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［生物—选修3现代生物科技专题
人的内皮抑素（一种蛋白质）能诱导血管内皮细胞凋亡，进而抑制新血管的产生。临床上通过静脉注射含有内皮抑素基因的腺病毒感染肿瘤细胞，使肿瘤细胞产生并释放内皮抑素，抑制新生血管的形成，使肿瘤细胞进人休眠状态并诱导其凋亡。回答下列问题：
（1）从肝细胞中提取总mRNA,利用逆转录酶合成 ，根据内皮抑素基因的 设计并合成引物，利用PCR技术得到大量内皮抑素基因。
（2）在构建含内皮抑素基因的腺病毒并导人受体细胞的过程中，以 作为工具酶，以 作为载体。
（3）在进入临床使用前，需用体外培养的血管内皮细胞进行生理、病理检测。为获得大量的血管内皮细胞，首先用 酶处理血管内皮组织，使其分散成单个细胞，制成细胞悬液，然后将其放人含 等一些天然成分的合成培养基中培养。
（4）血管内皮细胞被重组腺病毒感染后，若通过 方法检测呈阳性并观察到细胞凋亡，则说明内皮抑素基因得到表达且具有生物学活性。
（5）临床上将含内皮抑素基因的腺病毒通过静脉注射感染肿瘤细胞，使肿瘤生长受到抑制，这种治疗方法属于 （填“体内”或“体外”）基因治疗。
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人的内皮抑素（一种蛋白质）能诱导血管内皮细胞凋亡，进而抑制新血管的产生。临床上通过静脉注射含有内皮抑素基因的腺病毒感染肿瘤细胞，使肿瘤细胞产生并释放内皮抑素，抑制新生血管的形成，使肿瘤细胞进人休眠状态并诱导其凋亡。
回答下列问题：
（1）从肝细胞中提取总mRNA,利用逆转录酶合成 ，根据内皮抑素基因的 设计并合成引物，利用PCR技术得到大量内皮抑素基因。
（2）在构建含内皮抑素基因的腺病毒并导人受体细胞的过程中，以 作为工具酶，以 作为载体。
（3）在进入临床使用前，需用体外培养的血管内皮细胞进行生理、病理检测。为获得大量的血管内皮细胞，首先用 酶处理血管内皮组织，使其分散成单个细胞，制成细胞悬液，然后将其放人含 等一些天然成分的合成培养基中培养。
（4）血管内皮细胞被重组腺病毒感染后，若通过 方法检测呈阳性并观察到细胞凋亡，则说明内皮抑素基因得到表达且具有生物学活性。
（5）临床上将含内皮抑素基因的腺病毒通过静脉注射感染肿瘤细胞，使肿瘤生长受到抑制，这种治疗方法属于 （填“体内”或“体外”）基因治疗。
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[生物——选修3：现代生物科技专题]
癌胚抗原（CEA）是某些癌细胞表面产生的一种糖蛋白，临床上通过制备CEA的单克隆抗体来诊断癌症。回答下列问题。
（1）一般不直接用单个的B淋巴细胞培养形成细胞群的办法来生产单克隆抗体。原因是______。
(2)制备CEA的单克隆抗体时，给小鼠注射的CEA相当于________，能使小鼠产生免疫反应。
（3）杂交瘤细胞的扩大培养，既可在体外培养，也可注射到小鼠_______内培养。体内培养与体外培养相比，其优点是__________________。
(4)已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得融合细胞（一般只考虑细胞两两融合），并生产单克隆抗体。请回答：
①试管中除融合的杂种细胞外，还有_________________种融合细胞。
②设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂种细胞，并说原理。
方法：用_________________的培养液培养经融合诱导后的细胞，收集能增殖的细胞。
原理：____________________________________________________________________。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】
癌胚抗原（CEA）是某些癌细胞表面产生的一种糖蛋白，临床上通过制备CEA的单克隆抗体来诊断癌症。回答下列问题：
（1）制备CEA的单克隆抗体时，首选将 注入小鼠体内，使小鼠产生免疫反应。然后从产生免疫反应小鼠脾脏中获取 细胞，将其与骨髓瘤细胞融合，该融合过程所利用的基本原理是 ，因为融合率不是100%，且融合过程具有 性，所以要对融合后的细胞进行筛选，筛选出的杂交瘤细胞还要经过多次筛选，最终获得 （答两个特点）的杂交瘤细胞。
（2）获得杂交瘤细胞后，将其注射到小鼠腹腔内增殖成 ，之后从中提取大量CEA抗体。CEA单克隆抗体具有的三个主要优点是 。
（3）CEA单克隆抗体与抗癌药物偶联后，可以使抗癌药物定向作用于癌细胞，该过程所利用的免疫学原理为 。
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(15分) [生物——选修3：现代生物科技专题]
克隆猪成功率较低，与早期胚胎细胞的异常凋亡有关。Bcl-2 基因是细胞凋亡抑制基因，用PCR 技术可以检测该基因转录水平。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。
请回答：
（1）将良种猪的组织块分散成单个细胞的过程中，一般先剪碎，然后用 处理。
（2）用_______处理以获取更多的卵母细胞，成熟的卵母细胞在核移植前需要通过显微操作进行_________处理。
（3）在培育克隆猪的过程中，由囊胚的 细胞分离获得的胚胎干细胞（ES），在形态上具有 等特点，要维持它们的增殖而不分化的状态，通常在 细胞上培养。
（4）通过 等技术可以得到“试管猪”，也可以得到“试管婴儿”。“设计试管婴儿”技术与“试管婴儿”技术的区别是
（5）在PCR 过程中可检测出cDNA 中Bcl-2 cDNA 的分子数，进而计算总mRNA 中Bcl-2 mRNA 的分子数，从而反映出Bcl-2 基因的转录水平。
①图中X 表示 过程。
②从基因组数据库中查询Bcl-2 mRNA 的核苷酸序列，以便根据这一序列设计合成 ，用于PCR 扩增。
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【选修3-现代生物科技专题】克隆良种猪成功率较低，该现象与早期胚胎细胞的异常凋亡有关。Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因，用PCR技术可检测出该基因的转录水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如下图，图中a、b、c、d分别代表流程中某过程。请回答：
