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【生物选修模块3：现代生物科技专题】
根据基因工程的有关知识回答下列问题。
（1）利用PCR技术扩增目的基因时，需要加入两种引物，原因是_______________，引物I延伸而成的DNA单链会与引物II结合，进行DNA的延伸，这样，DNA聚合酶只能特异地复制
_____________________的DNA序列，一个DNA分子三轮复制以后，含有两种引物的DNA分子有_________个。
（2）基因工程的核心步骤是___________。其目的是使目的基因在受体细胞中 _______，并可遗传给下代。
（3）大肠杆菌作为受体细胞最常用的转化方法是：首先用Ca2+处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为________细胞。
（4）检测目的基因是否发挥功能作用的第一步是____________________________。
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根据基因工程的有关知识回答下列问题。
（1）利用PCR技术扩增目的基因时，需要加入两种引物，原因是___________________只能从引物的3′端延伸DNA链，用两种引物才能确保DNA两条链同时被扩增，引物I延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合，进行DNA的延伸，这样，DNA聚合酶只能特异地复制________________________的DNA序列，一个DNA分子三轮复制以后，含有两种引物的DNA分子有________个。
（2）基因工程的核心步骤是______________________。其目的是使目的基因在受体细胞中_________________________________________，并可遗传给下代。
（3）大肠杆菌作为受体细胞最常用的转化方法是：首先用________处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为_______________细胞。
（4）检测目的基因是否发挥功能作用的第一步是______________________________________。
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请回答基因工程方面的有关问题：
(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。 图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为________。
②在第________轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。
①第1组：引物I和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效； ②第2组：________。
(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为________。
(4)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb
即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。
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请回答基因工程方面的有关问题:
(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为 。
②在第 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。
①第1组: ;
②第2组: 。
(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能,这是因为 。
(4)用限制酶EcoRV、MboⅠ单独或联合切割同一种质粒,得到的DNA片段长度如下图(1 kb即1 000个碱基对),请画出质粒上EcoRV、MboⅠ的切割位点。
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请利用所学知识回答基因工程、细胞工程和生态工程方面的有关问题：
（1）利用PCR（聚合酶链式反应）技术扩增人的干扰素基因时，需提供________酶和引物等，合成引物的前提是________________________，引物与互补DNA链结合的温度一般是________℃。PCR反应体系中加入dNTP（三磷酸碱基脱氧核苷酸，结构与ATP类似）后，不再单独添加ATP等能源物质，请推测其原因是____________。
（2）如图为人体中干扰素基因的酶切位点示意图。从人体基因组中提取干扰素基因时，不能使用限制酶SmaⅠ的原因是_____________
（3）如图为某质粒的结构及限制酶的酶切位点，其中tsr为硫链丝菌素（一种抗生素）抗性基因。将某基因整合到质粒上，形成重组质粒，为保证重组质粒的成功表达，除复制原点、标记基因、目的基因外，该质粒还应具有_________结构。据图分析，需要使用__________（限制酶）切割质粒，将重组质粒导入链霉菌时，在培养基中添加_______________用来筛选目的菌株。
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（10分）请回答基因工程方面的有关问题：
(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。 图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测，第四轮循环产物中只含有引物A，不含有引物B的DNA片段所占的比例为______。
②至少完成_____轮循环，才能获得两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的一组引物（只标注了部分碱基序列）是不符合要求的（如下图），请说明理由____________________________________________。
(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的 功能，这是因为________________________________________。
(4)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb
即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。
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（8分）请回答基因工程方面的有关问题：
(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为________。
②在第________轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的一组引物（只标注了部分碱基序列）不合理（如下图），请说明理由。
________；
(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的 功能，这是因为________。
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下图为转基因抗病毒马铃薯培育过程图，请据图回答有关问题：
（1）PCR技术利用的基本原理是_________。利用该技术扩增目的基因（子链的延伸方向从
→
），应选择图中的引物_________（填字母）与模板DNA结合。（2）在构建基因表达载体时，需要的工具是__________________。
（3）重组细胞经过G_________、H_________过程成功地培育出了转基因抗病毒马铃薯植株。
（4）制造抗病毒植株的人工种子可利用植物组织培养技术得到的_________等材料经过人工薄膜包装得到。
（5）研究表明，转基因植物可以通过花粉将外源基因扩散到其他植物，从而对生态环境造成潜在的危害。请你提出一种解决此问题的合理生物学方法：__________________。
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F基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转F基因的高绒质绒山羊的简单流程如图：
（1）利用PCR技术扩增F基因时，需要加入两种引物，原因是____________，引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合，进行DNA的延伸，这样，DNA聚合酶只能特异地复制的DNA序列，一个DNA分子三轮复制以后，含有两种引物的DNA分子有____________个。
（2）在过程②中，用__________________处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5%的CO2的气体环境中，CO2的作用是__________________________。
（3）在过程③中，用______________处理以获取更多的卵（母）细胞。
（4）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是_____________________。在胚胎移植前，可通过______________技术可获得较多胚胎。
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F基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转F基因的高绒质绒山羊的简单流程如图：
（1）利用PCR技术扩增F基因时，需要加入两种引物，原因是____________，引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合，进行DNA的延伸，这样，DNA聚合酶只能特异地复制的DNA序列，一个DNA分子三轮复制以后，含有两种引物的DNA分子有____________个。
（2）在过程②中，用__________________处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5%的CO2的气体环境中，CO2的作用是__________________________。
（3）在过程③中，用______________处理以获取更多的卵（母）细胞。
（4）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是_____________________。在胚胎移植前，可通过______________技术可获得较多胚胎。
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），应选择图中的引物_________（填字母）与模板DNA结合。