（8分）由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经...

（8分）由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。

（1）图甲中，过程①需要的酶有____                __。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以______作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是___                                     __。

（2）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是________________；推测该同学接种时可能的操作失误是______________。

（3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种_______菌的发酵罐需要先排气，其原因是_____          _____________________。

（4）若要对培养液中的酵母菌进行计数，下表是取0.1ml菌液进行涂布时，不同稀释倍数下统计的平板培养基上的菌落数：

根据表中数据估算培养液中酵母菌的浓度约为_______ 个/ml

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由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的 α-淀粉酶 基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。

（1）图甲中，过程①需要的酶有_____________ 。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以____________ 作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是______________ 。

（2 ）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_____________________ ；推测该同学接种时可能的操作失误是______________ 。

（3 ）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种________菌的发酵罐需要先排气，其原因是__________________________ 。

（4 ）用凝胶色谱法分离α 一淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较________ 。

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由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的 α-淀粉酶 基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。

（1）图甲中，过程①需要的酶有_____________ 。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以____________ 作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是______________ 。

（2 ）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_____________________ ；推测该同学接种时可能的操作失误是______________ 。

（3 ）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种________菌的发酵罐需要先排气，其原因是__________________________ 。

（4 ）用凝胶色谱法分离α 一淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较________ 。

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由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。

（1）图甲中，过程①需要的酶有___________。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以__________作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是_______　　　　 。

（2）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_____；推测该同学接种时可能的操作失误是____　　 ____。该操作过程中需要对哪些实验器材进行灭菌（　　　 ）

A、玻璃刮铲　

B、接种针 　

C、培养基 　　　

D、工程酵母菌种　　

E、酒精灯

（3）对于实验结果分析正确的是：（　　　 ）

A．在培养基中添加碘液进行染色，菌落周围会出现透明圈，颜色较浅。

B．可挑选透明圈较大的工程菌进行培养。

C．在密闭和不密闭的情况下培养，酵母菌出现的透明圈大小不同。

D．在实验条件适宜时，酵母菌进行孢子生殖，繁殖迅速。

（4）以淀粉为原料，用工程酵母菌在适宜条件下密闭发酵，隔一段时间需要进行排气，其原因是_______　 。

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（8分）由于酵母菌利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程菌菌种（过程如图甲所示）。

(1)图甲中，过程①需要的酶有_____________。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以____________作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是______________。

(2）某间学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是___________________；推测该同学接种时可能的操作失误是______________。

(3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种________菌的发酵罐需要先排气，其原因是__________________________。

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由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（图甲所示）。

（1）图甲中，过程①需要的酶有___________。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以___________作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是___________。

（2）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是___________；推测该同学接种时可能的操作失误是___________。

（3）以淀粉为原料，用工程酵母菌在适宜条件下密闭发酵，隔一段时间需要进行排气，其原因是_________________________________。

（4）对于实验结果分析正确的是（________）

A．α-淀粉酶基因是否表达可通过DNA分子杂交技术来检测

B．在培养基中添加碘液进行染色，菌落周围会出现透明圈，颜色较浅

C．在密闭和不密闭的情况下培养，酵母菌出现的透明圈大小不同

D．在实验条件适宜时，酵母菌进行孢子生殖，繁殖迅速

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回答下列（一）、（二）小题：

（一）普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图1所示）

（1）图1中,为达到筛选目的,平板内的固体培养基应以____________作为唯一碳源。②、③过程需重复几次,目的是______________。

（2）某同学尝试过程③的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图2所示。该同学的接种方法是_______；推测该同学接种时可能的操作失误是____________。

（3）以淀粉为原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵,发酵罐需要先排气,其原因是______________。

（4）上述工程酵母菌培养过程中，有关操作正确的是（　　　 ）

A．玻璃刮刀用火焰灼烧进行灭菌

B．培养基分装到培养皿后进行灭菌

C．倒平板和取菌液都必须在酒精灯火焰旁进行

D．获得的菌种如果需要保存，可置于37℃恒温保存

（二）下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：

（1）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用_______________________两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过_______________酶作用后获得重组质粒。

（2）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加______________。

（3）若BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为_______________，对于该部位，这两种酶__________________（填“都能”、“都不能”或“只有一种能”）切开。

（4）若用Sau3A I切图1质粒最多可能获得_______________种大小不同的DNA片段。

（5）基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自于______________。

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回答下列（一）、（二）小题：

（一）普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图1所示）

（1）图1中,为达到筛选目的,平板内的固体培养基应以　　　 作为唯一碳源。②、③过程需重复几次,目的是　　　　　　　　　　　 。

（2）某同学尝试过程③的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图2所示。该同学的接种方法是　　　　　　 ；推测该同学接种时可能的操作失误是　　　　　　 。

（3）以淀粉为原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵,发酵罐需要先排气,其原因是　　　　　　　　　 。

（4）上述工程酵母菌培养过程中，有关操作正确的是

A．玻璃刮刀用火焰灼烧进行灭菌

B．培养基分装到培养皿后进行灭菌

C．倒平板和取菌液都必须在酒精灯火焰旁进行

D．获得的菌种如果需要保存，可置于37℃恒温保存

（二）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：

（1）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用　　　　　　　　 两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过　　　　　　　　 酶作用后获得重组质粒。

（2）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加　　　　 　　　　　　 。

（3）若BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为　　　　　　 ，对于该部位，这两种酶　　　　　　　　　　 （填“都能”、“都不能”或“只有一种能”）切开。

（4）若用Sau3A I切图1质粒最多可能获得　　　　　　　　　　 种大小不同的DNA片段。

（5）基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自于　　　　　　　　 。

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普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,有人将地衣芽孢杆菌的α淀粉酶基因转入酵母菌中,经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图甲所示)。

(1)图甲中,过程①需要的酶有　　　　　　　　 。为达到筛选目的,平板内的固体培养基应以

　　　　 作为唯一碳源。②、③过程需重复几次,目的是 ________　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(2)某同学尝试过程③的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是　　　　　　　　　 ;推测该同学接种时可能的操作失误是　　　　　　 。

(3)以淀粉为原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵,接种　　 菌的发酵罐需要先排气,其原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(4)用凝胶色谱法分离α淀粉酶时,在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质,相对分子质量较　　 。

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普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图所示）

（1）图1中,为达到筛选目的,平板内的固体培养基应以　　　　　　　　　　 作为唯一碳源。②、③过程需重复几次,目的是　　　　　　　　　　　　　　 。

（2）某同学尝试过程③的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如下图所示。该同学的接种方法是　　　　　　　　　　　 ；根据平板菌落分布情况，请分析该同学存在的操作失误　　　　　　　　　　 。通过统计平板上的菌落数，能推测出样品中大约含有多少活菌，为了保证结果准确，一般选择菌落数在　　　　　 　　　　 的平板进行计数。用此接种方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目　　　　　　　　　　 ，原因是　　　　　　　　　　　 。

（3）以淀粉为原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵,工程酵母菌发酵罐需要先排气,其原因是　　　　　　　　 　 。

（4）上述工程酵母菌培养过程中，有关操作正确的是　　　　　 　 。

A．玻璃刮刀用火焰灼烧进行灭菌

B．培养基分装到培养皿后进行灭菌

C．倒平板和取菌液都必须在酒精灯火焰旁进行

D．获得的菌种如果需要保存，可置于37℃恒温保存

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