科研人员探究灵芝多糖对不同微生物（大肠杆菌、青霉等）的抑制效果。操作如下：将浸有灵芝多糖的...

科研人员探究灵芝多糖对不同微生物（大肠杆菌、青霉等）的抑制效果。操作如下：将浸有灵芝多糖的滤纸片间隔一定距离（至少3片）贴在含菌平板上，经过适宜时间培养后测 量抑菌圈的直径大小，通过抑菌圈大小来判断抑菌效果。下列说法正确的是（　　 ）

A.培养大肠杆菌、青霉等微生物均需使用牛肉膏蛋白胨培养基

B.应设置不接种的空白平板以检验培养基是否有杂菌污染

C.菌种的接种浓度属于无关变量，应保持各组相同

D.应将大小相同且浸有无菌水的滤纸片贴在含菌平板上做对照

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为探究大叶木姜子多糖的抑菌效果，研究人员将下列 4 种菌分别用无菌水稀释成菌悬液，于固体培养基上制成含菌平皿，在平皿上放置经不同浓度大叶木姜子多糖溶液浸泡 2～3 小时的滤纸片，培养一段时间后，测定各供试菌的抑菌圈直径（mm），结果如下表，相关叙述，错误的是

A. 金黄色葡萄球菌与另外三种菌的主要区别是没有核膜

B. 制备含菌平皿可用稀释涂布平板法或平板划线法

C. 每个浓度每种菌重复多次实验，所得数据取平均值

D. 大叶木姜子多糖对黑曲霉抑制效果最差

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研究人员发现儿茶素（C）和稀土离子Yb3+均有抗菌作用。儿茶素（C）是茶叶中茶多酚的主要成分，与细菌的细胞质膜的亲和力强，但抗菌作用较弱：稀土离子Yb3+抗菌作用较强。但与细胞质膜的亲和力较弱，难以到达细菌内部的作用靶点。请回答下列问题：

（1）因发酵程度的不同，茶叶可分为轻发酵茶，半发酵茶，全发酵茶和后发酵茶。发酵过程中，茶叶含有微生物生长所需的________、水、无机盐、生长因子。

（2）为研究儿茶素（C）的抑菌效果，研究人员用40g/L浓度的儿茶素（C）对大肠杆菌进行了抑菌实验，结果如下表所示；

分析实验结果可知：pH为__________________时，该浓度下的儿茶素（C）对大肠杆菌的抑制效果最强。

（3）下列对研究人员研究过程中涉及到的操作，叙述正确的有________________（填序号）。

A．利用 NaOH 和HCI调节培养基的pH

B．培养基在62℃下灭菌15～30分钟

C．用无菌玻璃刮铲将大肠杆菌悬浮液均匀涂布在培养基上

D．培养基的配制步骤依次是：计算→称量→溶化→灭菌→调节PH→倒平板

（4）研究人员用稀土离子Yb3+对儿茶素（C）进行化学修饰，形成配合物Yb3+-C， 并探究其抗菌效果。为了确定配合物中Yb3+：C的最佳摩尔比，研究人员用不同摩尔比的Yb3+-C配合物处理滤纸片，将其置于物理状态为_____且布满金黄色葡萄球菌培养基中，一段时间后，不同滤纸片形成的抑菌圈直径如图所示，可推知Yb3+：C的最佳摩尔比对应的编号为__________。

（5）为探究配合物Yb3+-C的抗菌机理，研究人员利用透射电镜观察了各组金黄色葡萄菌细胞内的超微结构，结果显示：

（a）未加抗菌剂；细菌菌体体较小，其细胞质分在均匀；

（b）C处理：细胞壁和细胞质膜等结构不光滑，略显粗糙；

（c）Yb3+处理：细胞质出现较明显的固缩及空泡化现象；

（d）Yb3+-C处理：细胞壁和细胞质膜等结构发生破裂，细胞质出现了出现严重的固缩及空泡化现象。由此可见，儿茶素（C）和Yb3+ 作用的主要位点分别是________、________，推测Yb3+-C具有更强抗菌作用的机理是______________________。

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为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性，科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针，进行分子杂交实验，以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如下图：(ampr表示氨苄青霉素抗性基因；LacZ基因被SHH基因插入后不表达)

请回答：

(1)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时，________(填“需要”或“不需要”)启动子。

(2)步骤②中，用Ca2＋处理大肠杆菌，使之成为______细胞，然后导入重组载体。实验中，用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌，未导入质粒的细菌将会死亡，原因是这些细菌不含有______基因。

