （选填“能”或者“不能”）用于植物组织培养，理由是该培养基中　　　　　　　　　　 。

（4）一般通过稀释涂布平板法统计菌落数来推算细菌数量，但统计的菌落数往往比活菌的实际数目　　　　 （选填“少”或“多”），原因是　　　　　　　　 。

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