某质粒上有SaiⅠ、HindⅢ、 BamHⅠ三种限制酶切割位点,同时还含有抗四坏素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程,如下图所示。回答下列问题:
(1)将目的基因导入植物细胞,釆用最多的方法是农杆菌转化法。其中用到的质粒是__________;该质粒含有一段特殊的DNA片段,称为__________。该方法从农杆菌的作用是__________。
(2)在构建重组质粒时,和只用一种酶切割目的基因的两端及质粒相比,选用HindⅢ和SaiⅠ两种酶的好处是____________________。
(3)含有目的基因的农杆菌可根据标记基因进行筛选。若农杆菌在含有氨苄青霉素和四环素的培养基上都可以生长繁殖,农杆菌中是否巳含有目的基因? __________(填“是”或“否”)。为什么?__________。
(4)将已经转化的农杆菌进行如下筛选,筛选出符合要求的农杆菌。先把转化的农杆菌接种到A培养基中培养,长出菌落后,用无菌牙签挑取A上的单个菌落,分别接种到B(含氨苄青霉素)和C(含四环素和氨苄青霉素)两个培养基的相同位置上,一段时间后,菌落的生长状况如下图所示。含目的基因的菌落位于B或C上的哪些菌落中?请在图中相应的位置上圈出来。
高三生物非选择题困难题
某质粒上有SaiⅠ、HindⅢ、 BamHⅠ三种限制酶切割位点,同时还含有抗四坏素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程,如下图所示。回答下列问题:
(1)将目的基因导入植物细胞,釆用最多的方法是农杆菌转化法。其中用到的质粒是__________;该质粒含有一段特殊的DNA片段,称为__________。该方法从农杆菌的作用是__________。
(2)在构建重组质粒时,和只用一种酶切割目的基因的两端及质粒相比,选用HindⅢ和SaiⅠ两种酶的好处是____________________。
(3)含有目的基因的农杆菌可根据标记基因进行筛选。若农杆菌在含有氨苄青霉素和四环素的培养基上都可以生长繁殖,农杆菌中是否巳含有目的基因? __________(填“是”或“否”)。为什么?__________。
(4)将已经转化的农杆菌进行如下筛选,筛选出符合要求的农杆菌。先把转化的农杆菌接种到A培养基中培养,长出菌落后,用无菌牙签挑取A上的单个菌落,分别接种到B(含氨苄青霉素)和C(含四环素和氨苄青霉素)两个培养基的相同位置上,一段时间后,菌落的生长状况如下图所示。含目的基因的菌落位于B或C上的哪些菌落中?请在图中相应的位置上圈出来。
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某质粒上有SaiⅠ、HindⅢ、 BamHⅠ三种限制酶切割位点,同时还含有抗四坏素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程,如下图所示。回答下列问题:
(1)将目的基因导入植物细胞,釆用最多的方法是农杆菌转化法。其中用到的质粒是__________;该质粒含有一段特殊的DNA片段,称为__________。该方法从农杆菌的作用是__________。
(2)在构建重组质粒时,和只用一种酶切割目的基因的两端及质粒相比,选用HindⅢ和SaiⅠ两种酶的好处是____________________。
(3)含有目的基因的农杆菌可根据标记基因进行筛选。若农杆菌在含有氨苄青霉素和四环素的培养基上都可以生长繁殖,农杆菌中是否巳含有目的基因? __________(填“是”或“否”)。为什么?__________。
(4)将已经转化的农杆菌进行如下筛选,筛选出符合要求的农杆菌。先把转化的农杆菌接种到A培养基中培养,长出菌落后,用无菌牙签挑取A上的单个菌落,分别接种到B(含氨苄青霉素)和C(含四环素和氨苄青霉素)两个培养基的相同位置上,一段时间后,菌落的生长状况如下图所示。含目的基因的菌落位于B或C上的哪些菌落中?请在图中相应的位置上圈出来。
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某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamH I三种限制酶切割位点,同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示,请回答下列问题。
(1)将含有目的基因的DNA与质粒分别用Sal I酶切,酶切产物用______________催化连接,两个DNA片段的连接结果有________种。
(2)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用_____________________技术,愈伤组织经________进而形成完整植株,此过程除营养物质外还必须向培养基中添加。
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【生物一选修3:现代生物科技专题】某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点,同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示,请回答下列问题。
(1)抗盐某因是否在烟草细胞中稳定遗传的关键是________________。
(2)在构建重组质粒时,应选用__________和__________两种酶对目的基因和质粒进行切割,以保证重组DNA序列的唯一性。
(3)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法。含有目的基因的农杆菌可根据标记基因进行筛选。若农杆菌在含有氨苄青霉素和四环素的培养基上都可以生长繁殖,农杆菌中是否己含有目的基因?
