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日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白（GFP）等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。GFP会发出绿色荧光，该蛋白质在生物工程中有着广阔的应用前景。请据图回答相关问题：
（1）绿色荧光蛋白基因在该实验中是做为________基因。
（2）在②过程进行转基因体细胞的筛选时，比较简易的筛选方法是____________。
（3）在④过程培养重组细胞时，培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和______________等。
（4）以上培育过程中应用到的生物技术有________________________________________等。
（5）科学工作者在实验过程中为了保证实验成功，往往一次做多个核移植，为了从乙兔体
内一次获得多个卵细胞，往往需要向乙兔体内注入的是________激素。
（6）在以上③核移植过程中，乙兔提供的细胞应是_______________________，移核之前要
对此去核的原因是________。
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日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白(GFP)等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。GFP会发出绿色荧光，该蛋白质在生物工程中有着广阔的应用前景。请据图回答相关问题。
(1)绿色荧光蛋白基因在该实验中是做为________基因。
(2)在②过程进行转基因体细胞的筛选时，比较简易的筛选方法是________。
(3)在④过程培养重组细胞时，培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素________等。
(4)以上培育过程中应用到的生物技术有________等。
(5)在以上③核移植过程中，乙兔提供的细胞应是________，移核之前要对此去核的原因是________。
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美籍华人钱永健、美国的沙尔菲和日本的下村修因在研究绿色荧光蛋白（GFP）等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。GFP会发出绿色荧光，该蛋白质在生物工程中有着广阔的应用前景
。请据图回答相关问题：
（1）图中重组质粒的形成，需要用限制酶对目的基因和质粒进行剪切。如果限制酶Ⅰ的识别序列和切点（用“↓”表示）是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—
↓GATC—；在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有一个酶Ⅱ的切点。质粒和目的基因经过上述两种不同的限制酶处理后，在DNA连接酶的作用下 （填“能”或“不能”）连接成重组质粒，理由是 。
（2）在②过程中对转基因体细胞进行筛选，比较简易的方法是通过设备检测被培养的细胞 ；绿色荧光蛋白在转基因体细胞的________中合成，写出这一过程中的遗传信息传递图【解析】
_________________________________________（2分）。
（3）在③过程中培养重组细胞时，培养液中通常含有 、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
（4）在核移植过程中，供体细胞一般要选用传代到________代以内的转基因体细胞，原因是__________________________________________________________________；乙兔提供的细胞应是________________________。
（5）钱永健通过 工程技术，改变氨基酸排序，造出能吸
收并发出不同颜色光的荧光蛋白，并能让它们发光更久、更强烈。
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绿色荧光蛋白（GFP）会发出绿色荧光，该蛋白质在生物工程中有着广阔的应用前景。请据图回答相关问题。
（1）图中形成重组质粒，需要限制性内切酶，如果限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。在____________和上述两种不同限制酶的作用下，能否将质粒和目的基因连接起来?_________（填“能”或“不能”，理由是___________________________。
（2）在②过程进行转基因体细胞的筛选时，比较简易的筛选方法是通过设备检测，发出明亮的绿色荧光细胞即为转基因体细胞。绿色荧光蛋白在转基因体细胞的_______中合成，这是遗传信息的_____________（填“转录”或“翻译”）过程。
（3）实施基因工程的核心步骤是__________（填图中数字标号）。
（4）在以上③核移植过程中，供体细胞一般选用传代到______代以内的转基因体细胞，科学家通过改变氨基酸排序，造出能吸收、发出不同颜色光的荧光蛋白，并能让它们发光更久、更强烈。对荧光蛋白的改造属于___________工程。
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美籍华人钱永健和日本下村修、美国沙尔菲因等在研究绿色荧光蛋白(GFP)等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。GFP会发出绿色荧光，该蛋白质在生物工程中有着广阔的应用前景。请据图回答：
(1)过程①中获取绿色荧光蛋白基因的工具是____________，该基因在实验中是________基因。
