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已知青蒿素衍生物Art具有抗肿瘤的作用,且随着Art浓度的增加,对海拉细胞集落形成和细胞增殖的抑制作用逐渐增强。海拉细胞在培养过程中会出现贴着培养瓶壁生长的特征,集落是指贴壁生长的单个细胞增殖6代以上形成的细胞群体,肉眼可见。海拉细胞培养后,经显色剂处理,在分光光度计上测定波长为490nm的光密度值(OD 值),计算细胞抑制率,细胞抑制率=(1-实验组OD值/对照组OD值)×100%,细胞的半数抑制率简称IC50,即为药物治疗的用药浓度。为验证Art的作用,请完善下列实验思路,预测实验结果并进行分析与讨论。

(要求与说明:细胞和集落计数、染色等具体过程不作要求,所用试剂的剂量不作要求,   营养均满足要求,各种条件适宜)

(1)完善实验思路:

① _______________________________。

②将己知细胞密度的海拉细胞悬液,用移液管加入到各个含细胞培养液的培养瓶中,并加入上述溶液,然后置于适宜的环境中培养3周。

③___________ 。

④各培养瓶用酶液处理集落使细胞分散,___________________________________________________。

⑤对所得数据进行统计与处理。

(2)预测实验结果___________(以坐标曲线图表示实验结果,要求标出IC50 的药物浓度):

(3)分析与讨论:

①Art 能使海拉细胞的集落数下降的原因之一是影响其贴壁生长,从细胞水平分析,可能的原因是_____。

②除了上述实验方法外,测量细胞数量的多少还可用的检测方法是_____________________。已知Art 也能促进海拉细胞的衰老和凋亡,细胞衰老时细胞核的特征变化为________________。

③已知细胞初始浓度为200个/5mL至800个/5mL 浓度间,上述实验对照组产生的集落数与细胞初始培养浓度呈线性关系,当细胞初始培养浓度高于800个/5mL 时出现线性关系向下偏离现象如下图所示,分析偏离线性关系的原因是____________。

高二生物实验题困难题

少年,再来一题如何?
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