生长在太平洋西北部的一种海蜇能发出绿色荧光，这是因为海蜇细胞内有绿色荧光蛋白基因（GFP）。获得转绿色荧光蛋白基因猪的流程如下图：
（1）基因工程最常用的运载工具是________，过程④常用方法是________。常采有________技术来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上。
（2）在过程③中，用处理可将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。
（3）在过程⑥中，用________处理成年母猪以获得更多的卵母细胞。得到的卵母细胞还需要进行体外培养，目的是________。卵母细胞在进行⑦前需要进行________处理。
（4）在进行⑨之前，通过________技术可获得较多胚胎。这些胚胎能在代孕母猪
子宫中存活，其生理基础是 。⑨的优势是可以充分发挥________。
高三生物综合题简单题
生长在太平洋西北部的一种海蜇能发出绿色荧光，这是因为海蜇细胞内有绿色荧光蛋白基因（GFP）。获得转绿色荧光蛋白基因猪的流程如下图：
（1）基因工程最常用的运载工具是________，过程④常用方法是________。常采有________技术来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上。
（2）在过程③中，用处理可将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。
（3）在过程⑥中，用________处理成年母猪以获得更多的卵母细胞。得到的卵母细胞还需要进行体外培养，目的是________。卵母细胞在进行⑦前需要进行________处理。
（4）在进行⑨之前，通过________技术可获得较多胚胎。这些胚胎能在代孕母猪
子宫中存活，其生理基础是 。⑨的优势是可以充分发挥________。
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生长在太平洋西北部的一种海蜇能发出绿色荧光,这是因为该种海蜇DNA分子上有一段长度为5170个碱基对的片段——绿色荧光蛋白基因。转基因实验表明，转入了海蜇的绿色荧光蛋白基因的转基因鼠，在紫外线的照射下，也能像海蜇一样发光。这个材料说明：
①基因是DNA分子上的片段
②基因在染色体上
③基因控制特定的遗传性状
④基因控制性状的途径有两条
⑤转基因技术可以定向地改造生物的遗传性状
A．①②③ B．②③④ C．①④⑤ D．①③⑤
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绿色荧光蛋白（GFP）能在蓝光的激发下发出荧光，这样可借助GFP发出的荧光来跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。GFP基因可作为目的基因用于培育绿色荧光小鼠。请回答问题：
（1）在构建GFP基因表达载体的过程中需要用到的工具酶是________________________。
（2）将基因表达载体导入小鼠受精卵中常用的方法是_____________；受精卵在体外培养时，培养液中除了加水、无机盐、维生素、葡萄糖、氨基酸等分泌的营养成分外，往往需要特别加入_____________，同时在含5%_____________的无菌、恒温培养箱中进行培养。
（3）在胚胎移植前，通过_____________技术可获得较多的胚胎。在胚胎移植过程中，供体、受体动物选择好后，要用激素进行_____________处理，使供、受体的生理状态相同。
（4）由于荧光蛋白在自然界中不存在，所以科学家通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，该工程最终是通过设计_______________________________________序列来完成的。
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水母的体内水母素与钙离子结合时发出蓝光，被其体内GFP蛋白质吸收，改发绿色的荧光。美籍华人钱永健等三人因为绿色荧光蛋白发现和改造获得诺贝尔奖。其相关数据如图，以下说法正确的是（ ）
A. 翻译GFP蛋白时，有胸腺嘧啶和腺嘌呤的配对的过程
B. 指导GFP蛋白合成的mRNA中至少含有378个密码子
C. GFP蛋白由核糖体合成经内质网加工并由高尔基体继续加工分泌，线粒体供能
D. 据图可推测GFP蛋白含有2条肽链，该蛋白R基上的氨基有15个
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绿色荧光蛋白（GFP）能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：
（1）图中通过①、②过程形成重组质粒，需要限制酶切取目的基因、切割质粒。限制酶Ⅰ的识别序列和切点是一G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是一↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的1个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
①请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端_________________________________。
②在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端可以连接起来的原因是_________。
（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是____________________。
（3）如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是_____________________。获得的转基因猪，可以解决的医学难题是________。
（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是______________________（用序号表示）。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计
③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）
④表达出蓝色荧光蛋白
（5）若科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白与原来的蛋白相比，第222位氨基酸发生了替换，则蓝色荧光蛋白基因与原来的蛋白基因相比，至少有___________个碱基对发生变化。
