某科研小组利用质粒（图1）和目的基因（图2）构建重组DNA，下列分析正确的是A.用限制酶H...

某科研小组利用质粒（图1）和目的基因（图2）构建重组DNA，下列分析正确的是（ ）

A.用限制酶HindII和BamHI切割质粒，可得到2条DNA片段

B.不能用BamHI酶切割质粒和外源DNA的原因是BamHI酶会破坏目的基因和抗性基因

C.构建重组DNA时，需选择限制酶Bcl I和HindIII同时切割质粒和外源DNA

D.导入了重组DNA的细菌能在含四环素的培养基上生长而不能在含氨苄青霉素的培养基上生长

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为了构建重组质粒pZHZ2，可利用限制酶E、F切割含目的基因的DNA片段和质粒pZHZ1，然后用相应的酶连接。据图分析，下列叙述中错误的是（　　 ）

A.重组质粒pZHZ2上存在复制原点

B.基因工程的核心是构建基因表达载体

C.重组质粒pZHZ2只能被限制酶G、H切开

D.质粒pZH71、pZHZ2复制时会用到DNA聚合酶

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科研人员利用农杆菌转化法将抗病毒蛋白基因C导入番木瓜，培育出转基因抗病番木瓜，Ti质粒如图所示。下列叙述，正确的是（　　 ）

A.农杆菌的拟核DNA与番木瓜基因发生重组

B.构建重组质粒需要限制酶和DNA聚合酶

C.含重组Ti质粒的农杆菌具有四环素抗性

D.转基因抗病番木瓜不具有卡那霉素抗性

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利用转基因大肠杆菌可合成人体的蛋白质。下列叙述不正确的是

A. 常用相同的限制性核酸内切酶处理目的基因和质粒

B. DNA连接酶和DNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶

C. 可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒

D. 导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达

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利用转基因大肠杆菌可合成人体的蛋白质。下列叙述不正确的是

A.常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒

B.DNA连接酶和 DNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶

C.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒

D.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达

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为了构建重组质粒pZHZ2，可利用限制酶E、F切割目的基因和质粒pZHZ1，后用相应的酶连接。据图回答，下列叙述中错误的是(　 )

A. 基因工程的核心就是构建重组DNA分子

B. 质粒pZHZ2上存在RNA聚合酶结合的位点

C. 重组质粒pZHZ2只能被限制酶G、H切开

D. 质粒pZHZ1、pZHZ2复制时一定会用到DNA聚合酶

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为了构建重组质粒pZHZ2，可利用限制酶E、F切割目的基因和质粒pZHZ1，后用相应的酶连接。据图回答，下列叙述中错误的是（　　 ）

A. 基因工程的核心就是构建重组DNA分子

B. 质粒pZHZ2上存在RNA聚合酶结合的位点

C. 重组质粒pZHZ2只能被限制酶G、H切开

D. 质粒pZHZ1、pZHZ2复制时一定会用到DNA聚合酶

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径柳匙叶草是一种泌盐植物。科研工作者将径柳匙叶草液泡膜Na＋/K＋逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到棉花细胞内，获得了转基因耐盐棉花新品种。图1是获取的含有目的基因的DNA片断，Sau3A I、EcoR I、BamH I为三种限制酶，图中箭头所指为三种限制酶的切点；图2是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图；图3是土壤农杆菌中用于携带目的基因的Ti质粒结构示意图。请分析回答问题：

（1）若图1所示DNA片段是利用径柳匙叶草的DNA直接获得的，则该获取目的基因的方法为_________。

（2）不能在径柳匙叶草根尖分生区细胞中获得TaNHX2基因的mRNA，其原因是_________。

（3）若用BamH I切割图1所示的DNA片段，获得目的基因，则需选用_________切割图3所示质粒，以便构建基因表达载体，该方案的缺陷是_________。故切割图1所示DNA片段的最佳方案是选用_________酶。

（4）用上述最佳方案构建基因表达载体，所得重组质粒_________ （选填“能”“不能”或“不一定能”）被BamH Ⅰ切割。

（5）为了检测技术成果，科研工作者在个体水平的检测方法是_________。

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下列关于基因工程的叙述，正确的是

A.通常用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理质粒的DNA

B.限制酶和DNA连接酶是构建重组质粒常用的工具酶

C.基因工程的操作步骤首先要提取目的基因

D.质粒是广泛存在于细菌细胞质中的一种颗粒状的细胞器

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荧光蛋白（GFP）在紫外光下会发出绿色荧光，某科研团队将GFP基因插入质粒P中构建了重组质粒载体P0，用于基因工程中基因表达载体（P1）的筛选和鉴定。部分过程如下图所示，下表为部分限制酶的识别序列及切割位点。请分析回答问题：

（1）过程①中，用EcoRV酶切割目的基因获得_________末端。

（2）过程②是利用_________技术，多次循环扩增DNA片段，经酶切产生带黏性末端的目的基因。该过程设计的引物5＇端序列必须是_________，以获得相应的黏性末端，便于P1的构建和筛选。

（3）过程③中，质粒P0需用限制酶_________切割，才能与目的基因在_________酶的作用下形成P1。

（4）为了筛选出含有质粒P1的菌落，需采用添加__________的培养基进行培养，在紫外光激发下_________（选填“发出”或“不发出”）绿色荧光的菌落，即为含有P1的菌落。

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