土壤农杆菌是一种能引起双子叶植物产生冠瘿瘤的土壤细菌，它带有Ti质粒。Ti质粒是携带细菌D...

土壤农杆菌是一种能引起双子叶植物产生冠瘿瘤的土壤细菌，它带有一个大的质粒叫Ti质粒（含冠瘿瘤基因），它携带细菌DNA向宿主植物基因组转化所需信息的重要片段，只有T—DNA片段才转入植物细胞的基因组。其结构及转化过程如图所示，回答相关问题

（1）若用Ti质粒作为抗旱基因的载体，为了使某种植物具有抗旱性状而又不引起植物产生冠瘿瘤，需对Ti质粒进行修饰，即　　　　　　　　 ，将抗旱基因转移至Ti质粒的　　　　　　　　 中，且要保证复制起始位点和　　　　　　　　 不被破坏。然后在一定条件下将外植体在含有　　　　　　　　 的土壤农杆菌的稀释培养基上培养，使得抗旱基因转入植物细胞并整合到植物基因组中。

（2）将上述外植体置于一个含有某种抗生素的合适培养基中进行筛选，发生转化的外植体通过　　　　　　　 形成愈伤组织，再通过　　　　　　　　 产生不定芽和体细胞胚再长出整个植物。

（3）基因转化是否成功应对转基因植物进行鉴定，如果培育成的植株能适应干旱环境，还应进行　　　　　　 水平鉴定，以确定该变异能否遗传给后代。为获得纯合的转基因植株，还需要对转基因植株进行　　　　　　 。

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（8分）土壤农杆菌是一种能引起双子叶植物产生冠瘿瘤的土壤细菌，它带有一个大的质粒叫Ti质粒(含冠瘿瘤基因)，它携带细菌DNA向宿主植物基因组转化所需信息的重要片段，只有T—DNA片段才转入植物细胞的基因组。结构及转化过程如图所示，回答相关问题：

（1）若用Ti质粒作为抗旱基因的载体，为了使某种植物具有抗旱性状而又不引起植物产生冠瘿瘤，需对Ti质粒进行修饰，即­­­­­­­▲ ，将抗旱基因转移至Ti质粒的­­­­­­­▲ 中，且要保证复制起始位点和

▲ 不被破坏。然后在一定条件下将外植体在含有▲ 的土壤农杆菌的稀释培养基上培养，使得抗旱基因转入植物细胞并整合到植物基因组中。

（2）将上述外植体置于一个含有某种抗生素的合适培养基中进行筛选，发生转化的外植体通过▲ 形成愈伤组织，再通过­­­­­­­▲ 产生不定芽和体细胞胚再长出整个植物。

（3）基因转化是否成功应对转基因植物进行鉴定，如果培育成的植株能适应干旱环境，还应进行▲ 水平鉴定，以确定该变异能否遗传给后代。为获得纯合的转基因植株，还需要对转基因植株进行严格的­­­­­­­▲ 。

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（16分）Ⅰ.（8分）土壤农杆菌是一种能引起双子叶植物产生冠瘿瘤的土壤细菌，它带有一个大的质粒叫Ti质粒，它是携带细菌DNA向宿主植物基因组转化所需信息的重要片段，只有T—DNA片段才转入植物细胞的基因组。结构及转化过程如图所示，回答相关问题：

（1）为了使某种植物具有抗旱性状而又不引起植物产生冠瘿瘤，需对Ti质粒进行修饰，即祛除瘤基因，将抗旱基因转移至________，然后在一定条件下将外植体在含土壤农杆菌的稀释培养基上培养，此时修饰的T—DNA转入植物细胞并整合到植物基因组中。以上过程需要的工具有________。

（2）将上述外植体置于一个含有某种抗生素的合适培养基中进行筛选，发生转化的外植体开始增殖，形成________________  ，通过产生不定芽再长出整个植物。

（3）基因转化是否成功应对转基因植物进行鉴定，可以直接在________水平对转基因植物与非转基因植物进行比较。

Ⅱ．（8分）请回答基因工程方面的有关问题：

(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如图所示）。

（1）图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。

①从理论上推测，第四轮循环产物中不含有引物B的DNA片段所占的比例为。

②在第________轮循环产物中首次出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。

（2）PCR反应体系中含有的DNA聚合酶具有________特点，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为________。

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（5分）土壤农杆菌是一种能引起双子叶植物产生冠瘿瘤的土壤细菌，它带有Ti质粒。Ti质粒是携带细菌DNA向宿主植物基因组转化所需信息的重要片段，其上只有T—DNA片段才能转入植物细胞的基因组。Ti质粒的结构及转化过程如图所示，请分析并回答：

（1）为了使某种植物具有抗旱性状而又不引起植物产生冠瘿瘤，需对Ti质粒进行修饰，即去除瘤基因，将抗旱基因转移至________片段，然后在一定条件下将外植体在含土壤农杆菌的稀释培养基上培养，此时修饰的T—DNA转入植物细胞并整合到植物基因组中。以上过程需要的工具酶有________。