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近年科学家发现绿色荧光蛋白（GFP），GFP在紫外光的照射下会发出绿色荧光。依据GFP的特性，你认为该蛋白应用价值是
A．作为标记基因，研究基因的表达
B．作为标签蛋白，研究细胞的转移
C．注入肌肉细胞，繁殖发光小白鼠
D．标记噬菌体外壳，示踪DNA路径
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某种荧光蛋白(GFP)在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白(L1)基因连接在GFP基因的5’末端，获得了Ll-GFP融合基因，并将其插入质粒P0，构建了真核表达载体Pl，其部分结构和酶切位点如下图所示，图中El～E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。回答下列问题：
(l)该团队在将Ll-GFP融合基因插入质粒P0时，使用了两种限制酶，据图推断它们是____。使用这两种酶进行酶切是为了保证____，也是为了保证____的正确连接。
(2)为获得含有LI-GFP融合基因的牛，可将能够产生绿色荧光细胞的细胞核植入牛的____中，再进行体外培养、胚胎移植等相关操作。若采用胚胎分割移植技术一次获得多头表型相同的转基因牛，在对处于囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意____。
(3)为检测Ll-GFP融合基因是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的 ___作为PCR模板。利用PCR技术进行DNA扩增时，除模板外，还必须提供的物质是 __。
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某种荧光蛋白（GFP）在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在GFP基因的5′末端，获得了L1-GFP融合基因（简称为甲），并将其插入质粒P0，构建了真核表达载体P1，其部分结构和酶切位点的示意图如下，图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。
回答下列问题：
（1）据图推断，该团队在将甲插入质粒P0时，使用了两种限制酶，这两种酶是_________。使用这两种酶进行酶切是为了保证_______________，也是为了保证__________________。
（2）将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后，若在该细胞中观察到了绿色荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了________和_________过程。
（3）为了获得含有甲的牛，该团队需要做的工作包括：将能够产生绿色荧光细胞的_____________移入牛的____________中、体外培养、胚胎移植等。
（4）为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的____________（填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”）作为PCR模板。
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某种荧光蛋白（GFP）在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在GFP基因的5′末端，获得了L1-GFP融合基因，并将其插入质粒P0，构建了真核表达载体P1，其部分结构和酶切位点如下图所示，图中E1～E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。据图回答下列问题：
（1）该团队在将L1-GFP融合基因插入质粒P0时，使用了两种限制酶，据图推断它们是____。使用这两种酶进行酶切是为了保证 ____，也是为了保证____的正确连接。
（2）若观察到了____，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了表达的过程。
（3）为获得含有L1-GFP融合基因的牛，该团队需要做的工作包括：将能够产生绿色荧光细胞的____植入牛的____中，再进行体外培养、胚胎移植等相关操作。
（4）可采用胚胎分割移植技术一次获得多头表型相同的转基因牛，在对处于囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意将____。
（5）为检测L1-GFP融合基因是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的____（填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”）作为PCR模板。
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某种荧光蛋白（GFP）在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在GFP基因的5′末端，获得了L1-GFP融合基因（简称为甲），并将其插入质粒P0，构建了真核表达载体P1，其部分结构和酶切位点的示意图如下，图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。
回答下列问题：
（1）据图推断，该团队在将甲插入质粒P0时，使用了两种限制酶，这两种酶是_________。使用这两种酶进行酶切是为了保证_______________，也是为了保证__________________。
（2）将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后，若在该细胞中观察到了绿色荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了________和_________过程。
（3）为了获得含有甲的牛，该团队需要做的工作包括：将能够产生绿色荧光细胞的_____________移入牛的____________中、体外培养、胚胎移植等。
（4）为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的____________（填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”）作为PCR模板。
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