【生物—选修3:现代生物科技专题】黑麦草具有抗除草剂草甘麟的能力，是因为黑麦草拥有编码抗草甘麟酶的基因。科学家利用该基因.通过转基因技术获得了抗除草剂草甘磷的玉米新品种。培育新品种过程中用到了PCR技术(如图所示)，请回答下列问题:
(1)通过反转录法得到_______________文库，从中选取抗草甘磷酶的基因。该方法获得的目的基因缺少基因表达所需的调控序列，即_______________。
(2)体外获得大量编码抗草甘麟酶的基因要利用PCR技术，该技术所依据的原理为_______________，图中物质A是_______________，B酶是_______________。
(3)将目的基因导入植物细胞有多种方法，最常用的是_______________。
(4)若需要对转入抗草甘麟基因的玉米进行个体生物学水平的鉴定，需要对玉米做_____操作。
(5)若实验结果不理想，为了提高抗草甘麟酶活性，可以通过_______________工程设计和改造编码抗草甘麟酶的基因。
高三生物综合题困难题
【生物—选修3:现代生物科技专题】黑麦草具有抗除草剂草甘麟的能力，是因为黑麦草拥有编码抗草甘麟酶的基因。科学家利用该基因.通过转基因技术获得了抗除草剂草甘磷的玉米新品种。培育新品种过程中用到了PCR技术(如图所示)，请回答下列问题:
(1)通过反转录法得到_______________文库，从中选取抗草甘磷酶的基因。该方法获得的目的基因缺少基因表达所需的调控序列，即_______________。
(2)体外获得大量编码抗草甘麟酶的基因要利用PCR技术，该技术所依据的原理为_______________，图中物质A是_______________，B酶是_______________。
(3)将目的基因导入植物细胞有多种方法，最常用的是_______________。
(4)若需要对转入抗草甘麟基因的玉米进行个体生物学水平的鉴定，需要对玉米做_____操作。
(5)若实验结果不理想，为了提高抗草甘麟酶活性，可以通过_______________工程设计和改造编码抗草甘麟酶的基因。
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[生物——选修3:现代生物科技专题]黑麦草中含有拮抗除草剂草甘膦的基因，该基因编码抗草甘膦酶，从而使草甘膦失去对植物的毒害作用。2015年8月，中国科学院和北京奥瑞金种业有限公司通过转基因技术获得了抗除草剂草甘膦的玉米新品种。培育新品种过程中用到了 PCR技术（如图所示），请回答下列问题：
（1）应从__________（填“cDNA文库”或“基因组文库”）中选取拮抗除草剂草甘膦的基因，体外获得大量拮抗除草剂草甘膦基因要利用PCR技术，该技术总体上所依据的原理为__________，延伸过程中用到了酶，其中的物质A为________________。
（2）基因工程操作的核心是__________。若需要对转人拮抗草甘膦基因的玉米进行个体生物学水平的鉴定，需要对玉米做____________________实验。
（3）若实验现象不理想，为提高抗草甘膦酶活性需利用____________________工程设计和改造抗除草剂草甘膦的____________________。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】
（1）凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶。从牛胃液中分离到的凝乳酶以催化能力强而被广泛应用，研究人员运用基因工程技术，将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中。
①科学家已经测出该酶的氨基酸序列，因此可以通过____________方法来获取目的基因。获得目的基因后，常利用__________技术在体外将其大量扩增。
②构建重组DNA分子（如图所示）最好选用________限制酶，理由是_________________。
③工业化生产过程中，最初多采用重组大肠杆菌或芽孢杆菌生产凝乳酶，现多采用重组毛霉或重组的酵母菌来生产，毛霉或酵母菌作为受体细胞的优势是________________________。
④研究发现，如果将该凝乳酶20位和24位氨基酸改变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍。科学家可以生产上述高效凝乳酶的现代生物工程技术是_________________。
（2）转基因技术和细胞工程在动植物都有广泛应用，但是，胚胎工程只是指对动物的________所进行的多种显微操作和处理技术。
（3）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理（至少答三项）：______________________________________________________________________________。
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【生物一一选修3:现代生物科技专题】基因疫苗是指编码外源性抗原的基因导入人和动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。某科研所计划利用基因疫苗，通过基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。请回答下列问题：
(1)基因表达软体的构建是基因工程的核心，一个完整的基因表达载体至少包括目的基因、_______、标记基因等。
(2)动物基因工程常用的受体细胞是___________，因为该细胞的全能性高，一般用______法将目的基因导入受体细胞。
(3)欲检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上检的方法及结果是从转基因牛中提取________，用_______杂交，如果出现杂交带，表明奶牛中出现了抗原蛋白，如果不出现杂交带，表明奶牛中未出现抗原蛋白。
(4)胚胎工程最后一道工序处胚胎移植，其实效是___________ 。
(5)为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用什么样的胚胎进行分割___________？
(6)现已经通过基因工程和胚胎工程技术培育出一头具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛，可以采用___________技术获得更多具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。
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黑麦草具有抗除草剂草甘膦的能力，是因为黑麦草具有抗草甘膦基因。科学家利用该基因通过转基因技术获得了抗除草剂草甘膦的玉米新品种，回答下列问题：
