科学家研究表明,新冠病毒是蛋白质包裹的单链 RNA 病毒,通过刺突蛋白(S 蛋白)与人的 ACE2 受体识别结合,来感染人的呼吸道上皮细胞。请回答下列问题:
(1)获取病毒 RNA 后,采用_____法得到其cDNA,再利用 PCR 技术扩增S 蛋白基因,扩增时用到的酶有_________。
(2)科学家利用S 蛋白作为抗原,刺激实验动物的免疫系统,以获取_____,用 于新冠病毒的检测及筛查。
(3)将重组质粒导入受体细胞后,首先要检测______, 这是目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键。检测的方法是 DNA 分子杂交技术, 即在含有目的基因的片段上用_____等做标记,以此作为探针来检测。
(4)用荧光探针检测目的基因时,先将探针与染色体共同煮沸,使 DNA 双链中_________________断裂,形成单链。随后在降温复性过程中,探针的碱基依据_____原则, 与受体细胞中特定基因序列形成较稳定的杂交分子。
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科学家研究表明,新冠病毒是蛋白质包裹的单链 RNA 病毒,通过刺突蛋白(S 蛋白)与人的 ACE2 受体识别结合,来感染人的呼吸道上皮细胞。请回答下列问题:
(1)获取病毒 RNA 后,采用_____法得到其cDNA,再利用 PCR 技术扩增S 蛋白基因,扩增时用到的酶有_________。
(2)科学家利用S 蛋白作为抗原,刺激实验动物的免疫系统,以获取_____,用 于新冠病毒的检测及筛查。
(3)将重组质粒导入受体细胞后,首先要检测______, 这是目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键。检测的方法是 DNA 分子杂交技术, 即在含有目的基因的片段上用_____等做标记,以此作为探针来检测。
(4)用荧光探针检测目的基因时,先将探针与染色体共同煮沸,使 DNA 双链中_________________断裂,形成单链。随后在降温复性过程中,探针的碱基依据_____原则, 与受体细胞中特定基因序列形成较稳定的杂交分子。
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研究表明,2019-nCoV新型冠状病毒表面的刺突蛋白(S蛋白)能识别靶细胞膜上特定受体——血管紧张素转换酶II(ACE2),并与之结合形成稳定的复合物,再通过膜融合进入宿主细胞。下列有关分析错误的是( )
A.与S蛋白特异性结合的药物可抑制病毒感染
B.新型冠状病毒的遗传物质是单链RNA,基本组成单位是核糖、磷酸和4种含氮碱基
C.新型冠状病毒通过和细胞膜上的结合位点ACE2结合入侵细胞,这说明细胞膜控制物质进出的功能是相对的
D.新型冠状病毒没有细胞结构,只能寄生于活细胞中,说明生命活动离不开细胞
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阅读材料并回答问题:
新型冠状病毒SARS-CoV-2是一种单股正链RNA病毒。病毒结构由外部的囊膜和内部的核心组成。囊膜是脂双层结构,来自宿主细胞,脂质上镶嵌有病毒编码的蛋白质,其中刺突蛋白(S蛋白)是病毒的主要抗原,是决定病毒毒力的关键因素。刺突蛋白(S蛋白)能与人类细胞膜上的受体ACE2蛋白结合,进而介导病毒侵入宿主细胞,ACE2蛋白广泛分布在人体内皮细胞膜上,因此SARS-CoV-2可以入侵肺泡细胞、肾细胞、生殖道细胞等内皮细胞。虽然入侵的细胞广泛,但是严重的炎症反应主要出现在肺部,故引发新型冠状病毒肺炎。在某些病人体内,可能会出现细胞因子风暴,即在机体免疫应答时,免疫细胞分泌的细胞因子会活化更多免疫细胞,进而产生更多细胞因子,最终导致机体免疫反应过度,开始对正常细胞发动攻击。
(1)HIV病毒也具有囊膜,据此可判断HIV病毒和SARS-CoV-2病毒可以在吸附后通过______方式进入宿主细胞。但两种病毒侵染的宿主细胞不同,原因是________。
