酵母菌作为一种常见的微生物，在传统和现代生物技术中得到了广泛的应用。请回答下列问题：（1）...

酵母菌作为一种常见的微生物，在传统和现代生物技术中得到了广泛的应用。请回答下列问题：

（1）酵母菌广泛分布在自然界中，科研人员为了分离、筛选蓝莓果酒专用酵母来改善蓝霉果酒的品质，进行了如下实验：

①　 取不同品种的成熟蓝莓制果浆，置于适宜温度的恒温培养箱中自然发酵，直至产生大量气泡和明显酒味。取不同品种成熟蓝莓的原因是　　 。

②将蓝莓发酵液用　　 进行梯度稀释后，进行涂布平板操作（每个梯度3个平板），恒温培养2d，根据酵母菌菌落特征挑取单菌落。

③将挑取的单菌落扩大培养后，通过　　 法分离纯化，然后保存菌种。

④检测筛选菌株的发酵性能，根据实验结果推知，　　 （品种）对乙醇和酸的耐受性最强，是较理想的酿酒菌种。

（注：+数量表示菌落数量的多少，-表示没有菌落生长）

（2）下图是固定化酵母发酵与游离酵母制作蓝莓果酒发酵的对比结果，从图中可以看出，两者发酵速率相近，但发酵前期游离发酵比固定发酵产生的酒精量多，主要原因是　　 ；后期游离酵母发酵速度减慢，除了底物浓度降低外，还可能是因为　　 。相较于固定化酶技术，固定化酵母细胞常用的方法是　　 ，固定化酵母发酵的主要优点是　　 。

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【生物一生物技术实践】

请回答下列有关生物技术实践方面的问题：

（1）传统发酵技术应用十分广泛，果酒和果醋就是常见例子。当发酵装置由果酒酿造转为果醋酿造时，首先要提高　　　　　　　　 ，其次要注意通入　　　　　　　　　　　　 。

（2）微生物培养基通常在压力为lOOkPa,温度为　　　　　　　 ℃条件下，灭菌15至30min,然后待培养基冷却至　　　 ℃时，在酒精灯火焰附近倒平板。

（3）菊花的组织培养，一般选择　　　　　 的茎上部新萌生的侧枝；进行菊花组织培养时，一般将pH控制在　　　　　　　　　　 左右，温度控制在18℃至22℃并每天光照12h。

（4） 植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等，柑橘芳香油的制备通常使用_________法为提高出油率，需要将柑橘皮干燥去水，并用　　　　　　　　 浸泡。

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请回答下列有关生物技术实践方面的问题：

（1）传统发酵技术应用十分广泛，果酒和果醋就是常见例子。当发酵装置由果酒酿造转为果醋酿时，首先要提高_____________________，其次要注意通入_____________________________。

（2）微生物培养基通常用_________________方法进行灭菌。

（3）在对土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中，将一定稀释度的样品接种在以尿素为唯一氮源的培养基上，并在适宜的条件下培养，若根据用途划分，该培养基属于____________________（填“选择”或“鉴别”）培养基。为检测尿素分解菌的存在与否，在以尿素为唯一氮源的培养基中加入____________指示剂，如果存在尿素分解菌，则指示剂将变红色。

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生物技术在食品加工中的应用十分广泛，如果酒、果醋、腐乳、泡菜就是生活中常见的例子。如图是果酒制果醋的发酵装置，分析回答：

（1）果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌在有氧、无氧条件下都能生存，所以，它属于________微生物。

（2）如果将该装置改为酒精的发酵装置，则温度应该控制在__________。此时装置需要修改的地方是___________。果酒制果醋的反应式为___________。

（3）在果醋发酵过程中，用________证明是否有醋酸生成。

（4）葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，这样做的原因是_______，请指出用该发酵装置的一个缺点_____。

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抗菌肽在生物体内广泛存在，是生物体用来抵御外来病原体的一类小分子蛋白质。它不仅具广谱抗菌活性，而且对某些病毒、真菌、病原虫和肿瘤细胞也有抑杀作用。在科研和临床上有很大的应用价值。请回答下列问题：

（1）抗菌肽是一类免疫活性物质，是生物体中________免疫的重要组成部分。研究发现，抗菌肽可以在细菌细胞膜上穿孔而形成离子孔道，从而使细菌细胞膜丧失_____性，引起细胞内容物大量外流，最终导致细菌死亡。

（2）人们从家蚕体内提取到了抗菌肽，但提取天然抗菌肽成本高、工序繁，因而采用基因工程的方法人工合成抗菌肽。将抗菌肽基因与运载体结合导入大肠杆菌细胞中，经过筛选获得重组型大肠杆菌，然后将重组大肠杆菌接种到________培养基中在37℃条件下振荡培养一段时间后，菌体内会积累大量抗菌肽。经分离、纯化后获得人工合成的抗菌肽。

（3）为检测人工合成的家蚕抗菌肽的活性，研究人员进行了如下实验。

①首先配制适合金黄色葡萄球菌生长的培养基，将培养基用_______法处理后在酒精灯火焰附近倒平板，待平板冷却凝固后，将一定浓度的某金黄色葡萄球菌液_______在固体培养基上，然后在培养基上贴A、B、C三张无菌小纸片。

②在A处滴加含有人工合成的抗菌肽缓冲液，在B处滴加浓度相同且等量的含有________的缓冲液，在C处滴加________，培养一段时间后，测量_________推断抗菌肽抑菌活性的强弱。