（1）科研人员选择能够茁壮生长在喷洒过草甘膦溶液环境中的黑麦草，从黑麦草细胞中提取___________，通过反转录法构建_______文库，再从中选取抗草甘膦基因。该方法获得的目的基因直接导入玉米细胞中不能正常表达，其原因是__________________。
（2）将目的基因导入植物细胞有多种方法，最常用的是___________________。
（3）经研究发现该种玉米新品种抗草甘膦的能力较低，可通过_____________工程修饰或合成编码抗草甘膦的基因。
（4）种植该转基因玉米作为食物会引发公众在食物安全方面的担忧，主要是担心转基因生物会产生出___________________。
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【生物——选修三：现代生物技术专题】
荒漠齿肋赤藓具有超强耐旱能力的原因是其含有抗旱基因ScALDH21。科研人员提出两种提高棉花抗旱能力的途径，回答下列相关问题：
（1）第一条途径：利用____酶从荒漠齿肋赤藓中提取目的基因，即_____。科研将目的基因整合到Ti质粒的_____上，常利用_____法导入棉花的叶肉细胞。最后，将含目的基因的培养棉花叶肉细胞培育常转基因植株。
（2）第二条途径：可通过_____技术获得荒漠齿肋赤藓与棉花的杂种植物。在该方法中，荒漠齿肋赤藓细胞与棉花细胞融合前需用_________酶去除细胞壁，常用诱导两原生质体融合成杂种细胞的化学试剂为_____。该技术利用的主要原理是________。
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【生物-选修3：现代生物科技专题】科学家利用基因工程（DNA重组技术）成功培育出一种能够表达人类乳汁中常见蛋白的转基因水稻，使大米及其制品具有一定的抗菌作用。请回答下列相关问题：
（1）在基因工程中，常用到的工具酶是 。
（2）利用水稻的成熟叶片为材料，同时构建cDNA文库和基因组文库，两个文库相比，cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少，其原因是 。
（3）在基因表达载体中，启动子是 识别并结合的部位，导入该水稻中的基因表达载体除启动子和目的基因外，还应含有 。若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，常用的原核生物是 。
（4）将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时，常用的携带目的基因的金属颗粒有 和 粒子。
（5）由转基因水稻生产的相关大米制品有一定的抗菌作用，是因为制品中含有 。
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【生物一选修3现代生物科技专题】
艾滋病病毒（HIV)外壳的包膜上有多种蛋白质，其中包膜糖蛋白（env)基因编码gpl60蛋白，进一步加工成gpl20蛋白，具有较强的抗原性。制备抗HIV gpl20的单克隆抗体，为艾滋病的治疗带来希望。请回答下列问题：
(1)若利用动物细胞工程制备抗HIV gpl20的单克隆抗体，涉及到的技术手段主要有______________。
(2)细胞融合常用的生物诱导剂是_________。融合后需要用特定的选择性培养基筛选，只有融合的_____才能生长，这种细胞的特点是__________。
(3)若要大量制备该单克隆抗体，可将筛选出来的细胞进行体外培养，在培养液中通入一定浓度的C02，主要作用是_________________。
(4)科研人员设想用基因工程制备能表达抗HIV gpl20抗体的重组细胞，获得目的基因可利用PCR技术扩增，需要在反应体系中添加的有机物有__________、Taq酶和4种脱氧核苷酸。利用_______法将目的基因导入骨髓瘤细胞。基因工程的核心是__________________。
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[生物——选修3:现代生物科技专题]
科学家通过转入四种基因，可使体细胞形成诱导性多能干细胞（iPS细胞），iPS细胞具有胚胎干细胞的类似功能，但并不能发育成胚胎。我国科学家利用iPS细胞在世界上第一次获得完全由iPS细胞制备的活体小鼠——“小小”（流程见下图）。
（1）过程①从亲代鼠体内获得皮肤细胞后，对其进行的初次培养称为_____________，科学家向经培养的细胞导入四种基因（过程②），使其形成诱导性多能干细胞（iPS细胞）。但基因导人受体细胞没有采用显微注射的方法，你认为最可能采用的方法是用 __________________________引入。
（2）iPS细胞在体外已成功地被分化为神经元细胞、神经胶质细胞、心血管细胞和原始生殖细胞等，这说明iPS细胞在功能上具有_________________________。科学家设想在不久的将来人们可通过向人体移植iPS细胞使功能出现异常、损伤或退化的器官得以修复，它的优点是可避免器官移植后的_____________问题。
（3）我国科学家通过将iPS细胞注人四倍体囊胚再经④过程_____________技术移入代孕母鼠的子宫内继续发育，最终获得克隆鼠及其后代。诱导二倍体细胞融合形成四倍体细胞的方法有___________________等。移入的胚胎能够在受体子宫内存活发育是因为供体胚胎可与受体子宫建立____________________联系。
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（生物——选修3：现代生物科技专题）科研人员利用“基因敲除技术”敲除了新生小鼠心肌细胞中的GATA4基因，结果发现一个分泌型因子FGF16的表达水平降低，小鼠心脏丧失了再生能力，并出现了严重的心肌肥大现象。紧接着科研人员利用腺相关病毒载体AAV9，实现了在心肌细胞中“过表达”Fgfl6基因，发现心肌细胞恢复增殖能力，心肌肥大也受到一定的抑制。这项工作为心肌损伤修复和病理性心肌肥大的临床治疗提供了理论基础。请回答：
（1）“基因敲除”和“基因工程”技术所依赖的生物学原理是________________。
（2）腺相关病毒载体AAV9作为基因工程的工具，除具备普通“质粒载体”的条件外，还应具有_____________、______________（答出两点即可）的条件。
（3）目的基因与载体结合过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶。已知限制性内切酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC—。请画出目的基因被限制性内切酶I切割后所形成的黏性末端________________。DNA连接酶对所连接的两端碱基序列是否有专一性要求？________________。
（4）定性的检测目的基因的“过表达”产物可采用_____________的方法。
（5）资料说明：_____________、基因与基因产物、基因与环境之间存在着复杂的相互作用，这种相互作用形成了一个错综复杂的网络，精细地调控的生物体的性状。
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