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新冠疫情爆发以来，世界各国都在积极应对，共同防疫。近期，某国科研团队首次绘制出2019-nCoV的一个关键抗原蛋白分子（记作H蛋白）的3D结构，这种蛋白为开发疫苗、制备治疗性抗体提供了依据。某科研小组以该蛋白为抗原制备了单克隆抗体，具体流程是：免疫小鼠→细胞融合→选择性培养→单克隆抗体的制备，请回答：
（1）根据研究的目的，为使小鼠产生特定的B淋巴细胞，应采取的措施是_________________________。将从免疫的小鼠中获取的B淋巴细胞与_______________________细胞按一定比例混合，并加入促融合剂__________________________，诱导细胞融合。
（2）细胞融合是随机的过程，因此需要筛选，第一次筛选是在__________________________培养基中进行培养，目的是__________________________。第二次筛选的目的是__________________________。
（3）将筛选后最终得到的细胞在__________________________做大规模培养，或_______________________内增殖。
（4）该单克隆抗体可用于制备蛋白质检测试剂盒，以检测是否感染2019-nCoV，其原理是__________________________，与血浆抗体相比，其具有的优点是_________________________。
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近期，我国湖北及世界部分地区爆发了由新型冠状病毒（2019-nCOV）引发的肺炎，这种病毒传染性极强，经科学家对分离出的病毒进行研究，确定它的具体结构如下图。下列说法正确的是（ ）
A.2019-nCOV与T2噬菌体一样，遗传物质不稳定，容易发生突变
B.刺突糖蛋白可能与宿主细胞特异性受体的识别和介导病毒进入细胞有关
C.研究发现，2019-nCOV在体外环境中可存活5天，说明它的生命活动可以离开细胞
D.2019-nCOV与细胞膜上的特定位点结合进而入侵细胞，说明细胞膜有控制物质进出的功能
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近期，我国湖北及世界部分地区爆发了由新型冠状病毒（2019-nCOV）引发的肺炎，这种病毒传染性极强，经科学家对分离出的病毒进行研究，确定它的具体结构如下图。下列说法正确的是（ ）
A.2019-nCOV与T2噬菌体一样，遗传物质不稳定，容易发生突变
B.刺突糖蛋白可能与宿主细胞特异性受体的识别和介导病毒进入细胞有关
C.研究发现，2019-nCOV在体外环境中可存活5天，说明它的生命活动可以离开细胞
D.2019-nCOV与细胞膜上的特定位点结合进而入侵细胞，说明细胞膜有控制物质进出的功能
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近期，我国湖北及世界部分地区爆发了由新型冠状病毒（2019-nCOV）引发的肺炎，这种病毒传染性极强，经科学家对分离出的病毒进行研究，确定它的具体结构如下图。下列说法正确的是（ ）
A.2019-nCOV与T2噬菌体一样，遗传物质不稳定，容易发生突变
B.刺突糖蛋白可能与宿主细胞特异性受体的识别和介导病毒进入细胞有关
C.研究发现，2019-nCOV在体外环境中可存活5天，说明它的生命活动可以离开细胞
D.2019-nCOV与细胞膜上的特定位点结合进而入侵细胞，说明细胞膜有控制物质进出的功能
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2019－nCoV病毒表面S蛋白是主要的病毒抗原，在2019－nCoV病人康复的血清中有抗S蛋白的抗体，下图是生产这种基因工程疫苗的部分流程图，有关叙述正确的是（ ）
A.步骤①构建基因表达载体需要在S基因前加起始密码子
B.大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，也可以得到大量的S蛋白
C.步骤②、步骤④常用的方法分别是感受态转化法和显微注射技术
D.原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基序列相同
