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【选修3：现代生物科技专题】动物乳腺生物反应器是一项利用转基因动物的乳腺代替传统的生物发酵，进行大规模生产可供治疗人类疾病或用于保健的活性蛋白质的现代生物技术。目前科学家已在牛和羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要药品。大致过程如图所示：
（1）在过程③中需要用到的工具酶有__________________。要使人的药用蛋白基因在奶牛乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、_________________、标记基因等部分。
（2）要实现超数排卵，应在性成熟雌牛发情周期的某一阶段用____________处理。通过①采集的精子不能直接使成熟的卵子受精，原因是____________。
（3）将获得的重组细胞培养成早期胚胎后，移植到经过____________处理的受体母牛子宫内。因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全搞清楚，所以，在早期胚胎的培养基中，往往还需要添加____________。
（4）若要一次获得多只完全相同的转基因牛，应采用胚胎分割移植技术。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意将____________均等分割。胚胎分割移植后发育成小牛，这些小牛的基因型____________（填“相同”或“不同”）。
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（2015秋•番禺区校级月考）动物乳腺生物反应器是一项利用转基因动物的乳腺代替传统的生物发酵，进行大规模生产可供治疗人类疾病或用于保健的活性蛋白质的现代生物技术．目前科学家已在牛和羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要药品．大致过程如图所示：
（1）在过程③中需要用到的工具酶有 ．要使人的药用蛋白基因在奶牛乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、 、标记基因等部分．
（2）要实现超数排卵，应在性成熟雌牛发情周期的某一阶段用 处理．通过①采集的精子不能直接使成熟的卵子受精，原因是 ．
（3）将获得的重组细胞培养成早期胚胎后，移植到经过 处理的受体母牛子宫内．因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全搞清楚，所以，在早期胚胎的培养基中，往往还需要添加 ．
（4）若要一次获得多只完全相同的转基因牛，应采用胚胎分割移植技术．在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意将 均等分割．胚胎分割移植后发育成小牛，这些小牛的基因型 （填“相同”或“不同”）．
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动物乳腺生物反应器是一项利用转基因动物的乳腺代替传统的生物发酵，进行大规模生产可供治疗人类疾病或用于保健的活性蛋白质的现代生物技术。目前科学家已在牛和羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要药品。大致过程如图所示：
(1)在过程③中需要用到的工具酶有 。要使人的药用蛋白基因在奶牛乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、 、标记基因等部分。
(2)要实现超数排卵，应在性成熟雌牛发情周期的某一阶段用 处理。通过①采集的精子不能直接使成熟的卵子受精，原因是 。
(3)将获得的重组细胞培养成早期胚胎后，移植到经过 处理的受体母牛子宫内。因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全搞清楚，所以，在早期胚胎的培养基中，往往还需要添加 。
(4)若要一次获得多只完全相同的转基因牛，应采用胚胎分割移植技术。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意将 均等分割。胚胎分割移植后发育成小牛，这些小牛的基因型 (填“相同”或“不同”)。
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（题文）（生物一选修3现代生物科技专题）
胰岛素是治疗人类糖尿病的重要药物。科研人员利用基因工程构建生物反应器，大量生产胰岛素。请回答下列问题。
（1）利用基因工程构建生物反应器，首先要获得胰岛素基因，在体外大量扩增胰岛素基因的方法是__________，前提是_________________________________。
（2）在构建基因表达载体过程中，先用双酶切割含目的基因的DNA片段和载体，优点是______________，然后用___________酶对目的基因和载体进行连接。
（3）构建生物反应器时一般选择受精卵作为受体细胞，原因是______________________。
（4）将基因表达载体导入受精卵的方法是___________，待受精卵发育至___________阶段进行移植，为获得基因型相同的后代，可采取______________________技术。
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动物乳腺生物反应器是20世纪90年代出现的技术。利用转基因动物的乳房作为生物发酵工厂，大规模生产某些急需的活性物质或药用蛋白。以下是生产人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的流程。BamHI、 HindII 、Sma I直线所示为三种限制酶的酶切位点。
（1）上图中载体需要对天然质粒进行改造才能得到，原因是______。图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需同时用相同的限制酶HindII和BamH I切割目的基因和载体，而不用限制酶SmaI的原因是____________________________________________
（2）①过程将目的基因导入牛受精卵的技术是____________________。 ②过程称为_____代孕牛需要进行 _____处理。