__________(是/否)。为什么?_________________________________________________。
(4)愈伤组织经__________形成完整植株,这一过程需要再转接到___________培养基上进行培养,该过程的实质是__________________。
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某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点,它们的识别序列和黏性末端各不相同。质粒同时也含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示,请回答下列问题。
(1)将抗盐基因导入烟草细胞内,使烟草植株产生抗盐性状,这种变异属于________。
(2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞,一般情况下,烟草不会具有抗盐特性,原因是抗盐基因在烟草细胞中不能________________________________。
(3)在构建重组质粒时,应选用________和________两种酶对质粒和含抗盐基因的DNA进行切割,以保证重组DNA序列的唯一性。
(4)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌,下图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。
培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,培养基A和培养基B分别还含有________、________。从检测筛选的结果分析,含有目的基因的是________(填数字)菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功,既要用__________标记的含抗盐基因的DNA片段作探针进行分子杂交检测,又要用______________的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。
(5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用________技术,愈伤组织经________进而形成完整植株,此过程除营养物质外还必须向培养基中添加______。
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14分)、某质粒上有SalI、HindⅢ、BamHI三种限制酶切割位点,同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如下图所示,请回答下列问题。
(1)将抗盐基因导入烟草细胞内,使烟草植株产生抗盐性状,这种新性状(变异性状)的来源属于______________。
(2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞,一般情况下,烟草不会具有抗盐特性,原因是抗盐基因在烟草细胞中不能复制,也不能______________ 。
(3)在构建重组质粒时,应选用______________和______________两种酶对______________和______________进行切割,以保证重组DNA序列的唯一性。
(4)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌,下图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。
培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,培养基A和培养基B分别还含有______________、______________。从检测筛选的结果分析,含有目的基因的是______________菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位素标记的______________作探针进行分子杂交检测,又要用一定浓度的盐水浇灌烟草植株从________水平鉴定烟草植株的耐盐性。
(5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用_______________技术,愈伤组织经______进而形成完整植株,此过程除营养物质外还必须向培养基中添加。
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某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、Bam_HI三种限制酶切割位点,同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示,请回答下列问题。
(1)在构建重组质粒时,应选用_______和________两种限制酶对_______进行切割,然后进行连接,以保证重组DNA序列的唯一性。
(2)为筛选出导入了重组质粒的农杆菌,应在培养基中加__________,理由是_____________。
(3)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用_____技术,即通过_____和________两个主要过程最终形成完整植株。
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某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、Bam_HI三种限制酶切割位点,同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示,请回答下列问题。
(1)在构建重组质粒时,应选用_______和________两种限制酶对_______进行切割,然后进行连接,以保证重组DNA序列的唯一性。
(2)为筛选出导入了重组质粒的农杆菌,应在培养基中加__________,理由是_____________。
(3)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用_____技术,即通过_____和________两个主要过程最终形成完整植株。
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某质粒和含抗盐基因的DNA片段上均有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制性核酸内切酶酶切位点,同时质粒上还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因(如下图)。下列相关叙述错误的是
A.SalⅠ酶切后可产生质粒-质粒、质粒-抗盐基因和抗盐基因-抗盐基因三种两两连接产物
B.用SalⅠ和HindⅢ两种限制性核酸内切酶切可保证质粒与抗盐基因的定向连接
C.用BamHⅠ和SalⅠ两种限制性核酸内切酶切得不到含目的基因的重组质粒
D.在同时添加氨苄青霉素和四环素的培养基中可筛选得到含重组质粒的受体细胞
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图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点,Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Ner表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是( )
A.图甲中的质粒用BamHⅠ切割后,含有4个游离的磷酸基团
B.在构建重组质粒时,可用PstⅠ和BamHⅠ切割质粒和外源DNA
C.用PstⅠ和HindⅢ酶切,加入DNA连接酶后可得到1种符合要求的重组质粒
D.导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长
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