包头大靑山南坡生态修复工程中，科研人员创新运用“荒山引种、定向组培、智能育苗、高效移栽”的...

包头大靑山南坡生态修复工程中，科研人员创新运用“荒山引种、定向组培、智能育苗、高效移栽”的超旱生培育技术，极大提高了引种植物的存活率。例如科研人员将大肠杆菌中的海藻糖合成酶基因导入植物中并获得有效表达，使“工程植物”增强耐早性和耐寒性。请据资料回答下列问题：

（1）获得海藻糖合成酶基因的途径除了从该细菌中直接分离目的基因外，还可利用___________技术扩增。该技术反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物以外，还应含有___________；其中，dNTP 的作用是___________，引物应选用上图中的___________（填上图中标号）。

（2）将海藻糖合成酶基因与运栽体结合时必须用___________酶和DNA连接酶。在基因工程中作为运载体必须具备相应的条件，例如应具有___________以便进行筛选。

（3）由转基因植物细胞经过___________和___________形成胚状体和试管苗。

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石油污染会造成某些生物的大量死亡或大量增加，引起生态系统的变化。运用生物修复技术已发展成高效、低成本、环境友好的污染治理方法，该方法主要是在污染地接种经驯化的高效微生物来提高生物降解污染物的速率。图1表示驯化降解石油成分菌株S25A1的方法。图2为不同N∶P对石油降解的影响。请回答：

（1）在被污染的区域的S25A1菌能降解石油，该菌的代谢类型为________________，属于生态系统成分中的________________。

（2）研究人员用基因工程的方法增强S25A1菌株的降解能力，图中载体的化学本质为________________，除标出的抗性基因外，还应具有________________和________________的起点。

（3）实验中接种1的常用方法有________________和________________，将其接种在固体培养基中，该培养基中除了必要的营养物质外，还需要添加_______________。

（4）在接种2中使用接种环接种前，需要用________________方法对接种环灭菌处理。

（5）从图2中可以看出，________________元素含量较高时，石油能够迅速降解。该元素在菌体细胞内可参与________________、________________等细胞结构的物质组成。

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某湖泊是我国著名的风景旅游区，也是一个浅水型城市富营养化湖泊。科研人员利用沉水植物对该湖泊进行生态修复工程。

（1）该湖泊可以通过____________抵御和消除一定限度的外来干扰，保持或恢复自身结构和功能的相对稳定。

（2）下图1是湖泊生态系统中部分生物间的食物关系，若甲和丙粪便中的能量为M，呼吸作用消耗的能量为R，用于自身生长、发育和繁殖等生命活动的能量为N，则图中第二营养级的同化量可表示为_________

（3）科研人员用菹草、苦草两种沉水植物在湖泊不同处理区域进行实验，并测量水体中的总氮

（TN）、总磷（TP）、叶绿素a含量等指标，实验结果如图2、图3所示：

图2说明__________________________________________________。水样中的叶绿素a含量可以代表浮游藻类的多少，由图3可知，沉水植物可以_________ “水华”的爆发。

（4）细菌的丰富度变化可以作为评判生态修复效果的重要指标。科研人员提取不同处理区水体细菌的16s-rDNA（约1.5Kb左右，能体现不同菌属之间的差异）进行PCR，电泳结果如下图4所示：

湖泊生态系统中，大部分细菌属于生态系统中的________成分。据图4结果分析可知，种植菹草和苦草可以较好实现生态修复，证据是___________________________________。

（5）某生物被引入该湖泊后，其种群基因型频率变化如下:

通过对该物种引入前后种群基因频率的比较，该物种在引入前后是否发生进化？___判断的依据是_____________________。

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科研人员运用基因工程技术让奶牛的乳腺合成并分泌人的血清白蛋白。下列相关叙述正确的是（　　 ）

A.该技术导致转基因奶牛发生了定向变异

B.该过程所需要的目的基因可以通过逆转录的方法获得

C.该过程需把人血清白蛋白的完整基因与载体连接构建基因表达载体

D.胚胎移植前需要对含有人血清白蛋白基因的早期胚胎进行性别鉴定

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黛湖生态修复项目是依托缙云山优越的生态、景观价值，整合黛湖沿岸水系、山林与动植物资源，建设高效的“山地溪塘复合生态系统”。黛湖水体先后引入以藻类为食的某些贝类，引种芦苇、香蒲等水生植物，以及放养植食性鱼类等。经过一段时间，水体基本实现了水清、景美的治理目标。相关叙述错误的是（　　 ）

