研究发现，人的防御素对结核杆菌有一定的抑制作用。研究人员将人的防御素基因（HBD3）导入牛细胞，培育出对结核杆菌有一定的抗性的转HBD3基因的转基因牛，培育过程如下图所示，请分析回答。
（1）人防御素基因HBD3导入牛乳腺上皮细胞前还需在基因前加上牛乳蛋白启动子序列，目的是_______。
（2）该奶牛培育过程中涉及的技术有________________________。
（3）通常选用____________（填时期）卵母细胞作受体细胞，这个时期的卵母细胞可以从____________中直接获取。
（4）①过程常使用电脉冲等方法激活重组细胞使其完成____________。
（5）②过程中培养液成分除无机盐、有机盐、维生素、激素等营养物质外，还需特别添加____________等物质。③过程的早期胚胎一般要发育到____________阶段才进行移植。
高三生物非选择题中等难度题
研究发现，人的防御素对结核杆菌有一定的抑制作用。研究人员将人的防御素基因（HBD3）导入牛细胞，培育出对结核杆菌有一定的抗性的转HBD3基因的转基因牛，培育过程如下图所示，请分析回答。
（1）人防御素基因HBD3导入牛乳腺上皮细胞前还需在基因前加上牛乳蛋白启动子序列，目的是_______。
（2）该奶牛培育过程中涉及的技术有________________________。
（3）通常选用____________（填时期）卵母细胞作受体细胞，这个时期的卵母细胞可以从____________中直接获取。
（4）①过程常使用电脉冲等方法激活重组细胞使其完成____________。
（5）②过程中培养液成分除无机盐、有机盐、维生素、激素等营养物质外，还需特别添加____________等物质。③过程的早期胚胎一般要发育到____________阶段才进行移植。
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[生物——选修3:现代生物科技专题] 为获得Bt杀虫蛋白的转基因马铃薯，研究人员把苏云金杆菌中的Bt杀虫蛋白基因导入马铃薯体细胞，从培育出转基因马铃薯新品种。
回答下列问题：
（1）Bt杀虫蛋白基因来自苏云金杆菌。可利用苏云金杆菌细胞内合成的__________通过逆转录形成单链DNA片段，从而获得目的基因。在生物体外采用PCR技术扩增目的基因，扩增时需要加入引物，其引物是____________________。
（2）除了通过上述方法可以获取Bt杀虫蛋白基因外，还可以通过化学合成的方法获取Bt杀虫蛋白基因，其前提条件是通过Bt杀虫蛋白的__________推导出mRNA核苷酸序列，再合成该基因的脱氧核苷酸序列，这样合成的目的基因与从cDNA文库获取的目的基因相比，脱氧核苷酸序列可能不相同，原因是____________________。
（3）构建基因表达载体时，通常用同种限制性核苷酸内切酶分别切割含目的基因的DNA片段和质粒，原因是______________________________。用农杆菌转化法将基因表达载体导入植物细胞，此过程利用了Ti质粒具有__________特点。
（4）从个体生物学水平鉴定转基因马铃薯的培育是否成功，需要对转基因马铃薯进行__________________。
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苏云金杆菌是一种对昆虫有毒害作用的细菌,其杀虫活性物质主要是一类伴孢晶体蛋白。伴孢晶体蛋白经昆虫肠液消化成毒性肽,并因此导致昆虫死亡。自从培育转基因植物抗虫棉成功后，研究人员又试图将抗虫基因导入水稻细胞中，从而培养出转基因抗虫水稻。研究人员从相关生物体内提取出的部分物质或结构如下图所示：图1表示含有目的基因（抗虫基因）的DWA片段长度(bp为碱基对）和部分碱基序列，图2表示作为运载体的一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp I,BamH I,Mbo I ，Sma I 4种限制性核酸内切酶，它们所识别的碱基序列和酶切位点（用“↓”表示）分别为C ↓CGG；G ↓ GATCC；n↓ GATC；CCC ↓ GGG。请回答下列问题：
(1)若用限制酶Sma I完全切割图1中所示DNA片段，则其产物有______种，长度分别为______。
(2)若将图2中质粒和目的基因通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是______。
(3 )在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的水稻细胞，需配置相应培养基，其中添加的碳源是______，目的是提供营养和______。另外，培养基中除了含有必要营养物质、琼脂和激素外，一般还需要添加______(抗生素A/抗生素B)，该培养基从用途上看属于______培养基。
(4)在培养过程中，除必要的温度、光照和氧气等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程必须保证无菌，镊子等器械及培养基都可使用的灭菌方法是______。
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苏云金杆菌是一种对昆虫有毒害作用的细菌，其杀虫活性物质主要是一类伴孢晶体蛋白。伴孢晶体蛋白经昆虫肠液消化成毒性肽，并因此导致昆虫死亡。自从培育转基因植物抗虫棉成功后，研究者又将抗虫基因成功地导入水稻细胞中。在培育转基因植物的研究中，抗除草剂基因(har)常作为标记基因。这样培育出来的转基因水稻既能抗虫又能抗除草剂，便于田间管理。下图为获得转基因水稻的技术流程，根据下图回答：
(1) 水稻细胞的基因结构与苏云金杆菌有所不同，其主要特点是_______________ 。
(2) 获得该抗虫基因，通常采用_______方法。
(3) 研究者在进行构建重组质粒时，用到的工具酶______ 有_______、_______。
(4)培养愈伤组织的培养基中，除了含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入_______。该培养基从用途上春属于______________。
(5)种植上述转基因植物，为了避免通过花粉传递给近缘物种造成“基因污染”，所以把目的基因导入叶绿体DNA中，原因是______________
(6)水稻体内有不同类型的细胞，控制葡萄糖分解成丙酮酸过程中，所需要酶的基因最有可能是右图中的_______号基因。比较1与6或4与5，差别较大的两类细胞是_______判断依据是______________