③图示的实验结果说明：____________________。

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（6分）抗菌肽在生物体内广泛存在，是生物体用来抵御外来病原体的一类小分子蛋白质。它不仅具广谱抗菌活性，而且对某些病毒、真菌、病原虫和肿瘤细胞也有抑杀作用。在科研和临床上有很大的应用价值。请回答下列问题：

（1）抗菌肽是一类免疫效应因子，是生物体中________免疫的重要组成部分。研究发现，抗菌肽可以在细菌细胞膜上穿孔而形成离子孔道，从而改变细菌细胞膜的________，引起细胞内容物大量外流，最终导致细菌死亡。

（2）为检测人工合成的家蚕抗菌肽的活性，研究人员进行了如下实验。

①将一定浓度的某金黄色葡萄球菌培养液均匀涂布在固体培养基上，然后在培养基上贴A、B、C三张无菌小纸片。

②在A处滴加含有人工合成的抗菌肽缓冲液，在B处滴加浓度相同且等量的含有________的缓冲液，在C处只滴加，培养一段时间后，测量抑菌环的直径推断抗菌肽活性的强弱。

③实验结果：A、B处形成的抑菌环大小相近，说明：；

C处没有出现抑菌环，说明：。

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生物技术的广泛应用，不仅带来了较好的经济效益和社会效益，更使人们的生活变得丰富多彩．请回答下列相关问题：

（1）果酒的制作离不开酵母菌．酵母菌是　　　　 微生物，在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵，一般将温度控制在　　　　 ℃；在缺氧、　　　　 的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制．在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，反应式为 　　 　　　　

（2）醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动．当缺少糖源时，醋酸菌将　　　　 变为　　　　 ，再将　　　　 变为醋酸．

（3）毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成　　　　 和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和　　　　 ．在多种微生物的协同作用下，普通的豆腐转变成风味独特的腐乳．

（4）制作泡菜时，所用盐水煮沸，其目的是　　　　 ．为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是　　　　 ．制作泡菜的过程中会产生亚硝酸盐，亚硝酸盐在特定的条件下会转变为　　　　 ，引起生物致癌．

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（6分）有关传统发酵技术的应用，回答下列问题

（1）制作红葡萄酒、葡萄醋、泡菜和腐乳所利用的主要微生物依次分别是酵母菌、　　　 ____________、乳酸菌和　　　　 。

（2）制作红葡萄酒、葡萄醋、泡菜和腐乳所提供的最适温度依次分别是18～25℃、　　　　　 、28～30℃和15～18℃。

（3）红葡萄酒呈红色是因为红葡萄皮中的　　　　　 溶解于发酵液中所致。

（4）腌制腐乳的卤汤中的酒可选用料酒、黄酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在　　 左右，制作腐乳的豆腐块的含水量约为　　　　 。

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从古至今人们广泛利用微生物发酵进行食品加工如酿酒、制醋、腐乳加工、制作泡菜等，请回答下列相关问题。

（1）传统发酵技术经常采用野生菌种，但现代发酵工业常采用纯化的优良菌种，这样可以_______________。

（2）酿酒时，温度应该控制在____________，接种完成后要先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气，目的是_________________________。酿好的酒未密封保存好容易变酸，原因是_____________(写出反应式)。

（3）腐乳制作过程中，豆腐就是微生物的培养基，为其提供水、无机盐、生长因子、_____和______；腐乳制作过程中，加盐的作用主要是________________________________________。

（4）制作泡菜时宜选用新鲜的蔬菜或其他原料，原因是___________________；发酵过程中应定期测定亚硝酸盐的含量，测定亚硝酸盐含量的方法是________________________。

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酶和细胞的固定化技术在生产实践中已得到广泛的应用。请根据材料回答问题：

Ⅰ．某大学科研人员利用双重固定法，即采用戊二醛作交联剂(使酶相互连接)，海藻酸钠作载体来包埋小麦酯酶，研究固定化酶的性质，并对其最佳固定条件进行了探究。下图显示的是部分研究结果。(注：酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶的活性和酶的数量)

（1）从图1可以看出：固定化小麦酯酶比游离的小麦酯酶对温度变化的适应性更　　　　 。

（2）从图2可以看出：海藻酸钠浓度为　　　　 时的小麦酯酶活力最强。当海藻酸钠浓度较低时，酶活力较低的原因是　　　　 。

Ⅱ．某实验小组的同学制备固定化酵母细胞的过程如下：

①活化酵母细胞：称取定量干酵母与定量蒸馏水混合并搅拌，使酵母细胞活化；

②配制饱和氯化钙溶液：将氯化钙溶解在定量蒸馏水中，配制成一定浓度的饱和氯化钙溶液；

③配制海藻酸钠溶液：在定量的海藻酸钠中加入定量的蒸馏水，用大火加热，使其迅速溶解，配制成溶液；

④海藻酸钠溶液和酵母细胞混合：将活化的酵母细胞迅速加入到刚配制成的海藻酸钠溶液中，充分搅拌混合均匀；

⑤固定化酵母细胞：用注射器以恒定的速度缓慢地将海藻酸钠和酵母细胞混合液滴加到配制好的饱和氯化钙溶液中，观察凝胶珠形成。

（1）请你改正其中两处错误的操作：第一处是　　　　 ；第二是　　　　 。

（2）刚形成的凝胶珠要在饱和氯化钙溶液中浸泡30 min左右，目的是　　　　 。

（3）如果制作的凝胶珠颜色过浅，呈白色，则说明海藻酸钠浓度　　　　 (过低/过高)。

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