A.湖中水生生物群落的分层均直接由光照强度和光质决定

B.引种的芦苇、香蒲既可吸收水中无机盐，又能遮光抑制藻类生长繁殖

C.调查黛湖周边林地马尾松的种群密度可采用样方法

D.这一成功案例说明调整生态系统的结构是生态恢复的重要手段

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番茄的成熟、腐烂与乙烯基因表达有关。为了提高番茄的耐贮运性能，科研人员运用基因工程技术减缓乙烯的生成。

（1）以番茄_________的数据库为基础，找到乙烯生成相关的基因yx-1。采用_________技术可得到大量的yx-1基因，这个基因的表达需要_________等不可缺少的调控组件。

（2）如图所示，CRISPR-Cas9是一种新型的基因组定点编辑系统，根据yx-1的序列设计sgRNA(向导RNA),该sgRNA的序列与yx-1基因部分互补配对诱导Cas9n蛋白结合于基因的特异性位点并切割，使yx-1基因发生碱基对的_________，导致基因突变。该过程中，sgRNA和Cas9n共同剪切DNA的作用类似于_________的作用。

（3）为了验证靶向能力和编辑效率，可以选取番茄细胞用去_________除其细胞壁，得到__________，利用__________________技术培育成改良的番茄植株。

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[生物——选修1:生物技术实践]

莠去津是一种含氮的有机除草剂，在土壤中不易降解。为修复被莠去津污染的土壤，科研人员通过如图所示过程选育可高效降解莠去津的细菌（目的菌）。结合所学知识，回答下列问题：　　

（1）培养皿中的培养基比培养瓶中的培养基多添加了_________作为凝固剂，从功能上讲，这两种培养基都属于_________培养基。若过程②使用的是平板划线法，则对接种环常用的灭菌方法是________。

（2）分解莠去津的微生物属于___________（自养/异养）微生物，培养若干天后，应选择培养液中莠去津含量___________的培养瓶进行过程②。为了避免杂菌污染，接种操作需要在___________附近进行。图中培养过程重复多次的主要目的是___________。

（3）若要获得更高效分解莠去津的的微生物，常用的方法是______________________。

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组培苗在移栽前，一般需要炼苗，目的在于提高组培苗对外界环境条件的适应性。下图是不同炼苗方式组合对白兰地红枫组培苗移栽存活率的影响，以下叙述正确的是(　　)

闭盖炼苗：T1＝3d，T2＝6d，T3＝12d

开盖炼苗：t1＝1d，t2＝2d，t3＝3d

不同炼苗方式组合(T＋t)对白兰地

红枫移栽存活率的影响

A. 炼苗初期应创设与室外环境相同的条件，促使组培苗适应环境

B. 闭盖炼苗期间应控制的环境条件为：无菌、无光，并保持一定的湿度

C. 白兰地红枫组培苗的最佳炼苗方式是闭盖锻炼6d后，再开盖炼苗3d

D. 白兰地红枫组培苗的移栽存活率随着闭盖锻炼时间的增加先升高后降低

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微囊藻是形成水华的主要类群，科研人员为修复出现水华的某湿地生态系统，适量增加湿地原有的滤食鱼、沉水植物、挺水植物等生物的数量，以有效控制水华的发生，使该湿地生态系统得以修复。回答问题:

（1）在修复该湿地时，增加的沉水植物和挺水植物与微囊藻之间是　　　　 关系,从而降低微囊藻的环境容纳量。当出现水华的湿地生态系统经修复后，又慢慢恢复的过程属于　　　 演替。

（2）修复后的湿地生态系统的自我调节能力　　　　　　 (填“强于”或“弱于”)森林生态系统的自我调节能力，生态系统的自我调节能力的大小主要取决于　　　　　　　　　　　　 。

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为助力“美丽乡村”建设，科研人员对某地富营养化水体实施生态恢复，先后引入以藻类为食的某些贝类，引种芦苇、香蒲等水生植物，以及放养植食性鱼类等。经过一段时间，水体基本实现了 “水清”、“景美”、“鱼肥”的治理目标。相关叙述错误的是

A.治理前的水体不能实现自我净化说明该生态系统自我调节能力丧失

B.引种芦苇、香蒲既可吸收水中无机盐，又能遮光抑制藻类生长繁殖

C.放养植食性鱼类可使生态系统中的物质和能量更好地流向人类

D.这一成功案例说明调整生态系统的结构是生态恢复的重要手段

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