（1）图中重组细胞的细胞核来自___________细胞。a过程采用的技术手段称做___________技术。
（2）b过程所用的培养液与植物组织的培养基从成分上主要区别是前者必须含有__________；c过程表示_____________。
（3）d过程需要_________酶的催化。从基因组数据库中查询Bcl-2mRNA的核苷酸序列，以便根据这一序列设计合成2种______用于PCR扩增，除此以外在PCR反应体系中还应包含的主要成分有扩增缓冲液、水、4种脱氧核苷酸、模板DNA以及____________，PCR扩增过程第一轮循环的模板是_____________。（4）若cDNA经PCR技术n次扩增后检测出中Bcl-2cDNA的分子数为 m，则总mRNA中Bcl-2mRNA的分子数为_____________，从而说明不同胚胎时期Bcl-2基因的转录水平及其与细胞凋亡的关系。
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【生物一一选修3:现代生物科技专题】基因疫苗是指编码外源性抗原的基因导入人和动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。某科研所计划利用基因疫苗，通过基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。请回答下列问题：
(1)基因表达软体的构建是基因工程的核心，一个完整的基因表达载体至少包括目的基因、_______、标记基因等。
(2)动物基因工程常用的受体细胞是___________，因为该细胞的全能性高，一般用______法将目的基因导入受体细胞。
(3)欲检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上检的方法及结果是从转基因牛中提取________，用_______杂交，如果出现杂交带，表明奶牛中出现了抗原蛋白，如果不出现杂交带，表明奶牛中未出现抗原蛋白。
(4)胚胎工程最后一道工序处胚胎移植，其实效是___________ 。
(5)为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用什么样的胚胎进行分割___________？
(6)现已经通过基因工程和胚胎工程技术培育出一头具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛，可以采用___________技术获得更多具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。
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【生物——选修3:现代生物科技专题】MagaininmⅡ是非洲爪蟾皮肤分泌的一种抗菌肽,能对细菌、真菌、肿瘤细胞等产生明显的抑制效果。科学工作者通过基因工程技术获得能表达该种抗菌肽的大肠杆菌。请回答下列问题：
(1)和抗体相比,抗菌肽的抗菌作用具有________________特点。
(2)依据抗菌肽氨基酸序列人工设计合成的 MagaininmⅡ基因能在大肠杆菌细胞中表达出相同抗菌效果的抗菌肽，其原因是 _______________。
(3)可用PCR技术对人工合成的 MagaininmⅡ基因进行扩增。请完成下表，比较细胞内DNA复制和PCR扩增DNA的异同：
DNA复制
PCR扩增DNA技术
1
解旋酶解旋
①_________
2
DNA聚合酶
②_________
3
边解旋边复制
先解旋后复制
4
半保留复制
半保留复制
(4)下图为某质粒的示意图,若目的基因插入b位点，则导入重组质粒的受体菌在含氨苄青霉素的培养基上能增殖,同时在____________。
目的基因在受体菌中表达，还需要在目的基因首端具有________________。
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【生物——选修3:现代生物科技专题】MagaininmⅡ是非洲爪蟾皮肤分泌的一种抗菌肽，能对细菌、真菌、肿瘤细胞等产生明显的抑制效果。科学工作者通过基因工程技术获得能表达该种抗菌肽的大肠杆菌。请回答下列问题：
(1)和抗体相比，抗菌肽的抗菌作用具有________________特点。
(2)MagaininmⅡ基因能与运载体能结合，是由于它们在结构上具有_____等共同点（至少回答两点）；能在大肠杆菌细胞中表达出相同抗菌效果的抗菌肽，其原因是________。
(3)用PCR技术对MagaininmⅡ基因进行扩增时, 加热至_____℃使MagaininmⅡ基因解链为单链，_________与该单链中的相应互补序列结合，然后在Taq酶的作用下进行延伸。
(4)下图为某质粒的示意图,若目的基因插入b位点，则筛选出导入重组质粒的受体菌的方法是_________________。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】（15分） 。
已知甲种农作物因受到乙种昆虫危害而减产，乙种昆虫食用某种原核生物分泌的丙种蛋白质后死亡。因此，可将丙种蛋白质基因转入到甲种农作物体内，使甲种农作物获得抗乙种昆虫危害的能力。
回答下列问题：
（1）为了获得丙中蛋白质的基因，在已知丙种蛋白质氨基酸序列的基础上，推测出丙中蛋白质的________序列，据此可利用________方法合成目的基因。获得丙中蛋白质的基因还可用________、________方法。
（2）在利用上述丙中蛋白质基因和质粒载体构建重组质粒的过程中，常需使用________
酶和________。
（3）将含有重组质粒的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共培养，筛选出含有丙种蛋白质的愈伤组织，由该愈伤组织培养成的再生植株可抵抗________的危害。
（4）若用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口，则该植株的种子
________（填“含有”或“不含”）丙种蛋白质基因。
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