为提高稻米的含铁量，科研人员通过农杆菌介导将菜豆的铁结合蛋白基因导入一个高产粳稻品种中，获得了高含铁量转基因水稻株系，培育过程如图所示。请分析并回答下列问题：
（1）植物基因工程中常将重组载体导入愈伤组织的细胞，与叶肉细胞相比，愈伤组织的细胞有_________的特点，重组载体中的标记基因的作用是___________________________。
（2）由花药经过过程①诱导出愈伤组织细胞的过程被称为_________。由愈伤组织经过过程③诱导出胚状体的过程被称为为_________。保证实验成功，图中①③过程都须在__________________条件下进行。
（3）利用花药离体培养获得单倍体幼苗，依据的生物学原理有_________和_________。
（4）为检测转基因水稻是否表达出了铁结合蛋白，可用_________进行抗原—抗体杂交实验。
高二生物非选择题困难题
为提高我国稻米的含铁量，通过农杆菌介导将菜豆的铁结合蛋白基因导入了一个高产粳稻品种中。获得了高含铁量转基因水稻株系，下图为培育过程。请分析并回答问题：
（1）获取重组载体用到的“手术刀”是_______________________。②过程用_____________法将重组载体导入愈伤组织细胞。
（2）重组载体中的标记基因的作用是________
_______________________。检测目的基因是否转录，需用_______________________________
_____作探针。
（3）图中①③④过程须在________条件下进行，培养基中除加入营养物质外，还需添加植物激素，作用是促进细胞分裂、生长、分化。
（4）过程④除了用秋水仙素或低温诱导来处理，还可以采用__________________技术，该技术常用的诱导剂是__________________。
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为提高稻米的含铁量，科研人员通过农杆菌介导将菜豆的铁结合蛋白基因导入一个高产粳稻品种中，获得了高含铁量转基因水稻株系，培育过程如图所示。请分析并回答下列问题：
（1）植物基因工程中常将重组载体导入愈伤组织的细胞，与叶肉细胞相比，愈伤组织的细胞有_________的特点，重组载体中的标记基因的作用是___________________________。
（2）由花药经过过程①诱导出愈伤组织细胞的过程被称为_________。由愈伤组织经过过程③诱导出胚状体的过程被称为为_________。保证实验成功，图中①③过程都须在__________________条件下进行。
（3）利用花药离体培养获得单倍体幼苗，依据的生物学原理有_________和_________。
（4）为检测转基因水稻是否表达出了铁结合蛋白，可用_________进行抗原—抗体杂交实验。
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为提高稻米的含铁量，科研人员通过农杆菌介导将菜豆的铁结合蛋白基因导入一个高产粳稻品种中，获得了高含铁量转基因水稻株系，培育过程如图所示。请分析并回答下列问题：
（1）植物基因工程中常将重组载体导入愈伤组织的细胞，与叶肉细胞相比，愈伤组织的细胞有_________的特点，重组载体中的标记基因的作用是___________________________。
（2）由花药经过过程①诱导出愈伤组织细胞的过程被称为_________。由愈伤组织经过过程③诱导出胚状体的过程被称为为_________。保证实验成功，图中①③过程都须在__________________条件下进行。
（3）利用花药离体培养获得单倍体幼苗，依据的生物学原理有_________和_________。
（4）为检测转基因水稻是否表达出了铁结合蛋白，可用_________进行抗原—抗体杂交实验。
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我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下面为培育转基因水稻过程示意图，请回答：
（1）在上述工程中，铁结合蛋白基因称为_________，利用PCR技术扩增铁结合蛋白基因时，需要在反应体系中添加的有机物质是铁蛋白基因、_________、___________、dNTP和PCR反应缓冲液，扩增过程在PCR扩增仪中完成。
（2）将铁结合蛋白基因导入水稻体内，需要操作的核心步骤是______________，此步骤最常用的工具是_____________________。
（3）将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得______________；培养基3与培养基2的主要区别是______________________。
（4）检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻_________________。
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鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子，广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因，构建基因表达载体，通过农杆菌介导法导入烟草，以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：
（1）步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是____。科研人员还在两种引物的一端分别加上了__________和___________序列，以便于后续的剪切和连接。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种限制酶，选择的原则是_________。
A．Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点
B．目的基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点
C．酶切后，目的基因形成的两个黏性末端序列不相同
D．酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
（2）步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有___________，步骤③中需先用______处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
（3）步骤④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过________获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是___________。