（3）为检测人乳铁蛋白基因是否成功翻译，可采用______________技术。
（4）要将转基因乳牛个体发展成为遗传稳定的品系，可以通过______________技术来实现。
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【生物——选修模块3：现代生物技术专题】
我国基因工程药物的研制和生产发展迅猛。目前科学家已在牛和羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要药品，大致过程如图所示：
(1)哺乳动物的体外受精主要包括[a]__________、[b]__________和受精等几个主要步骤。 若要充分发挥优良母畜的繁殖潜能，可给供体注射_______，使其排出更多的卵子。
(2)在过程C中需要用到的工具酶有________。要使人的药用蛋白基因在奶牛乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、_______、标记基因等部分。
(3)d过程常用的方法是________，e过程的名称为_____________。
(4)若要一次获得多只完全相同的转基因牛，应采用_______技术，通常选择_______的桑椹胚或囊胚。
(5)早期胚胎发育的几个阶段：受精卵→_____期→桑椹胚→囊胚→__________。
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【选修3：现代生物科技专题】
人乳铁蛋白是一种重要的药用保健蛋白。下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程，图中Tetr表示四环素抗性基因，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示，请回答以下问题：
| 限制酶 | BamHⅠ | Hae Ⅲ | BclⅠ | Sau3AⅠ | NotⅠ |
| 识别序列 及切割位点 | 
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（1）①过程常采用的方法是_____________________________。
（2）构建基因表达载体时，需要将人乳铁蛋白基因嵌入到启动子和__________________ 之间，这样人乳铁蛋白基因就能在乳腺细胞中表达。
（3）要将人乳铁蛋白基因插入质粒，若只允许使用一种限制酶，应选择的限制酶是___________。
（4）据图分析，筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含________________ （填“四环素”或“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄青霉素”）的培养基上进行，原因是_____________。
（5）若BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接起来，连接部位的6个碱基对序列为__________________________，对于该部位，这两种酶_____________________（“都不能”或“只有一种能”）切开。
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（生物—选修3 现代生物科技专题）
下图为科学家培育能生产人血清白蛋白乳腺生物反应器的过程，据图回答下列问题：
（1）利用PCR技术扩增目的基因，前提是______________，以便据此合成________。一个DNA分子三轮复制以后，含有两种引物的DNA分子有____个。
（2）得到的转基因母牛通过有性生殖产生的雌性后代不一定能产生人血清白蛋白，为了保证其遗传性状不变，科学家可通过_______技术保证其优良性状，该技术的成功证明了_______。该技术的最后一个环节是_______，其优势是_____________________。若想提高同卵双胎或多胎的概率，可利用_______技术。
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[生物——选修3：现代生物科技专题]2017年1月24日，国际学术权威刊物发表了一篇研究论文,该论文首次报道了以唾液腺作为生物反应器，从转基因动物的唾液中生产出具有良好生物活性、可用于治疗人类小儿脑瘫和老年痴呆等神经损伤或退化性疾病的人神经生长因子蛋白。
（1）欲获得人的神经生长因子基因，可从细胞中分离到相应的mRNA，再经过反转录产生____________，以此作为模板可利用____________技术在体外扩增获得目的基因，该技术的前提是要有_______________，以便合成引物。
（2）将人的神经生长因子基因导入猪受体细胞，最终使其在____________中高效表达，获得的产品需要与天然产品的功能进行____________比较。
（3）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因猪体细胞的细胞核转入____________细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体，该技术称为____________。
（4）转基因生物中，有时会出现一些人们意想不到的后果，转基因生物引发人们在食物安全、____________ 和____________三个方面发生了激烈的争论。
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【生物——选修3:现代生物科技专题】
人类利用转基因技术成功获得了能大量合成胰岛素的大肠杆菌，它看起来与普通细菌没有什么不同，却可用来治疗糖尿病等疾病，使族岛素的生产成本大大降低。
（1）野生型大肠杆菌不能合成胰岛素的根本原因是______________。人体骨骼肌细胞________（填“能”或“不能”）合成胰岛素，原因是____________________________________________。
（2）转基因技术过程中常常会使用PCR扩增仪，其目的是______________________，该过程需要在反应体系中添加的有机物包括___________、模板、4种脱氧核苷酸、_______________。
（3）该技术的受体细胞是大肠杆菌，常用Ca2+处理受体细胞的目的是______________________。该技术常用的运载体是_________________________________。