（2）将上述外植体置于一个含有________的选择培养基中进行筛选，发生转化的外植体开始增殖，形成________后，通过产生不定芽再长出整个植物。

（3）基因转化是否成功应对转基因植物进行鉴定，可以直接在个体水平对上述转基因植物与非转基因植物的________性能进行比较。

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土壤农杆菌是一种能引起双子叶植物产生冠瘿瘤的土壤细菌，它带有Ti质粒。Ti质粒是携带细菌DNA向宿主植物基因组转化所需信息的重要片段，其上只有T—DNA片段才能转入植物细胞的基因组。Ti质粒的结构及转化过程如图所示，请分析并回答：

（1）为了使某种植物具有抗旱性状而又不引起植物产生冠瘿瘤，需对Ti质粒进行修饰，即去除瘤基因，将抗旱基因转移至　　　　 片段，然后在一定条件下将外植体在含土壤农杆菌的稀释培养基上培养，此时修饰的T—DNA转入植物细胞并整合到植物基因组中。以上过程需要的工具酶有　　　　　　　　　 。

（2）将上述外植体置于一个含有　　　　　　 的选择培养基中进行筛选，发生转化的外植体开始增殖，形成　　　　　　　　 后，通过产生不定芽再长出整个植物。

（3）基因转化是否成功应对转基因植物进行鉴定，可以直接在个体水平对上述转基因植物与非转基因植物的　　　　　　　 性能进行比较。

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土壤农杆菌含有一个大型的Ti质粒(如右图所示)，在侵染植物细胞的过程中，其中的T—DNA片段转入植物的基因组。若想用基因工程并通过土壤农杆菌向某种植物中导入抗旱基因，以下分析不合理的是

A．若用Ti质粒作为抗旱基因的载体，目的基因的插入位置应该在T—DNA片段内，且要保证复制起始点和用于转移T—DNA的基因片段不被破坏

B．将重组Ti质粒导入土壤农杆菌中时，可以用Ca²⁺处理细菌

C．用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌去感染植物细胞，可以通过植物组织培养成具有抗旱　基因的植物

D．若能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因，则说明该基因工程项目获得成功

科学家从某些能无限增殖的细胞中分离出无限增殖调控基因(prG)，该基因能激发许多动物细胞的分裂。

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土壤农杆菌含有一个大型的Ti质粒（如下图所示），在侵染植物细胞的过程中，其中的T—DNA片段转入植物的基因组。若想用基因工程并通过土壤农杆菌向某种植物中导入抗旱基因，以下分析不合理的是

A．若用Ti质粒作为抗旱基因的载体，目的基因的插入位置应该在T—DNA片段内，且要保证复制起始点和用于转移T—DNA的基因片段不被破坏

B．将重组Ti质粒导入土壤农杆菌中时，可以用Ca2+处理细菌

C．用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌去感染植物细胞，可以通过植物组织培养成具有抗旱基因的植物

D．若能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因，则说明该基因工程项目获得成功

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土壤农杆菌是基因工程中将目的基因导入植物细胞时常用的中间媒介。它含有一个大型的Ti质粒（如下图所示），在侵染植物细胞的过程中，其中的T—DNA片段转入植物的基因组。若想用基因工程并通过土壤农杆菌向某种植物中导入抗旱基因，以下分析不合理的是（    ）

A．若用Ti质粒作为抗旱基因的载体，目的基因的插入位置应该在T—DNA片段内，且要保证复制起始点和用于转移T—DNA的基因片段不被破坏

B．将重组Ti质粒导入土壤农杆菌中时，可以用CaCl₂处理细菌以增加细胞壁的通透性

C．用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌去感染正在组织培养中的植物细胞，再将被感染后的细胞培养成植株，就可能获得具有抗旱基因的植物

D．若能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因，则说明该基因工程项目获得成功

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土壤农杆菌是基因工程中将目的基因导入植物细胞时常用的中间媒介。它含有一个大型的Ti质粒（如右图所示），在侵染植物细胞的过程中，其中的T—DNA片段转入植物的基因组。若想用基因工程并通过土壤农杆菌向某种植物中导入抗旱基因，以下分析不合理的是

A．若用Ti质粒作为抗旱基因的载体，目的基因的插入位置应该在T—DNA 片段内，且要保证复制起始点和用于转移T—DNA的基因片段不被破坏

B．将重组Ti质粒导入土壤农杆菌中时，可以用CaCl₂处理细菌以增加细胞壁的通透性

C．用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌去感染正在组织培养中的植物细胞，再将被感染后的细胞培养成植株，就可能获得具有抗旱基因的植物

D．若能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因，则说明该基因工程项目获得成功

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土壤农杆菌含有一个大型的Ti质粒（如下图所示），在侵染植物细胞的过程中，其中的T—DNA片段转入植物的基因组。若想用基因工程并通过土壤农杆菌向某种植物中导入抗旱基因，以下分析不合理的是

A. 若用Ti质粒作为抗旱基因的载体，目的基因的插入位置应该在T—DNA片段内，且要保证复制起始点和用于转移T—DNA的基因片段不被破坏

B. 将重组Ti质粒导入土壤农杆菌中时，可以用Ca2+处理细菌

C. 用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌去感染植物细胞，可以通过植物组织培养成具有抗旱基因的植物

D. 若能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因，则说明该基因工程项目获得成功

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