(2)大多数情况下SARS-CoV-2感染会引发类似感冒的症状,轻症患者大约1-2周即可治愈,这与人类的免疫系统功能密切相关。病毒进入人体后首先被吞噬细胞吞噬、处理和呈递,之后B细胞增殖、分化成___________________(后者产生特异性抗体),抗体与病毒结合,并在吞噬细胞的作用下被清除。进入肺泡细胞的病毒,也往往难逃细胞免疫,这时需要________细胞识别并使靶细胞裂解死亡。
(3)根据材料,细胞因子可能包括T细胞产生的___________;为抑制细胞因子风暴,临床上经常会使用到________________(填“免疫抑制剂”或“免疫增强剂”)。
(4)通常我们可以利用S蛋白制作疫苗来预防新冠。但是疫苗有可能失效,你认为最可能的原因是_______________________________。
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新型冠状病毒肺炎是由新冠病毒(SARS-CoV-2)感染导致的肺部感染。研究表明,新冠病毒主要通过S蛋白与受体ACE2结合侵染人体细胞。下列叙述正确的是( )
A.在人体的肺部细胞膜中存在与S蛋白特异性结合的ACE2受体
B.巨噬细胞吞噬SARS-CoV-2后,在细胞表面合成抗原-MHC复合体
C.体液中的SARS-CoV-2与相应抗体结合后,仍保留侵入宿主细胞的能力
D.注射康复者的血清可以治疗重症新冠肺炎患者,此方式属于主动免疫
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新型冠状病毒刺突蛋白(spike)位于病毒囊膜表面,是已知最大的病毒表面蛋白。病毒通过刺突蛋白与宿主细胞受体结合进而进入宿主细胞。下列相关叙述,合理的是( )
A.刺突蛋白在病毒的核糖体中合成
B.用于消毒的医用酒精可以使病毒表面蛋白脱水变性,从而使病毒失活
C.病毒通过囊膜与细胞膜融合后以主动运输方式进入宿主细胞
D.只有人细胞膜上才有新型冠状病毒的受体,所以它只感染人类
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疫苗是终结病毒肆虐的有利武器,新冠病毒COVID-19主要通过其表面刺突蛋白与人体细胞膜上的ACE2蛋白结合实现感染。分析以下三种针对新冠病毒的疫苗和 抗体研发方法,回答相关问题。
方法 | 技术路线 |
腺病毒载体重组疫苗 | 刺突蛋白基因→腺病毒基因表达载体→人体 |
基因工程疫苗 | 刺突蛋白基因→基因表达载体→大肠杆菌→刺突蛋白→ 人体 |
单克隆抗体 | 免疫小鼠的B淋巴细胞+骨髓瘤细胞→杂交瘤细胞→单克隆抗体 |
(1)腺病毒载体重组疫苗是将刺突蛋白基因重组到改造后无害的腺病毒内,导入人体,在 体内产生刺突蛋白,刺激人体产生抗体。改造后的腺病毒载体应具备的条件是________(答岀两点)。与基因工程疫苗相比,腺病毒载体重组疫苗的优点体现在__________ 。
(2)疫情早期,由于缺乏特异性治疗感染的有效手段,血浆疗法成为治疗部分重症、危重 型患者的一丝希望。但康复患者的血浆抗体存在__________的缺点,使单克隆抗体药物 成为重要的研发方向。研究人员从小鼠的__________中提取免疫的B淋巴细胞,通过生物诱导剂__________使其与骨髓瘤细胞融合,融合成功的杂交瘤细胞还需要进行克隆化培养和__________,经多次筛选,才可以获得能分泌所需抗体的细胞。
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新型冠状病毒(2019-nCoV)是一种包膜病毒。这层包膜主要来源于宿主细胞膜,还含有病毒白身的糖蛋白。研究发现2019-nCoV的糖蛋白S可与人体细胞表面受体蛋白ACE2结合,从而使病毒识别并侵入其宿主细胞下列相关说法正确的是( )
A.2019-nCoV可不断增殖,说明病毒是生命活动的基本单位
B.病毒外包膜的主要成分为磷脂和蛋白质,其与肺炎双球菌的荚膜成分相似
C.糖蛋白S与受体蛋白ACE2结合过程体现了细胞膜可以进行细胞间的信息交流
D.经高温处理的2019-nCoV变性蛋白质仍可与双缩脲试剂发生颜色反应
