下图表示培育二倍体转基因抗虫棉的两种设计方案，其中也EcoR I、Sma I、Sal I为限制酶（箭头所指为酶切位点）。回答下列问题：
（1）利用PCR仪对抗虫基因进行扩增，其原理是________________，需要的酶是_________________。
（2）构建基因表达载体时，为避免目的基因和质粒发生自身环化，应选择的限制酶是______________。
（3）方案I中，③指的是______________过程，④中常用的化学试剂是_____________，与方案Ⅱ相比，该方案最大的优点是___________________________。
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下图表示培育二倍体转基因抗虫棉的两种设计方案，其中也EcoR I、Sma I、Sal I为限制酶（箭头所指为酶切位点）。回答下列问题：
（1）利用PCR仪对抗虫基因进行扩增，其原理是________________，需要的酶是_________________。
（2）构建基因表达载体时，为避免目的基因和质粒发生自身环化，应选择的限制酶是______________。
（3）方案I中，③指的是______________过程，④中常用的化学试剂是_____________，与方案Ⅱ相比，该方案最大的优点是___________________________。
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转基因抗病香蕉的培育过程如图1所示，图2表示PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ和ApaⅠ四种限制酶的识别序列及酶切位点。请据图回答下列问题：
（1）在转基因抗病香蕉的培育过程，被誉为“分子运输车”的是______________。
（2）将抗病基因从含抗病基因的DNA中切割下来，使用的限制酶是______________。
（3）利用含卡那霉素的培养基可以筛选已导入重组质粒的香蕉细胞。由此推断，重组质粒中应含有___________ 基因作为标记基因。
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转基因抗病香蕉的培育过程如图1所示，图2表示PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ和ApaⅠ四种限制酶的识别序列及酶切位点。请据图回答下列问题：
（1）图中限制酶切割DNA时破坏的是两个_____________之间的化学键。
（2）在构建图1中的重组质粒时要保证目的基因被连接在质粒上特定的______ 和终止子之间才能保证目的基因在受体细胞中被成功________。
（3）将抗病基因从含抗病基因的DNA中切割下来，使用的限制酶是______________，同时也应该用相同的酶对质粒进行切割，这样处理的原因是________________________________。请写出单独用PstⅠ切割质粒后的片段：______________________________________。
（4）转基因抗病香蕉的培育是否发生了可遗传变异？______________。药物A会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，根据这一原理可以利用含药物A的培养基筛选已导入重组质粒的香蕉细胞。由此推断，重组质粒中应含有________________基因作为标记基因。
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转基因抗病香蕉的培育过程如图1所示，图2表示PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ和ApaⅠ四种限制酶的识别序列及酶切位点。请据图回答下列问题：
（1）图中限制酶切割DNA时破坏的是两个_____________之间的化学键。
（2）在构建图1中的重组质粒时要保证目的基因被连接在质粒上特定的_____________和终止子之间才能保证目的基因在受体细胞中被成功________。
（3）将抗病基因从含抗病基因的DNA中切割下来，使用的限制酶是______________，同时也应该用相同的酶对质粒进行切割，这样处理的原因是________________________________。请写出单独用PstⅠ切割质粒后的片段：______________________________________。
（4）转基因抗病香蕉的培育是否发生了可遗传变异？______________。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】
转基因抗病香蕉的培育过程如图1所示，图2表示PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ和ApaⅠ四种限制酶的识别序列及酶切位点。请据图回答下列问题：
（1）质粒的化学本质是______________。
（2）利用基因工程培育转基因抗病香蕉的核心步骤是形成重组质粒，即______________；将目的基因导入受体细胞的方法是______________。
（3）将抗病基因从含抗病基因的DNA中切割下来，使用的限制酶是______________，一个质粒被限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ同时切割后得到的DNA片段和黏性末端分别为___________个。请写出单独用ApaⅠ切割质粒后的片段：______________________。
（4）转基因抗病香蕉的培育是否发生了染色体（数目）的变异？______________。卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，根据这一原理可以利用含卡那霉素的培养基筛选已导入重组质粒的香蕉细胞。由此推断，重组质粒中应含有______________基因作为标记基因。
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（10分）．下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
| 限制酶 | BamHⅠ | HindⅢ | EcoRⅠ | SmaⅠ |
| 识别序列 及切割位点 | ↓ GGATCC CCTAGG ↑ | ↓ AAGCTT TTCGAA ↑ | ↓ GAATTC CTTAAG ↑ | ↓ CCCGGG GGGCCC ↑ |
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有____，____个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越________。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是___________
________________________________________________________________________。
(4)与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止___________________________________________________________。
(5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入________酶。
(6)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在_________________________的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。
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下表中列出几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点，请回答下列问题
| 限制酶 | BamHⅠ | Hind Ⅲ | EcoRⅠ | SmaⅠ |
| 识别序列及
| G↓GATC C C CTAG↑G | A↓AGCT T T TCGA↑A | G↓AATT C C TTAA↑G | CCC↓GGG GGG↑CCC |
(1)一个图Ⅰ所示的质粒分子经SmaⅠ切割后，含有________个游离的磷酸基因
(2)若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越________
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Sma Ⅰ切割，原因是________.
(4)与只使用EcoRⅠ相比较，使用BmaHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止。
(5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入________酶
(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了________。
(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在________的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
| 限制酶 | EcoR Ⅰ | BamH Ⅰ | Sau3AI | SmaⅠ |
| 识别序列及切割位点 |
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（1）一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割后，含有_______个游离的磷酸基团。
（2）根据限制酶识别和切割的位点，应选择_________________酶对质粒和含目的基因的外源DNA进行切割。用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能用BamH Ⅰ切割，原因是____________________________________________。
（3）通过PCR技术扩增目的基因时，加入的引物有A、B两种，引物A、B序列设计的依据是_______________________，若该目的基因扩增4代，则需要消耗引物A____________个。
（4）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶，若只考虑DNA切段两两连接，则混合物中将形成_______种环状DNA。重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了__________________________________。
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图1为某种质粒简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ、Hind Ⅲ的酶切位点。下列有关叙述错误的是
A. 如果用EcoRⅠ对外源DNA和质粒进行酶切，将多个含有目的基因的DNA片段与多个质粒的酶切产物用DNA连接酶进行连接后，两两连接所形成的产物有三种
B. 如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ酶切点有1个
C. 为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时应使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理
D. 一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团
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图1为某种质粒简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ、Hind Ⅲ的酶切位点。下列有关叙述错误的是
A. 如果用EcoRⅠ对外源DNA和质粒进行酶切，将多个含有目的基因的DNA片段与多个质粒的酶切产物用DNA连接酶进行连接后，两两连接所形成的产物有三种
B. 如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ酶切点有1个
C. 为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时应使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理
D. 一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团
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切割位点