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在现代生物工程技术中，下列研究方案与其目的相符的是 （ ）
| 选项 | 方案 | 目 的 |
| A | 将人胰岛素基因导入大肠杆菌，进行培养 | 用于生产人胰岛素 |
| B | 体外诱导胚胎干细胞分化 | 培育供移植的组织器官 |
| C | 采用药物促使普通母牛与良种母牛同期发情 | 便于将胚胎移植到普通母牛子宫内 |
| D | 用胰蛋白酶处理剪碎的动物组织块 | 制备动物细胞悬浮液 |
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资料甲：某种细菌体内有抗虫基因，该基因能指导抗虫毒蛋白的合成。我国科学家成功地将该抗虫基因导入棉花细胞中，培育出了抗虫效果好的棉花新品种。
资料乙：研究表明，抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，科学家利用小鼠制备出了抗H蛋白的单克隆抗体。
请回答下列问题：
（1）资料甲中，获取抗虫基因时可使用EcoRI，其原因是含抗虫基因的DNA片段中含有 。向棉花细胞导入抗虫基因时，我国科学家采用了 法。抗虫基因导入棉花细胞后，为确定棉花植株是否具有抗虫特性以及抗性的程度如何，需要做 实验进行个体水平的鉴定。
（2）资料乙中，选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织细胞中
（填“低表达”或“高表达”）。将H蛋白注射到小鼠体内，从该小鼠的脾脏中获得相应的B淋巴细胞，将其与骨髓瘤细胞进行融合，细胞融合利用的原理是 。与植物原生质体融合过程相比，该融合过程特有的诱导方法是 。在杂交瘤细胞的体外培养过程中，培养液中是否需要添加血清 （填“需要”或“不需要”）；培养箱中充入5% CO2的主要作是 。为避免培养过程中代谢产物对杂交瘤细胞的毒害，常采取的措施是 。
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肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。请回答：
（1）进行过程①时，需用相关酶切开载体以插入let-7基因，该酶破坏的化学键是___________。重组载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，该部位称为___________，同时，重组载体还应有___________以驱动自身复制以及___________以鉴别受体细胞是否含有目的基因。
（2）进行过程②时，当细胞生长到表面___________时，需用___________酶处理贴附在培养皿壁上的细胞并进行________________后继续培养。
（3）研究发现，let-7基因影响癌基因RAS表达的机理如图2所示。据图分析，肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中_________含量减少引起的，作出该假设的依据是_________________________。
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肺细胞中的let﹣7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌．研究人员利用基因工程技术将let﹣7基因导入肺癌细胞实验表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制．该基因工程技术基本流程如图1．
请回答：
（1）进行过程①时，需用 酶切开载体以插入let﹣7基因．载体应用RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let﹣7基因转录，该部位称为 ．
（2）进行过程②时，需用 酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养．
（3）研究发现，let﹣7基因能影响RAS的表达，其影响机理如图2．据图分析，可从细胞提取 进行分子杂交，以直接检测let﹣7基因是否转录．肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中 （RASmRNA/RAS蛋白）含量减少引起的．
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肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员在体外利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制，其影响机理如图，请回答下列问题：
（1）利用基因工程技术抑制肺癌细胞的增殖过程中，还需使用 技术。
（2）获取let-7基因后欲进行基因扩增应采用 技术，其依据的原理是 。
（3）基因表达载体构建过程中需使用的工具有 。将基因表达载体导入肺癌细胞的常用方法是 。
（4）根据图示分析，可从细胞中提取 进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中 （RASmRNA/RAS蛋白）含量减少引起的。
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肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实验表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该技术基本流程如图１。
（１）进行过程①时，需用________酶切开载体以插入let-7基因。载体应用RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为________。
（２）进行过程②时，需用________酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。
（３）研究发现，let-7基因能影响RAS的表达，其影响机理如图２。据图分析，可从细胞提取________进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是细胞中________（RASmRNA/RAS蛋白）含量减少引起的。
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