(3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和Xgal的培养基上会形成蓝色菌落，易于识别。根据上述原理可以初步判断________(填“蓝色”或“白色”)菌落中的大肠杆菌为重组菌。

(4)将制备的探针加入角化囊肿切片中，探针将与____________________形成杂交带，进而判断SHH基因的转录情况。

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为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性，科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针，进行分子杂交实验，以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如下图(Amp表示氨苄青霉素抗性基因；LacZ基因被SHH基因插入后不表达)。

请回答：

(1)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时，________(填“需要”或“不需要”)启动子。

(2)步骤②中，用Ca2＋处理大肠杆菌，使之成为________细胞，然后导入重组载体。实验中，用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌，未导入质粒的细菌将会死亡，原因是这些细菌不含有________基因。

(3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X­gal的培养基上会形成蓝色菌落，易于识别。根据上述原理可以初步判断____(填“蓝色”或“白色”)菌落中的大肠杆菌为重组菌。

(4)将制备的探针加入角化囊肿切片中，探针将与__________形成杂交带，进而判断SHH基因的转录情况。

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有人试图在棉田中喷洒一定量脱落酸以除去叶片便于机械采摘棉花，但效果不明显，生物兴趣小组设计如下实验方案探究原因。

　实验假设：生长素对脱落酸有抑制作用

　实验方案：取若干生长状态相同的棉花平均分成三组，分别做如下图处理，其中甲组保留顶芽，乙丙两组则去除顶芽。

（1）脱落酸可促进叶和果实的_______________________。

（2）丙组中X处应进行的处理是______________________。

（3）比较甲乙丙三组叶片脱落的先后情况，

①若________________________________，表明生长素对脱落酸有抑制作用。

②若________________________________，表明生长素对脱落酸无抑制作用。

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有人试图在棉田中喷洒一定量脱落酸以除去叶片便于机械采摘棉花，但效果不明显，生物兴趣小组设计如下实验方案探究原因。

实验假设：生长素对脱落酸有抑制作用

实验方案：取若干生长状态相同的棉花平均分成三组，分别做

如下图处理，其中甲组保留顶芽，乙丙两组则去除顶芽。

（1）脱落酸可促进叶和果实的________                 _______。

（2）丙组中X处应进行的处理是________________。

（3）比较甲乙丙三组叶片脱落的先后情况，

①若________________________________，表明生长素对脱落酸有抑制作用。

②若________________________________，表明生长素对脱落酸无抑制作用。

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结核病是由结核分枝杆菌引起的传染病。请回答下列问题：

（1）研究者从患者体内提取病原菌进行分离培养。培养结核分枝杆菌的培养基主要含有天门冬氨酸、甘油、鸡蛋黄、KH2PO4、MgSO4等。此培养基成分中既能作为氮源又能提供特殊的营养物质的是______________________。

（2）为探究不同抗生素对结核分枝杆菌的抑菌效果，取细菌培养液2滴涂布于固体培养基上，然后将浸有相同浓度不同种类的抗生素圆纸片置于培养基表面，37 ℃培养4周，实验结果如甲图，其中圆纸片A、B分别浸过抗生素A和抗生素B，圆纸片C浸过抗生素A、B的混合物。乙图是该菌结构示意图，图中箭头表示不同抗生素的作用位置。

①欲得到甲图实验结果，接种过程用到的实验器材有______________________ (至少写出两个)。

②实验中圆纸片D用作实验对照，对圆纸片D的处理方法是______________________。

③实验结果说明，圆纸片周围清晰区______________________ (“越大”或“越小”)，抗菌效果越好。结合图乙分析，圆纸片C周围清晰区大于圆纸片A和B的原因是____________________________ 。

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在涂布有大肠杆菌的培养基上进行抑菌实验，在a、b、c处分别贴浸有不同抗生素（浓度相同）的无菌滤纸片，d处滤纸片浸有无菌水。培养后的结果如下图。以下判断错误的是

A.a处抑菌效果小于b处

B.b处的滤纸片没有沥干

C.c处抗生素无效

D.d为对照

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在涂布有大肠杆菌的培养基上进行抑菌实验，在a、b、c处分别贴浸有不同抗生素（浓度相同）的无菌滤纸片，d处滤纸片浸有无菌水。培养后的结果如下图。以下判断错误的是

A.a处抑菌效果小于b处

B.b处的滤纸片没有沥干

C.c处抗生素无效

D.d为对照

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