嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好...

（14分,每空2分）嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：

Ⅰ.利用大肠杆菌表达BglB酶

（1）PCR扩增bglB基因时，选用　　　　　　 基因组DNA作模板。

（2）右图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入　　　　　　　　 和　　　　　　　 不同限制酶的识别序列。

（3）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为　　　　　　　　　　　　　　　　 。

Ⅱ.温度对BglB酶活性的影响

（4）据图1、2可知，80℃保温30分钟后，BglB酶会　　　　　　　　　 ；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在　　　　　　　　　 （单选）。

A.50℃　　　 B.60℃　　　　 C.70℃　　　　 D.80℃

Ⅲ.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性

在PCR扩增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。

（5）与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中　　　　　　　　 （多选）。

A.仅针对bglB基因进行诱变　　　 B.bglB基因产生了定向突变

C.bglB基因可快速累积突变　　　 D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变

高二生物综合题极难题查看答案及解析

（14分,每空2分）嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：

Ⅰ.利用大肠杆菌表达BglB酶

（1）PCR扩增bglB基因时，选用　　　　　　 基因组DNA作模板。

（2）右图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入　　　　　　　　 和　　　　　　　 不同限制酶的识别序列。

（3）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为　　　　　　　　　　　　　　　　 。

Ⅱ.温度对BglB酶活性的影响

（4）据图1、2可知，80℃保温30分钟后，BglB酶会　　　　　　　　　 ；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在　　　　　　　　　 （单选）。

A.50℃　　　 B.60℃　　　　 C.70℃　　　　 D.80℃

Ⅲ.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性

在PCR扩增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。

（5）与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中　　　　　　　　 （多选）。

A.仅针对bglB基因进行诱变　　　 B.bglB基因产生了定向突变

C.bglB基因可快速累积突变　　　 D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变

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嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：

利用大肠杆菌表达BglB酶

（1）PCR扩增bglB基因时，选用　　　　　　 基因组DNA作模板。

（2）上图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入　　 　　　　 　 和　　　　　　 　 不同限制酶的识别序列。

（3）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为　 　　　　　　　 。

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嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：

Ⅰ.利用大肠杆菌表达BglB酶

（1）PCR扩增bglB基因时，选用　　　　　　 基因组DNA作模板。

（2）如图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入　　　　　　　　 和　　　　　　　 不同限制酶的识别序列。

Ⅱ.温度对BglB酶活性的影响

（3）据图1、2可知，80℃保温30分钟后，BglB酶会　　　　　　　　　 ；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在　　　　　　　　　 （单选）。

A.50℃　　　 B.60℃　　　　 C.70℃　　　　 D.80℃

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嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：

（1）利用大肠杆菌表达BglB酶PCR扩增bglB基因时，选用____________基因组DNA作模板。

（2）右图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列，为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入___________和___________不同限制酶的识别序列。

（3）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为转基因的大肠杆菌分泌出____________。

（4）温度对BglB酶活性的影响据图1、2可知，80℃保温30分钟后，BglB酶会____________；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在______（单选）。

A.50℃　　　 B.60℃　　　 C.70℃　　　　 D.80℃

（5）利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性，在PCR扩增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率，经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中______（多选）。

A．仅针对bglB基因进行诱变　　　 B．bglB基因产生了定向突变

C．bglB基因可快速累积突变　　　　 D．bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变

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回答下列有关微生物及酶的相关问题：

（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即____________、__________　　 和葡萄糖苷酶。

（2）土壤中的某些细菌也能分解纤维素，可以利用______________培养基进行分离，接种时可以使用_________法，方便对纤维素分解菌进行计数。

（3）从纤维素分解菌中提取纤维素酶，可以利用固定化酶技术对酶进行处理，能达到反复使用的目的，使用该技术对酶处理时，一般用________________或______________法。

（4）纤维素被分解后产生的葡萄糖，可以用来酿酒，通入氧气后酒可能会变酸，这主要是____________（填微生物）发酵引起的。

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下图为质粒限制酶酶切图谱，β-葡萄糖苷酶基因（bglB）不含图中所示的限制酶识别序列。研究人员在构建bglB基因表达载体时，应先选择限制酶，然后在扩增的bglB基因两端分别引入相应限制酶的识别序列，才能完成质粒和目的基因的重组。以下关于选择限制酶的说法，错误的是

注：图中限制酶的识别序列及切割形成的黏性末端均不相同

A．选用限制酶Ndel或BamHI都能够获得所需的重组质粒

B．选用限制酶Xbal获得的重组质粒不能表达出β-葡萄糖苷酶

C．选用限制酶Pstl不能将bglB基因导入受体细胞

D．同时选用限制酶NdeI和BamHI，可避免目的基因与质粒反向连接

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下图为质粒限制酶酶切图谱，β-葡萄糖苷酶基因（bglB）不含图中所示的限制酶识别序列。研究人员在构建bglB基因表达载体时，应先选择限制酶，然后在扩增的bglB基因两端分别引入相应限制酶的识别序列，才能完成质粒和目的基因的重组。以下关于选择限制酶的说法，错误的是

注：图中限制酶的识别序列及切割形成的黏性末端均不相同

A. 选用限制酶Ndel或BamHI都能够获得所需的重组质粒

B. 选用限制酶Xbal获得的重组质粒不能表达出β-葡萄糖苷酶

C. 选用限制酶Pstl不能将bglB基因导入受体细胞

D. 同时选用限制酶NdeI和BamHI，可避免目的基因与质粒反向连接

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下面关于酶的研究与应用的说法，错误的是

A．葡萄糖苷酶能够将纤维二糖水解为葡萄糖

B．我们现在已经能够通过固定葡萄糖异构酶来生产高果糖浆

C．酶的固定化常用包埋法

D．加酶洗衣粉里面的酶通常是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶

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下列与纤维素分解菌及其分离实验的有关说法，错误的是（　　 ）

A.纤维素酶至少包括三种组分：C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶

B.正确的操作流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→挑选菌落

C.刚果红可与纤维素形成透明复合物，所以可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌

D.通过定时测定葡萄糖产量的变化来衡量纤维素分解菌培养液中纤维素酶产量

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