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今年年初,爆发了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明,新型冠状病毒通过其表面的S-蛋白与人细胞膜上的ACE2相互识别,感染人的呼吸道上皮细胞。请分析回答问题:
(1)新型冠状病毒表面的S-蛋白作为_________剌激淋巴细胞,使机体产生_________性免疫反应,人细胞膜上的ACE2的化学本质是_________。
(2)感染病毒后,免疫系统对肺细胞强烈攻击引发肺炎,此时可通过适度使用_________对病人进行治疗,使其免疫功能下降,以避免肺部严重受损。
(3)科学家采集了感染新型冠状病毒并已康复的甲、乙两人的血液,检测相关抗体的水平,结果如图1。据此分析,应选取_________的B淋巴细胞用以制备单克隆抗体(单抗)。
(4)将制备的多种单抗分别与病毒混合,然后检测病毒对宿主细胞的感染率,结果如图2。据此分析,对病毒抑制效果最好的单抗是__________号。
(5)患者康复后一段时间,若再次受到该病毒的攻击,机体内相应的__________细胞迅速增殖分化,产生大量的浆细胞和效应T细胞。
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诺如病毒是一种单链 RNA 病毒,可引起流行性急性肠胃炎的重要病原体。诺如病毒衣壳 P 蛋白上含有抗原位点和受体识别位点,在体外可单独表达,被用于疫苗的免疫实验研究。
(1)人体感染诺如病毒后,会引发_____免疫,在康复者血清中能够检测到_____(物质)。有研究表明感染后第 180 天记忆 B 细胞仍具有持久性,说明这些细胞对机体具有_____作用。
(2)研究人员希望借 P 蛋白治疗由β蛋白沉积导致的阿尔茨海默症,选取β蛋白作为免疫原,利用诺如病毒 P 颗粒作为疫苗载体,研究其免疫原性。研究人员将β蛋白基因插入 P 蛋白基因的恰当位置,制备了重组 P 蛋白基因 P-β(1780bp)后,采用双酶切方法,通过 NdeⅠ和XhoⅠ酶和pET 载体质粒(5230bp)构建重组质粒 pET-P-β,如图 1。对照组应选用_____________。
①诺如病毒 RNA②P 蛋白基因与 pET 载体质粒构建的重组质粒 pET-P ③pET 载体质粒
(3)为了鉴定重组质粒 pET-P-β是否构建成功,NdeⅠ和 XhoⅠ酶分别对重组质粒 pET-P-β 和 pET 载体质粒进行酶切,然后酶切片段和重组 P 蛋白基因进行电泳,重组 P 蛋白基因的电泳结果出现一条带,位置是 1780bp,请将你判断 pET 载体质粒的电泳结果位置是_____bp, 重组质粒 pET-P-β的电泳结果出现_____条带,位置是_____。
(4)想要获得目的蛋白,需要将构建的重组质粒 pET-P-β、pET-P 和 pET 分别转入用_____ 处理的成为感受态的大肠杆菌细胞,培养处理后提取蛋白质。过程如下:
若干健康小鼠随机分为 3 组,将提取的蛋白质分别溶于 PBS 缓冲液,对小鼠进行皮下免疫, 并对 4 次免疫后的血清进行不同梯度稀释,用_____(β蛋白/P 蛋白)作为抗原,通过免疫法检测重组 P-β蛋白的免疫原性。如图 2 所示,请据图描述出能够表明 P-β蛋白可以在小鼠体内引起免疫反应,具有特异的免疫原性的实验结果_________
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已知诺如病毒是一种单链RNA病毒,T细胞和B细胞通过抗原受体(细胞膜上能特异性识别抗原的蛋白质)来识别抗原。下列关于该病毒的遗传特性及侵入人体后的免疫应答的叙述,不正确的是
A.诺如病毒基因组变异率高,难以研制疫苗进行免疫预防
B.诺如病毒侵入人体后需经抗原受体识别后方能引起特异性免疫应答反应
C.侵入人体细胞内的诺如病毒只有在效应T细胞的参与下才能清除
D.浆细胞既能合成分泌抗原受体,也能合成分泌相应的抗体
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