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诺如病毒是一种单链 RNA  病毒,可引起流行性急性肠胃炎的重要病原体。诺如病毒衣壳 P 蛋白上含有抗原位点和受体识别位点,在体外可单独表达,被用于疫苗的免疫实验研究。

(1)人体感染诺如病毒后,会引发_____免疫,在康复者血清中能够检测到_____(物质)。有研究表明感染后第 180 天记忆 B 细胞仍具有持久性,说明这些细胞对机体具有_____作用。

(2)研究人员希望借 P 蛋白治疗由β蛋白沉积导致的阿尔茨海默症,选取β蛋白作为免疫原,利用诺如病毒 P 颗粒作为疫苗载体,研究其免疫原性。研究人员将β蛋白基因插入 P 蛋白基因的恰当位置,制备了重组 P 蛋白基因 P-β(1780bp)后,采用双酶切方法,通过 NdeⅠ和XhoⅠ酶和pET 载体质粒(5230bp)构建重组质粒 pET-P-β,如图 1。对照组应选用_____________。

①诺如病毒 RNA②P 蛋白基因与 pET 载体质粒构建的重组质粒 pET-P ③pET 载体质粒

(3)为了鉴定重组质粒 pET-P-β是否构建成功,NdeⅠ和 XhoⅠ酶分别对重组质粒 pET-P-β 和 pET 载体质粒进行酶切,然后酶切片段和重组 P 蛋白基因进行电泳,重组 P 蛋白基因的电泳结果出现一条带,位置是 1780bp,请将你判断 pET 载体质粒的电泳结果位置是_____bp, 重组质粒 pET-P-β的电泳结果出现_____条带,位置是_____。

(4)想要获得目的蛋白,需要将构建的重组质粒 pET-P-β、pET-P 和 pET 分别转入用_____ 处理的成为感受态的大肠杆菌细胞,培养处理后提取蛋白质。过程如下:

若干健康小鼠随机分为 3 组,将提取的蛋白质分别溶于 PBS 缓冲液,对小鼠进行皮下免疫, 并对 4 次免疫后的血清进行不同梯度稀释,用_____(β蛋白/P 蛋白)作为抗原,通过免疫法检测重组 P-β蛋白的免疫原性。如图 2 所示,请据图描述出能够表明 P-β蛋白可以在小鼠体内引起免疫反应,具有特异的免疫原性的实验结果_________

高二生物综合题困难题

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