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截止2020年5月，新冠病毒（2019-nCoV）已在全球210多个国家和地区蔓延传播，引发了全球性的“防疫大战”。在防疫战中，尽早确诊并及时隔离是防止新冠病毒过度传播的有效手段。在现有的检测新冠病毒的方法中，最常用的是“荧光PCR法”。其基本原理是：将新冠病毒RNA逆转录为DNA，通过采用多重荧光RT一PCR技术，以2019—nCOV的两个独立基因ORF1ab基因和N基因的保守区为靶位点设计特异性的引物和一定量的荧光标记的DNA探针，单管双检同时测定新型冠状病毒两个独立基因，消除由于病毒变异带来的漏检风险。
请回答下列问题：
（1）“荧光PCR法”所用的试剂盒中通常都应该含有：___________、___________、引物、四种脱氧核苷酸、缓冲体系。
（2）如果要成功将上述两个独立基因分别扩增出来，则在试剂盒中的引物应该有___________种，下图为“基因ORFlab”对应的cDNA片段结构示意图，则与之对应的引物结合的部位应该是图中的___________（用图中数学作答）。
（3）在检测过程中，随着PCR的进行，反应产物不断累积，“杂交双链”荧光信号的强度也等比例增加。可通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图（如图）。
①“平台期”出现的最可能原因是：______________________。
②理论上，在检测过程中，有荧光标记的“杂交双链”出现，则说明检测结果呈___________（填“阴”或“阳”）性，但为了保证检测结果的准确性，一般会设定“双链荧光强度”的阈值（如图虚线），即达到或超过阈值时才确诊。现有甲、乙两个待检样本，在检测过程中都出现了上述形态的曲线，但甲的a点比乙的a点明显左移。请给这种结果做出科学合理的解释（试剂盒合格且正常，操作过程规范且准确）：______________________。
（4）某些“阴谋论者”认为新冠病毒是“生物武器”，但这显然是不攻自破的，因为任何热爱和平的国家、组织和个人都不可能去研究这类“人类公敌”。早在1998年，中美两国元首在关于《禁止生物武器公约》议定书的联合声明中，重申：______________________。
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2019年6月17日，新华社发布《屠呦呦团队放“大招”：“青蒿素抗药性”等研究获新突破》屠呦呦团队近期提出应对“青蒿素抗药性”难题的切实可行治疗方案，并在“青蒿素治疗红斑狼疮等适应症”方面取得新进展。某课题组为得到青蒿素产量高的新品系，让青蒿素合成过程中的某一关键酶基因fps在野生青蒿中过量表达，其过程图如下：
回答下列问题：
（1）酶1是_________。利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是加热至90～95℃，目的是破坏了DNA分子中的_________键。
（2）在构建重组Ti质粒的过程中，需将目的基因插入到Ti质粒的_________中。
（3）检验目的基因是否整合到青蒿基因组，可以将放射性同位素标记的_________做成分子探针与青蒿基因组DNA杂交。理论上，与野生型相比，该探针与转基因青蒿DNA形成的杂交带的量_________（填“较多”或“较少”）。
（4）判断该课题组的研究目的是否达到，必须检测转基因青蒿植株中的_________。
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2019年底，新型冠状病毒肺炎（COVID-19）爆发，其病原体与2003年引起SARS爆发的冠状病毒相似，世界病毒学会将其定名为SARS-COV-2。目前已有累计超过450万人被确诊，死亡人数超过30万人，这一数字仍在快速增长。目前核酸检测依然是患者临床确诊和康复出院的重要依据。请回答：
（1）下图表示SARS-CoV-2病毒检测的部分流程。科学家以病毒的RNA为模板通过①_______过程合成cDNA，再对cDNA进行PCR扩增，这项技术称为RT-PCR。
（2）进行RT-PCR需要加入的酶是__________________，要从cDNA中扩增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核壳蛋白基因N关键在于要加入__________、dNTP及所需的酶一起构成反应体系。
（3）RT-PCR加入Taqman荧光探针可以通过测定荧光强度来检测产物浓度，原理如下：Taqman荧光探针为一段与_____________互补的核苷酸单链，两端分别连接一个荧光基团R和一个淬灭基团Q。探针结构完整时，R发射的荧光被Q吸收；而PCR扩增时结合在模板链上的探针被切断，使R和Q分离，R基团发射的荧光不被淬灭，这样通过对荧光信号强弱的监测就可实现对产物的检测。一个DNA经PCR技术扩增n次，需要消耗引物_________个。
