为增加油葵种子中的含油量，科学家尝试将花生中的酶A基因导入油葵细胞．获得转基因油葵新品种。...

为增加油葵种子中的含油量，科学家尝试将花生中的酶A基因导入油葵细胞．获得转基因油葵新品种。

（1）为获取目的基因，可从花生细胞中提取_____________，经逆转录形成cDNA。以此cDNA为模板通过PCR技术扩增目的基因。

（2）构建重组DNA分子（如图所示）最好选用__________限制酶，目的是可避免____________________。

（3）普通大肠杆菌细胞中没有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，将构建的重组DNA分子导入农杆菌中，将获得的农杆菌接种在含_______________的固体平板上培养得到含重组质粒的单菌落，再利用培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液。

（4）剪取油葵的叶片放入浸染液中一段时间后，经过筛选获得转基因油菜细胞。最后经过__________________培育成转基因油葵植株。此种技术的原理是______________。

（5）研究发现，如果将该酶A的20位和24位氨基酸变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍。通过蛋白质工程对酶A进行改造，所需步骤有______________。

a．蛋白质的结构设计　　 　　　　　　　　　　

b．蛋白质的结构和功能分析

c．蛋白质结构的定向改造　　　　　　　　　　

d．酶A基因的定向改造

e．将改造后的酶A慕因导入受体细胞　　 　

f．将定向改造的酶A导入受体细胞

（6）经过种植转基因油葵发现，虽然转基因油葵种子中含油量上升，但是抗灰霉菌的能力丢失，其原因是_____________________。

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为增加油葵种子中的含油量，科学家尝试将花生中的酶A基因导入油葵细胞，获得转基因油葵新品种。

（1）为获取目的基因，可从花生细胞中提取______________，经逆转录形成____________。以此为模板通过_____________扩增目的基因。

（2）构建重组DNA分子需用载体，常见的载体有____________；构建好的载体一般都包括以下几个部分：启动子、目的基因和__________________

（3）剪取油葵的叶片放入浸染液中，一段时间后筛选获得转基因油菜细胞。最后经过___________培育成转基因油葵植株，此种技术的原理是___________________。

（4）研究发现，如果将该酶A的20位和24位氨基酸变为半胱氨酸其催化能力将提高2倍。通过蛋白质工程对酶A进行改造，所需步骤有：蛋白质的结构和功能分析→_______→________→将改造后的酶A基因导人受体细胞→获得所需的蛋白质。

（5）经过种植转基因油葵发现，虽然转基因油葵种子中含油量上升，但是抗灰霉菌的能力丢失，其原因是_______。

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为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得转基因油菜品种。

（1）研究人员从陆地棉细胞中获取酶D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因，如图为所示限制酶的识别位点。这样可以用____________________（填酶）处理两个基因后，可得到____________端（填图中字母）相连的融合基因。

（2）将上述融合基因插入如图2所示Ti质粒的T-DNA中。构建充足质粒并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含____________的固体平板上培养得到含融合基因的单菌落，再利用培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液。

（3）剪取油菜的叶片放入染液中一段时间，此过程的目的是利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞，经筛选后再将该油菜细胞通过植物组织培养获得转获因油菜。整个过程涉及的原理是____________。

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为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜叶片细胞并获得了转基因油菜品种．

（1）从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因，然后利用_____技术分别进行扩增．

（2）如图1，选用图中的限制酶_____处理两个基因后再用_____酶处理，得到_____（填图中字母）端相连的融合基因．

（3）将上述融合基因插入图2所示Ti质粒的T﹣DNA中，构建_____并导入农杆菌中．将获得的农杆菌接种在含_____的固体平板上培养得到单菌落，再利用液体培养基震荡培养，得到用于转化的浸染液．

（4）剪取油菜的叶片放入浸染液中一段时间，此过程的目的是_____，进一步筛选后获得转基因油菜．

（5）用DNA﹣RNA分子杂交技术确定融合基因是否完成了_____（转录、翻译）．

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为增加油菜种子的含油量，牙研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜叶片细胞并获得了转基因油菜品种。请回答下列问题：