（4）用烟草花叶病毒对获得的转基因烟草和普通烟草进行接种实验，接种后第19天对照组植株进入病情指数（植物受病毒侵染的严重程度）为100的平台期，而转基因植株在第______天才进入平台期，但此时的病情指数为79。说明转基因烟草植株对病毒的侵染表现出一定的抗性，但抗性较低，可能的原因有__________。
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鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子，广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因，构建基因表达载体，通过农杆菌介导法导入烟草，以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：
（1）步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是__________的特定碱基排列顺序。科研人员还在两种引物的一端分别加上了__________和___________（填DNA序列），以便于后续的剪切和连接。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种限制酶，选择的原则是_________。
A．Ti质粒内，限制酶的切割位点应位于T-DNA内
B．目的基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点
C．酶切后，目的基因形成的两个黏性末端序列不相同
D．酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
（2）步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的元件还可以有____________，步骤③中需先用____________处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
（3）步骤④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过_________获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是①________________________②_____________________________。
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玉米含有Ppc 酶，其利用CO2的能力远远高于水稻。科技人员分离出Ppc 基因，利用农杆菌介导的转化系统将其转入水稻体内，从而提高水稻的光合效率。下列说法错误的是（ ）
A.在此过程中会用到限制性核酸内切酶、DNA 连接酶和运载体等工具
B.此技术与花药培养技术相结合，可以快速获得纯合子，缩短育种周期
C.此项技术是否成功必须测定转基因植株与对照植株同化二氧化碳的速率
D.Ppc 基因导入受精卵是此技术的关键，否则不能达到该基因在各组织细胞中都表达的目的
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我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下面为培育转基因水稻过程示意图，请回答：
(1)在上述工程中，铁结合蛋白基因称为________，获取该基因后常用________技术进行扩增。
(2)构建重组Ti质粒时，通常要用同种限制酶分别切割___________和________。将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用________处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。
(3)将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得____；培养基3与培养基2的区别是____________________________。
(4)检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻________________。
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我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻流程示意图，请回答下列问题：
(l)铁结合蛋白基因来自菜豆，且基因的脱氧核苷酸序列已知，可以用________法获得此目的基因。
(2)构建重组Ti质粒时，通常要用________分别切割________和________。
(3)将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得________ 。
(4)为研究外源基因的遗传方式，将T。代植株上收获的种子种植成T1，代株系，检测各单株的潮霉素抗性。在检测的多数T1代株系内，抗潮霉素植株与潮霉素敏感植株的比例为3：1，此结果说明外源基因的遗传符合________定律。有少数T1代株系的所有植株都表现为对潮霉素敏感，但其体内能检测到铁结合蛋白基因，造成这一结果最可能的原因是________。
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黄瓜花叶病毒（CMV）是能侵染多种植物的RNA病毒，可危害番茄的正常生长。转基因抗病毒番茄由北京大学研发，研究人员通过农杆菌介导将该病毒外壳蛋白的cDNA导入番茄植株中，通过植物组织培养技术成功获得抗CMV的番茄植株。请回答下列问题：
（1）将转基因操作后的番茄外植体接种于含有卡那霉素和青霉素的选择培养基上培养一段时间，只有部分外植体生出愈伤组织。研究人员据此确定这些生出愈伤组织的外植体都已成功导入了cDNA，你认为他们做出以上判断的理由是___________________。
（2）在植物组织培养过程中切取的番茄茎组织块要带有____________，用幼嫩茎段比成熟老枝更易产生愈伤组织，且时间早，诱导率高，原因是_______________________。在愈伤组织成长发育的过程中要进行照光培养，其作用是__________________________。
（3）科学家利用植物组织培养技术制造出了神奇的人工种子，人工种子在适宜条件下可以萌发长成幼苗，与天然种子相比能保持原有的遗传特性，其原因是_________，人工种子萌发长成的植株不一定可育，请解释其原因_____________________。
（4）请写出将含有目的基因的番茄细胞培养成一个完整植株的基本程序________（用流程图表示）。
（5）若要验证转基因番茄具有较好的抗CMV能力，请写出实验设计思路。_____________________________________
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