（4）一次核酸检测历时需16小时，为快速检测可采用抗原-抗体杂交技术，这一技术的关键是要生产出能与新冠病毒结合的特异性抗体．请写出生产这种抗体的思路：____________________________________________________________。
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面对2019新型冠状病毒在全球的肆虐，包括我国在内的各国都在想方设法积极应对。下图为科研人员研发冠状病毒疫苗的几种技术思路。
（1）途径Ⅰ和Ⅱ都需要通过动物细胞培养获得足够数量的病毒株。在动物细胞培养中，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体条件是____________与5%二氧化碳的混合气体，二氧化碳的主要作用是____________。途径Ⅰ与途径Ⅱ相比，生产的疫苗安全性更高的是途径____________。
（2）途径Ⅲ中，过程①的操作需要____________酶。途径Ⅲ中所示技术的核心是________（用图中数字做答）。
（3）途径Ⅳ生产的DNA疫苗在动物细胞中表达引起机体免疫应答。与DNA疫苗相比，mRNA疫苗的安全性更有优势，这是因为mRNA不需要进入____________，无整合到宿主细胞染色体基因组中的风险，且易被____________水解，不会遗传给子细胞。
（4）该病毒表面蛋白A为主要抗原，由病毒的A基因控制合成，为进一步获得更符合治疗要求的单克隆抗体，科研人员对抗体结构进行精细研究，找到既不影响抗体空间结构又降低免疫反应的____________序列，通过基因工程技术对抗体结构进行人源化改造。这种人源单克隆抗体属于____________工程的产物。
（5）研究发现人体在感染新冠病毒后可引发“细胞因子风暴”（机体感染病原体后，体液中多种细胞因子迅速大量产生的现象），进而伤害正常的宿主细胞，从而造成免疫攻击行为。“细胞因子风暴”引发的免疫功能异常称为________________________。
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研究发现，肆虐全球的新型冠状病毒（2019-nCoV）为有包膜病毒，基因组为单股正链RNA，长度为29．8Kb。基于其特异性的基因组序列，科研工作者研制的新型冠状病毒核酸检测试剂盒（RT-PCR荧光探针法）为新型冠状病毒感染的肺炎疫情防控提供了快速、简便、精准的核酸检测方案。RT-PCR荧光探针法即实时荧光定量PCR技术（Real Time Quantitative PCR），通过荧光标记的特异性探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，通过仪器和相应的软件分析结果，对待测样品通过检测荧光信号的累积（以Ct值表示）来确定样本中是否有病毒核酸。新型冠状病毒检测的具体操作过程如下图。根据所学知识，请回答下列相关问题：
（1）新型冠状病毒（2019-nCoV）的相关蛋白能在宿主细胞中正常表达的理论基础是________________________________。
（2）该反应体系中，过程①需要用到___________酶，在该体系中使用TaqDNA聚合酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是_______________________。
（3）过程③使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是___________，其作用是破坏了DNA双链分子中的___，引物Ａ、Ｂ的作用是_____________。
（4）采集新冠肺炎疑似患者的咽部细胞样本提取核酸进行上述ＲＴ－PCR过程，每一个扩增出来的DNA序列，都可与预先加入的一段荧光标记探针结合，产生荧光信号，扩增出来的目的基因越多，观察到的Ct值就越_________。
（5）RNA病毒分两类，一类以自身RNA为模板直接进行RNA的复制；另一类以自身RNA为模板逆转录合成DNA，再以DNA为模板合成RNA，即逆转录病毒。请利用同位素标记法设计实验证明新型冠状病毒是否是逆转录病毒________________。（现有放射性同位素标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸及其他必要试剂，请简要写出实验思路）
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