科研人员采用如图所示的育种流程获得抗虫大豆新品种。请回答：
（1）常用___________技术扩增抗虫基因，将抗虫基因插入到T质粒上的T-DNA的原因是____________________________________________。
（2）在构建基因表达载体时为防止酶切产物自身环化，切割质粒时需用___________种限制，酶，酶切后形成的黏性末端序列应___________(填“相同”或“不同”)。
（3）将基因表达载体导入农杆菌时应用___________处理农杆菌，使农杆菌处于___________的生理状态，这种细胞称为感受态细胞。
（4）大豆外植体通过诱导形成愈伤组织的过程称为___________，愈伤组织通过再分化形成植株。该过程利用的原理是___________。
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科研人员采用如图所示的育种流程获得抗虫大豆新品种。请回答：
（1）常用___________技术扩增抗虫基因，将抗虫基因插入到T质粒上的T-DNA的原因是____________________________________________。
（2）在构建基因表达载体时为防止酶切产物自身环化，切割质粒时需用___________种限制，酶，酶切后形成的黏性末端序列应___________(填“相同”或“不同”)。
（3）将基因表达载体导入农杆菌时应用___________处理农杆菌，使农杆菌处于___________的生理状态，这种细胞称为感受态细胞。
（4）大豆外植体通过诱导形成愈伤组织的过程称为___________，愈伤组织通过再分化形成植株。该过程利用的原理是___________。
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某科研团队利用植物细胞工程技术，把基因序列已知的抗除草剂(Bar)基因导入原生质体获得抗除草剂大豆。请回答下列相关问题：
(1)对于已获得的Bar基因可以用______________技术进行扩增。图中的a过程通常使用相同的____________酶和DNA连接酶，使目的基因与载体连接形成重组DNA。
(2)在b过程中，获得原生质体除了需要纤维素酶和果胶酶，还需要用到的试剂是__________________________。
(3)成功导入重组DNA的原生质体经脱分化形成I__________，进而生长发育成植株。下列不属于I细胞应具有的特征是__________。
A．薄壁细胞 B．细胞质丰富 C．液泡小 D．细胞核小
(4)若要判断转基因抗除草剂大豆是否成功，比较简便的检测方法是_____________________。
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下图表示培育生物新品种的过程，回答下列问题:
（1）研究人员根据已知的人生长激素基因序列，采用__________方法获得目的基因，之后再利用_______________技术扩增目的基因，最后得到的转入生长激素基因牛若要检测其目的基因是否表达，可采用_______________方法。
（2）通过基因工程将无限增殖调控基因(PIG)导入受体细胞Ⅱ，再经过检测和筛选得到的细胞Ⅲ具有的_____________________________________特点，其分泌产生的单克隆抗体最主要的优点在于它的________________、_______________，并可能大量制备。
（3）过程④将含抗虫基因的重组Ti质粒导入棉花受体细胞通常采用________________法，过程⑤所体现的生物学原理是__________________________。
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科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图所示：
（1）研究人员在过程①中，利用PCR技术扩增人凝血因子IX基因时，除了酶、引物、模板以外，还需要加入____________作为合成DNA的原料；PCR过程中需要不断调整反应体系的温度，一般情况下，至少需要______个不同的反应温度。
（2）通过步骤②获得的A，除了人凝血因子IX基因外，还含有_______________________（至少三个）等结构。
（3）过程④指_______________，重组胚胎可以与普通代孕母羊的子宫建立正常的生理和组织联系，但是出生后的转基因绵羊依然具有生产人凝血因子IX医用蛋白的能力，原因是___________________________________。
（4）理论上，可以通过少量整合有目的基因的成纤维细胞，克隆出大量转基因绵羊，请对这一问题做出两个合理的解释： ___________________；____________________。
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科研工作者欲将某抗盐基因导入原生质体培育抗盐大豆。请回答下列问题：
（1）为获得大量抗盐基因，可通过_______技术进行扩增，该技术需要2种引物的原因是___________。
（2）导入抗盐基因的叶肉细胞原生质体应放在______________（高渗、等渗、低渗）溶液中。原生质体需再生出__________，经脱分化获得_________，再分化获得抗盐植株。该过程的原理是_________________。
（3）利用带有标记的抗盐基因探针与_______________进行分子杂交，检测抗除盐基因在受体细胞中是否转录。个体水平上的检测抗盐基因是否成功表达的方法是__________________。
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科研人员利用胚胎干细胞对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗， 其技术流程如图。 请回答：
⑴ 过程①获得重组胚胎之前需要通过______技术获得重组细胞， 接受细胞核的卵母细胞应处于时期， 并用微型吸管吸出______。
⑵ 步骤②中， 重组胚胎培养到囊胚期时， 可从其______分离出 ES 细胞， ES 细胞在形态上表现为细胞核______ 、明显， 在功能上具有______。
⑶ 步骤③中， 需要构建含干扰素基因的______， 构建之前可以利用______技术对目的基因进行扩增。
⑷ 步骤③中将基因导入 ES 细胞的方法通常是______法， 为了检测 ES 细胞的 DNA 上是否插入了干扰素基因， 可采用______技术。 在正常的小鼠体内， 干扰素是在______(填一种细胞器)上合成的。
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科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图所示，请回答相关问题：
（1）过程①获得重组胚胎之前需要通过___________技术获得重组细胞，通过显微操作去除MⅡ期卵母细胞中的核，用微型吸管可一并吸出______________________。
（2）步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其________________分离出ES细胞。步骤③中，需要构建含有干扰素基因的________________。构建之前可以利用PCR技术对目的基因进行扩增，PCR技术的原理是___________。
（3）将基因导入ES细胞常用的方法是_____________。体外诱导ES细胞向不同方向分化是利用了ES细胞的___________。
（4）为检测干扰素基因的转录情况，可采用___________方法，若有杂交带出现，表明目的基因已成功转录出mRNA。
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下图是科研人员培育矮秆抗病新品种小麦的两种方案。相关分析错误的是
A.过程③通常用秋水仙素处理幼苗
B.过程⑤是通过连续自交获得新品种
C.过程④得到的矮秆抗病植株中有杂合子
D.两种育种方案的原理涉及基因重组和基因突变
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科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图，请回答下列问题：
（1）图中卵母细胞应在体外培养到______期，步骤①应先对卵母细胞进行______处理。
（2）由图可知，步骤②要分离出ES细胞，需将重组胚胎培养到______期。
（3）步骤③选择ES细胞作为受体细胞而不是上皮细胞，是因为ES细胞______，该过程需要先利用______技术扩增干扰素基因，其前提是要有一段已知干扰素基因的核苷酸序列以便合成______。
（4）步骤④应在培养液中加入______。为检测干扰素基因是否在小鼠体内成功表达，可以采用______技术。
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科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如下图。请回答相关问题：
(1)过程①获得重组胚胎之前，需要通过____________技术获得重组细胞。
(2)将基因导入ES细胞而不是导入到上皮细胞，是因为__________________。
(3)步骤③中，需要构建含有干扰素基因的__________。由于DNA复制时，子链只能由5′向 3′方向延伸，故构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时，可以从图2中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取_______________作为引物。对干扰素基因片段和质粒进行酶切时，可选用限制酶的组合为________________或_______________。
(4)将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察，选择发___________色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否表达，可以采用_____________的方法。
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