尿素是农业生产中常用的氮肥，尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后，才能被植物吸收利用。分解...

尿素是农业生产中常用的氮肥，尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后，才能被植物吸收利用。分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素分解。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：

（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌_______（能/不能），原因是____________________________。

（2）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用____________法接种。接种前，判断培养基是否被污染，常用的方法是__________。

（3）一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，应当怎样操作才可避免此种现象。 ___________

（4）如果探究温度对脲酶活性的影响，可能对实验结果造成影响的无关变量有_________（至少答两项）。

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回答下列（一）、（二）小题

（一）尿素是一种农业上常用的高浓度氮肥，但尿素只有经土壤中某些细菌的分解后才能被植物吸收利用。某同学欲分离出土壤中能分解尿素的细菌，培养基配方如下：

（1）“无菌操作”是微生物培养的基本要求，该实验的培养基在配置时，应先对不含尿素的基本培养基进行_____________法灭菌，待冷却至60°C时，再加入经_____________的尿素溶液。

（2）土壤中能分解尿素的细菌通过____________分解尿素，该种菌对生态平衡所起的作用是___________．

（3）该同学_____________（“能”或“不能”）分离出该种菌。理由是____________。

（二）人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因羊的羊乳中获得（人染色体组成44+XX/YY,羊染色体组成40+XX/YY），流程如下：

（1）在上述基因工程中，获得htPA基因的方法最可能是_______________。基因工程的核心是_______________。

（2）图中①为体外受精，卵（母）细胞一般数量较多，是对供体母羊进行__________激素处理后采集到并培养使之成熟的，而B是经筛选过的、染色体组成为______________且达到_________状态的精子。③过程应将早期胚胎植入到代孕母羊的_________部位。

（3）下列关于胚胎工程的叙述中，错误的是（　 ）

A．体细胞核移植不属于胚胎工程研究的内容

B．图中①过程与体内受精的实质是相同的

C．图中的转基因羊也属于“试管动物”

D．胚胎工程打破了物种间远缘杂交不亲和的障碍

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请回答微生物的培养和应用的有关问题

尿素是一种重要的农业氮肥，但是，尿素并不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某研究人员尝试从土壤中对分解尿素的微生物进行分离与计数。

1.分解尿素的微生物中含有的酶是______________；为筛选出能分解尿素的微生物，配制培养基时应以______________作为唯一氮源，因此该培养基属于______________培养基。

2.该培养基在接种前应该用______________法灭菌。

3.对初步筛选得到的分解尿素的微生物进行纯化并计数，常用来统计样品中活菌数目的方法是____________________________。在接种前，随机取若干菌后的空白平板先行培养一段时间，这样做的目的是__________________________________________。

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某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。以下说法错误的是（　　 ）

A.土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶

B.能分解尿素的细菌也能以尿素的分解产物CO2作为碳源

C.为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时应选择尿素作为唯一氮源

D.筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4的作用是提供无机盐和维持pH

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）巴氏芽孢杆菌是一类具有较高脲酶活性，能够分解尿素，并广泛分布在土壤、堆肥以及污水中的兼性厌氧性细菌，它在强碱性培养液中生长良好。这种细菌能够将氮肥中的尿素分解成氨态氮被植物吸收，对土壤的肥力有着重要的作用。请回答下列问题：

(1)一般巴氏芽泡杆菌从被称作“微生物天然培养基”的　　　　　 中分离出来的,可采用　　　　　　　　　　　　 的固体选择培养基，置于　　　　　　　　　　　　 中培养。

(2)培养瓶培养一段时间后,菌体会沉入下层,为了测定菌液中的活菌数一般采用　　　　　 法接种。吸取培养瓶中菌液时要先　　　　　　 ，如果没有进行这样的处理，直接吸取进行测量，会造成结果　　　　　　 ，原因是　　　　　　　　　　　　 。（至少写出两点）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

(3)实验结果表明,巴氏芽孢杆菌培养时单位体积培养液中菌体数随时间先增加后减少。培养后期巴氏芽孢杆菌数量急剧下降的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。（至少写出两点）

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下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，正确的是（　　 ）

A.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素

B.筛选分解尿素的细菌时，应以尿素作为培养基中唯一的营养物质

C.统计菌落数应注意选择菌落数在 30-100 的平板进行计数

D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变蓝，则表明筛选到了分解尿素的细菌

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尿素是一种重要的农业氮肥。当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。下列关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的叙述，正确的是（　　 ）

A.分离分解尿素的细菌应以尿素为唯一碳源

B.尿素的分解产物使培养基pH降低而使酚红指示剂变成红色

C.实验组一平板上有56个菌落，空白对照平板上有3个菌落，则该实验组菌落数记为53

D.用平板菌落计数法对分解尿素的细菌进行计数可能比用显微镜直接计数得到的数据低

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尿素是一种重要的农业氮肥，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图筛选出能高效降解尿素的细菌，设计了“土壤中分解尿素细菌的筛选与计数实验”，过程如下图所示：

（1）在接种前，进行①〜⑤系列操作的意图是___________。据题意，每次为使菌液稀释10倍，应加入的无菌水量是___________mL。

（2）为达到实验目的，本实验所配制的培养基成分不应包括__________________（填入下列序号），原因是______________________。

①水 ②无机盐（不含氮）③NH4NO3　 ④尿素　 ⑤葡萄糖　 ⑥牛肉膏　 ⑦蛋白胨 ⑧琼脂糖

（3）在微生物培养过程中，灭菌与消毒的主要区别是灭菌能够杀死物体内外________。常用________法对玻璃器皿进行灭菌。分离和鉴定尿素分解菌时，需在培养基中加入_________指示剂，尿素分解菌的菌落周围会出现红色。

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某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。下列关于土壤中分解尿素的细菌分离和计数的相关叙述，错误的是（　　 ）

A.分解尿素的细菌是以尿素的分解产物CO2作为碳源的

B.倒平板时应将打开的培养皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上

C.培养基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定

D.若实验组菌落平均数为37个/平板，空白对照平板上有3个菌落，则本组菌落数的平 均值为34个/平板

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下列有关微生物筛选的说法正确的是

A. 分解尿素的细菌在分解尿素时，可以将尿素转化为氨，使得培养基的酸碱度降低

B. 只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素

C. 纤维素酶只包括三种组分：C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶

D. 刚果红染色法只能在培养微生物的时候加入刚果红

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