(2)过程②形成重组质粒用到的酶是_______________________________，
过程③采用的方法是________________________。
(3)在过程④进行转基因体细胞的筛选时，比较简易的方法是
________________________________________________________________________________。
(4)在过程⑥培养重组细胞时，培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素以及____________等天然成分。
(5)以上培育过程中，④和⑤应用到的生物技术名称分别是________________、_____________。
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将水母绿色荧光蛋白（GFP）基因的片段与目的基因拼接起来组成一个融合基因，再将该融合基因构建重组质粒后转入真核生物细胞，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。下列相关叙述正确的是（ ）
A.所有生物共用一套密码子是GFP基因与目的基因能够成功拼接的原因
B.融合基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能复制
C.利用该技术可以用于追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布
D.只要改变绿色荧光蛋白基因的1个核苷酸对，就不能检测到绿色荧光
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下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：
（1）图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制酶切取目的基因、切割质粒。限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
① 画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。
②在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接？ 理由是 。
（2）以上图示中基因工程的核心是 （用序号表示）,除了目的基因和标记基因外,其上还应包括_____________和_____________。
（3）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是 。目的基因能否在受体母猪体内稳定遗传的关键是 。这需要检测才能确定，检测采用的方法是_____________。
（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是： （用数字表示）。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列
③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）
④表达出蓝色荧光蛋白
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荧光蛋白（GFP）在紫外光下会发出绿色荧光，某科研团队将GFP基因插入质粒P中构建了重组质粒载体P0，用于基因工程中基因表达载体（P1）的筛选和鉴定。部分过程如下图所示，下表为部分限制酶的识别序列及切割位点。请分析回答问题：
（1）过程①中，用EcoRV酶切割目的基因获得_________末端。
（2）过程②是利用_________技术，多次循环扩增DNA片段，经酶切产生带黏性末端的目的基因。该过程设计的引物5＇端序列必须是_________，以获得相应的黏性末端，便于P1的构建和筛选。
（3）过程③中，质粒P0需用限制酶_________切割，才能与目的基因在_________酶的作用下形成P1。
（4）为了筛选出含有质粒P1的菌落，需采用添加__________的培养基进行培养，在紫外光激发下_________（选填“发出”或“不发出”）绿色荧光的菌落，即为含有P1的菌落。
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从蓝光到紫外线都能使绿色荧光蛋白（GFP）激发，发出绿色萤光。研究人员将某病毒的外壳蛋白（L1）基因与GFP基因连接，获得了L1-GFP融合基因，并将其插入质粒PO，构建了重组质粒P1，。下图为P1部分结构和限制酶酶切位点的示意图，相关叙述正确的是（ ）
A.将L1-GFP融合基因插入质粒PO时，使用了E1、E2和E4三种限制性核酸内切酶
B.可借助基因工程、核移植技术、早期胚胎培养及胚胎移植技术获得转基因的克隆牛
C.可采用抗原-抗体杂交技术检测该融合基因是否存在于转基因牛的不同组织细胞中
D.若在某转基因牛皮肤细胞中观察到绿色荧光，则说明L1基因在该细胞中完成表达
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日本下村修、美国沙尔菲和钱永健在发现绿色荧光蛋白（GFP）等研究方面做出突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。GFP在紫外光的照射下会发出绿色荧光。依据GFP的特性，你认为该蛋白在生物工程中的应用价值是（ ）
A．作为标记基因，研究基因控制蛋白质的合成
B．作为标签蛋白，研究细胞的转移
C．注入肌肉细胞，繁殖发光小白鼠
D．标记噬菌体外壳，示踪DNA路径
。请据图回答相关问题：
↓GATC—；在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有一个酶Ⅱ的切点。质粒和目的基因经过上述两种不同的限制酶处理后，在DNA连接酶的作用下
收并发出不同颜色光的荧光蛋白，并能让它们发光更久、更强烈。