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（14分）回答有关生物工程的问题：
（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生__末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_（相同不同）粘性末端的限制酶。
（2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是提供________特异性识别结合位点，驱动基因转录。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用___处理大肠杆菌，以利于表达载体进入：为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与__________杂交，该杂交技术称为_________。
（3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的______中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将_____插入植物细胞的染色体___上。
(4)家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。
(5)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。改PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。
(6)利用生物反应器培养家蚕细胞时，细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_________________增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。
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回答有关基因工程的问题：（9分）
（1） 构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生_ 末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_____（相同，不同）粘性末端的限制酶。
（2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用________处理大肠杆菌，以利于表达载体进入：为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的________片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为 。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成_________，常用抗原-抗体杂交技术。
（3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的 _ 中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的_________上。
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（11分）下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。
（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生_____末端。过程②必需的酶是 酶，过程③必需的酶是 酶。
（2）在利用AB获得C的过程中，必须用 切割A和B，使它们产生相同的粘性末端，再加入 ，才可形成C。利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是__ ___。
（3）为使过程⑧更易进行，可用 （药剂）处理D。
（4
）为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为___ ___。为了检测胰岛素基因请转录的mRNA是否翻译成_____，常用抗原-抗体杂交技术。（5）如果要将某目的基因通过农杆菌传话法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_____中，然后通过农杆菌转化作用将目的基因插入植物细胞的______上。
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（11分）下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。
（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生_____末端。过程②必需的酶是________ 酶，过程③必需的酶是________酶。
（2）在利用AB获得C的过程中，必须用切割A和B，使它们产生相同的粘性末端，再加入 ，才可形成C。利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是_____________。
（3）为使过程⑧更易进行，可用________（药剂）处理D。
（4）为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为______________。为了检测胰岛素基因请转录的mRNA是否翻译成_____，常用抗原-抗体杂交技术。
（5）如果要将某目的基因通过农杆菌传话法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_____中，然后通过农杆菌转化作用将目的基因插入植物细胞的______上。
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回答基因工程的有关问题：(共9分)
（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生_____末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_____（相同，不同）黏性末端的限制酶。
（2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因等，其中RNA聚合酶识别和结合的部位是_____。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用_____处理大肠杆菌，以利于表达载体进入。为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用放射性同位素标记的______ 作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为______。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成胰岛素，常用______________ 技术。
(3)如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_____中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的______上。
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(10分)回答有关基因工程的问题：
(1)构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生________末端，
也可能产生______末端。
(2)利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因、启动子、________、
和________。其中启动子的作用是________识别和结合的部位，驱动基因转录。
（3）在用表达载体转化大肠杆菌时，常用________处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；（4）为了检测胰岛素基因是否导入受体细胞，检测方法是采用技术。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成胰岛素，常用________技术。
(5)如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的 中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的________ 上。
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我国在上世纪90年代初,利用基因工程完成了人a-干扰素的合成，回答下列有关基因工程的问题:
(1)在构建基因表达栽体时，用不同的限制酶切割DNA后,可能产生黏性末端，也可能产生 末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进连接.则应选择能使二者产生 (填“相同”或“不同”）黏性末端的限制酶。
(2)利用大肠杆菌生产人a-干扰素时,构建的表达载体含有人a-干扰素基因及其启动子等,其中启动子的作用是 。在将表达载体导入大肠杆菌时,常用 处理大肠杆菌,以利于表达载体进入。
(3)为了检测人a-干扰素基因是否转录出了 mRNA.可用标记的人a-干扰素基因片段作探针与mRNA杂交,该杂交技术称为 。为了检测人a-干扰素基因转录的mRNA是否翻译成 ，常用抗原---抗体杂交技术。
(4)我国也成功地利用基因工程技术培育出了抗虫棉，将抗虫基因通过农杆菌转化法导入棉花细胞时,先要将抗虫基因插入农杆菌Ti质粒的 中，然后用该农杆菌感染棉花细胞，通过DNA重组将目的基因插入棉花细胞的 上。
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下图为获得抗除草剂转基因玉米的技术路线，请回答：
（1）构建表达载体选择限制性核酸内切酶时，要求Ti质粒内每种限制性核酸内切酶只有一个切割位点，同时要求酶切后，G基因形成的两个粘性末端序列不相同，这个过程需用______种限制酶，目的是___________。除草剂抗性基因G和Ti质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是________________________
（2）农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带_______________插入受体细胞的核DNA。若核DNA中仅插入一个G基因，自交后代含G基因的植株中，纯合子占________________。
（3）获得抗除草剂转基因玉米涉及到多次筛选，其中筛选含重组质粒的农杆菌应使用含_______________的选择培养基，使用含_______________的选择培养基筛选出转化的愈伤组织，再诱导愈伤组织再生出抗除草剂转基因玉米。
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根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
（1）限制性内切酶主要来源于生物，切割ＤＮＡ分子后产生的片段，其末端类型有 。
（2）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即
（3）反转录作用的模板是 ，若要在体外获得大量反转录产物，常采用 技术，该技术所需要的条件有模板DNA、引物、 、原料和能量等。
（4）基因工程中除质粒外， 和动植物病毒也可作为运载体。
（5）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，而是应该用 进行处理。
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下列有关基因工程技术的叙述，正确的是
A.不同的限制酶切割形成的黏性末端一定不同
B.PCR反应中周期性的温度设置是特定的，与扩增的目的基因和引物无关
C.在构建基因表达载体时通常需要大量的目的基因和载体
D.质粒上的目的基因都必须整合到受体细胞的DNA上并表达
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）为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为___