CTAB法是一种提取植物DNA的方法。CTAB是一种阳离子去污剂，能与核酸形成复合物，在高...

CTAB法是一种提取植物DNA的方法。CTAB是一种阳离子去污剂，能与核酸形成复合物，在高盐（>0.7mol/LNaCl）浓度下可溶，在低盐（0.1-0.5mol/LNaCl）浓度下，复合物就因溶解度降低而沉淀，而大部分的蛋白质及多糖等仍溶解于溶液中。通过有机溶剂抽提，去除蛋白质等杂质后，加入异丙醇获得的沉淀物为CTAB与核酸复合物，用体积分数为75%的乙醇洗涤可去除CTAB。请回答下列问题：

（1）CTAB提取液中，NaCl浓度为1.4mol/L的目的是_________。步骤4中用体积分数为75%的乙醇洗涤沉淀物的目的是去除_________。

（2）苹果组织研磨前经液氮冷冻处理，更易于研磨的原因是_________。

（3）用体积分数为75%的乙醇洗涤后的沉淀物中含有RNA，为得到较为纯净的DNA，可先用_________溶液溶解，然后加入_________酶，然后再重复步骤_________，最后在上清液中加入一定体积的、冷却的_________，可以得到纯净的DNA。

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CTAB法是一种提取植物DNA的方法。CTAB是一种阳离子去污剂，能与核酸形成复合物，在高盐（＞0．7mol/L NaCl）浓度下可溶，在低盐（0．1～0．5mol/L NaCl）浓度下复合物就因溶解度降低而沉淀，而大部分的蛋白质及多糖等仍溶解于溶液中。通过有机溶剂抽提，去除蛋白质等杂质后，加入异丙醇获得的沉淀为CTAB与核酸复合物，用体积分数为75%的乙醇洗涤可去除CTAB，具体流程如下，请回答下列问题：

（1）腊梅新鲜嫩叶在液氮中更易于研磨的原因______________，而且低温下各种物质不易被降解。

（2）过程①中，CTAB提取液中NaCl浓度为1．4mol/L，其目的是______________。

（3）氯仿-异戊醇，其密度均大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小。过程②中加入氯仿异戊醇离心后，DNA主要存在于A中，则A为______________（填上清液或沉淀物）。

（4）过程③加入异丙醇出现沉淀的主要原因是______________。

（5）过程④用体积分数为75%的乙醇洗涤后的沉淀物中含有RNA，为得到较为纯净的DNA，可先用一定浓度的NaCl溶液溶解沉淀物，然后加入______________酶，再重复步骤______________（填图中序号），最后在上清液中加入冷却的、体积分数为______________，可以得到纯净的DNA。

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（9分）CTAB法是一种从高等真核生物细胞中制备基因组DNA（总DNA）的技术。CTAB能跟核酸形成复合物，在高盐溶液(＞0.7mol/L的NaCl溶液)中可溶并且稳定存在，当降低溶液中盐的浓度(＜0.3mol/L的 NaCl溶液)，CTAB - 核酸的复合物就会因溶解度降低而沉淀，再用70% 酒精浸泡可洗脱掉CTAB；氯仿能使蛋白质发生变性而沉淀。提取和检测水稻基因组DNA的操作步骤如下：

①在50ml离心管中加入20mlCTAB抽提缓冲液（主要成分是1.4mol/L 的NaCl、2%的CTAB），于65℃水浴中预热；

②将20 g新鲜的水稻幼嫩叶片剪成小段后放于研钵中，用液氮速冻并研磨成粉末，加入上述离心管中，于65℃水浴中保温30min；

③取出离心管中，冷却至室温，加入20mL的氯仿，轻轻混匀20min；

④在室温下以 12000r/min的转速离心10-20 min；

⑤将上清液移入另一个离心管中，加入2/3体积的经冷却的异丙醇，用玻璃棒轻轻搅动，小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB - 核酸的复合物沉淀；

⑥将沉淀移入另一个离心管中，加入70%乙醇洗涤，重复洗涤1-2次；

⑦吹干乙醇后，将DNA溶于适量的TE缓冲液中，在0.8%的琼脂糖凝胶上电泳分离并在

核酸紫外检测仪上观察。

请回答下列问题：

（1）植物基因组DNA（总DNA）的提取通常采用机械研磨的方法，常温下研磨时，

植物细胞匀浆含有多种酶类对DNA的提取产生不利的影响。用液氮速冻，材料在研磨时易于破碎，同时还具有________的作用。

（2）实验步骤③ 、④的目的是________。

（3）实验步骤⑤中，玻璃棒上出现沉淀的主要原因是 。

（4）对DNA进行定性检测常用的试剂是________。琼脂糖凝胶电泳是利用待分离样品中各种分子带电性质的差异以及________、________，使带电分子产生________

而实现分离。DNA在260nm的紫外线波段有一强烈的吸收峰，利用核酸紫外检测仪可以进行________。

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DNA的粗提取与鉴定实验，本实验中有以下三次过滤，分别为了获得

（1）过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液

（2）过滤含黏稠物的0.14 mol/LNaCl溶液

（3）过滤溶解有DNA的2 mol/LNaCl溶液

A. 含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液

B. 含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、含DNA的滤液

C. 含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、纱布上的DNA

D. 含较纯的DNA滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液

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DNA粗提取与鉴定的实验中有三次过滤：

⑴过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液

⑵过滤含粘稠物的0.14mol/LNaCl溶液

⑶过滤溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液。以上三次过滤分别为了获得（    ）

A．含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液

B．含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、含DNA的滤液

C．含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、纱布上的DNA

D．含较纯的DNA滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液

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将粗提取的DNA丝状物分别加入0.14mol/LNaCl溶液、2mol/LNaCl溶液、体积分数为95%的酒精溶液中，然后用放有纱布的漏斗过滤，分别得到滤液P、Q、R以及存留在纱布上的黏稠物p、q、r，其中由于含DNA少可以丢弃的是（　　）

A. P、Q、R　　 B. p、q、r　　 C. p、Q、r　　 D. P、q、R

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将粗提取的DNA丝状物分别加入物质的量浓度为0．14mol/LNaCl溶液、物质的量浓度为2mol/LNaCl溶液、体积分数为95%的酒精溶液中，然后用放有纱布的漏斗过滤，分别得到滤液P、Q、R以及存留在纱布上的黏稠物p、q、r，其中由于含DNA少可以丢弃的是（ ）

A. P、Q、R　　 B. p、q、r

C. P、q、R　　 D. p、Q、r

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将粗提取的DNA丝状物分别加入物质的量浓度为0．14mol/LNaCl溶液、物质的量浓度为2mol/LNaCl溶液、体积分数为95%的酒精溶液中，然后用放有纱布的漏斗过滤，分别得到滤液P、Q、R以及存留在纱布上的黏稠物p、q、r，其中由于含DNA少可以丢弃的是（ ）

A.P、Q、R B.p、q、r

C.P、q、R D.p、Q、r

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将粗提取的DNA丝状物分别加入物质的量浓度为0．14mol/LNaCl溶液、物质的量浓度为2mol/LNaCl溶液、体积分数为95%的酒精溶液中，然后用放有纱布的漏斗过滤，分别得到滤液P、Q、R以及存留在纱布上的黏稠物p、q、r，其中由于含DNA少可以丢弃的是（ ）

A. P、Q、R　　 B. p、q、r

C. P、q、R　　 D. p、Q、r

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下表有关“DNA粗提取和鉴定”的相关操作中所选取的试剂，正确的是

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