（1）从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因，然后利用________技术分别进行扩增。　　

（2）如图1，选用图中的限制酶__________处理两个基因后再用__________酶处理，得到__________（填图中字母）端相连的融合基因。

（3）将上述融合基因插入图2所示Ti质粒的T-DNA中，构建_________并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含_________的固体平板上培养得到单菌落，再利用液体培养基振荡培养，得到用于转化的侵染液。

（4）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是_________，进一步筛选后获得转基因油菜。

（5）用DNA-RNA分子杂交技术确定融合基因是否完成了________（填“转录”或“翻译”)。

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【生物一选修3:现代生物科技】为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜叶片细胞并获得了转基因油菜品种。

（1）从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因，然后利用_____________技术分别进行扩增。

（2）选用下图中的限制酶________处理两个基因后再用__________酶处理，得到_______（填图中字母）端相连的融合基因。

（3）将上述融合基因插人上图所示Ti质粒的T一DNA中，构建_____________并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含____________的固体平板上培养得到单菌落，再利用液体培养基震荡培养，得到用于转化的浸染液。剪取油菜的叶片放入浸染液中一段时间，此过程的目的是　　　　　　　　 ，进一步培养筛选后获得转基因油菜。

（4）用DNA—RNA分子杂交技术确定融合基因是否完成了_______________ 过程。

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为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上转运肽的基因相连，导入油菜叶片细胞并获得了转基因油菜品种。

（1）如图，选用图中的限制酶　　　　　　　 处理两个基因后再用　　　　　　　　 酶处理，得到　　　　　　 （填图中字母）端相连的融合基因。

（2）将上述融合基因插入上图所示Ti质粒的　　　　　　 中，构建　　　　　　　　　 并导入农杆菌中。

（3）将获得的农杆菌接种在含　　　　　　　 的固体平板上培养得到单菌落，利用液体培养基震荡培养，得到用于转化的浸染液。

（4）利用　　　　　　 法将目的基因导入油菜叶片中，并通过筛选获得转基因油菜细胞，通过　　　　　　 技术可培育成转基因油菜植株。

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为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。请回答问题：

（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用PCR技术从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因中获取转运肽基因，所含限制酶(ClaⅠ、SacⅠ、XbaⅠ)的酶切位点如图甲所示。

若用_______和_______酶处理酶D基因和转运肽基因后，可得到____端与________端(填图中字母)相连的重组基因。

（2）将上述重组基因进一步处理，插入图乙所示Ti质粒的T-DNA中，构建____________并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含________的固体平板上培养得到含重组基因的单菌落，再利用液体培养基震荡培养，可以得到用于转化的侵染液。

（3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是_________，进一步筛选后获得转基因油菜细胞，该细胞通过_______技术，可培育成转基因油菜植株。

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【现代生物技术——选修Ⅲ】（15分，除标注外每空1分）为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。

(1)研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用____________法，从陆地棉基因文库中获取酶D基因.从拟南芥基因文库中获取转运肽基因.所含三种限制酶(Cla I、Sac I、Xba I)的切点如下图所示。则用______________和_____________酶处理两个基因后，可得到____________ (填图中字母)端相连的融合基因。

(2)将上述融合基因插入右上图所示质粒的T-DNA中.构建____________，并导入农杆菌中.将获得的农杆菌接种在含____________的固体平板上培养得到含融合基因的单菌落，再利用培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液.

(3)剪取油菜的叶片放入染液中一段时间后筛选获得转获因油菜细胞.该细胞通过____________技术.可培育成转基因油菜植株。

(4)提取上述转基因油菜的mRNA.在逆转录酶的作用下获得cDNA.再依据______的DNA片段设计引物进行扩增.对扩增结果进行检侧.可判断融合基因是否完成　　　　　　　　　　 。

(5)用_______________法可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达.

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为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。

（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用__________技术从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因。在上述引物设计时，分别在引物中加入上图所示酶的识别序列，这样可以用____________________酶处理两个基因后，得到____________端（填图中字母）相连的融合基因。

（2）将上述融合基因插入右图所示Ti质粒的T－DNA中，构建_______________并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含______________的固体平板上培养得到单菌落，再利用液体培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液。

（3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是_________________________，进一步筛选后培养获得转基因油菜。

（4）提取上述转基因油菜的mRNA，在____________酶的作用下获得cDNA，再依据融合基因的DNA片段设计引物进行扩增，对扩增结果进行检测，可判断融合基因是否________。

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