可以作为目的基因“分子运输车”的是A．天然质粒 B．人工改造的质粒C．抗四环素基因 D．抗...

可以作为目的基因“分子运输车”的是

A．天然质粒　　 　　 B．人工改造的质粒

C．抗四环素基因　　 D．抗氨苄青霉素基因

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下图为某质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示酶切后目的基因插入位点。下列有关叙述正确的是

A．质粒一般都含有抗性基因，所以天然质粒一般不用改造直接用作基因工程的载体

B．将重组质粒4导入大肠杆菌，该菌能在含四环素的培养基上生长

C．若要确定目的基因是否表达，应首选重组质粒2导入受体细胞

D．将重组质粒2、4导入大肠杆菌，大肠杆菌都能在含氨苄青霉素培养基上生长

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如图是某质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示酶切后目的基因插入位点。下列有关叙述正确的是

A. 基因amp和tet是一对等位基因，常作为基因工程中的标记基因

B. 将重组质粒1、2、4导入大肠杆菌，大肠杆菌都能在含氨苄青霉素培养基上生长

C. 若要确定目的基因是否表达，应首选重组质粒2导入受体细胞

D. 将重组质粒4导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长

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质粒是基因工程中最常用的运载体,它存在于许多细菌体内。质粒上有标记基因如右下图所示（a为氨苄青霉素抗性基因，b为抗四环素基因），通过标记基因可以推知外源基因(目的基因)是否转移成功。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，下表是外源基因插入位置(插入点有a、b、c)，请根据表中提供细菌的生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点正确的一组是（     ）

A．①是c，②是b，③是a             B．①是a和b，②是a ，③是b

C．①是a和b，②是b，③是a         D．①是c，②是a，③是b

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质粒是基因工程中最常用的运载体,它存在于许多细菌体内。质粒上有标记基因如右下图所示（a为氨苄青霉素抗性基因，b为抗四环素基因），通过标记基因可以推知外源基因(目的基因)是否转移成功。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，下表是外源基因插入位置(插入点有a、b、c)，请根据表中提供细菌的生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点正确的一组是（     ）

A．①是c，②是b，③是a             B．①是a和b，②是a ，③是b

C．①是a和b，②是b，③是a         D．①是c，②是a，③是b

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pBR322是一个由普通质粒经过人工添加许多限制酶识别序列而构建的重要质粒，有万能质粒之称，图甲是pBR322结构示意图（Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因）。图乙表示几种限制酶识别序列及其切割位点。回答下列问题：

（1）质粒是基因工程中常用的工具，其作用是____________________。人工构建pBR322过程中需要的酶是__________________________________________________。

（2）为扩增目的基因可采用PCR技术，该技术利用了_________原理，该技术的前提是需要根据________合成引物。

（3）由图乙可知，经Sau3AⅠ酶切割得到的目的基因可以与被__________酶切割的pBR322连接成重组质粒，原因是____________________。将切割后的目的基因与pBR322质粒混合，加入相应酶反应后，用得到的混合物直接转化处于感受态的大肠杆菌，感受态是指____________________的生理状态。

（4）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加__________，平板上长出的菌落，需要进一步鉴定才能筛选出含有目的基因的大肠杆菌的单菌落，原因是____________________。

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pBR322是一个由普通质粒经过人工添加许多限制酶识别序列而构建的重要质粒，有万能质粒之称，图甲是pBR322结构示意图（Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因）。图乙表示几种限制酶识别序列及其切割位点。回答下列问题：

（1）质粒是基因工程中常用的工具，其作用是____________________。人工构建pBR322过程中需要的酶是__________________________________________________。

（2）为扩增目的基因可采用PCR技术，该技术利用了_________原理，该技术的前提是需要根据________合成引物。

（3）由图乙可知，经Sau3AⅠ酶切割得到的目的基因可以与被__________酶切割的pBR322连接成重组质粒，原因是____________________。将切割后的目的基因与pBR322质粒混合，加入相应酶反应后，用得到的混合物直接转化处于感受态的大肠杆菌，感受态是指____________________的生理状态。

（4）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加__________，平板上长出的菌落，需要进一步鉴定才能筛选出含有目的基因的大肠杆菌的单菌落，原因是____________________。

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下图表示某质粒上的抗氨苄青霉素基因（Ampr）和抗四环素基因（Tetr），P点为目的基因插入位点，则成功导入重组质粒的受体细胞

A. 既能在含氨苄青霉素培养基上生存，也能在含四环素培养基上生存

B. 能在含氨苄青霉素培养基上生存，不能在含四环素培养基上生存

C. 不能在含氨苄青霉素培养基上生存，能在含四环素培养基上生存

D. 既不能在含氨苄青霉素培养基上生存，也不能在含四环素培养基上生存

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某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamH I三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题。

（1）将含有目的基因的DNA与质粒分别用Sal I酶切，酶切产物用_____________催化连接后，两个DNA片段的连接结果有_______种。

（2）在构建重组质粒时，应选用______酶和________酶，对_______进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性。

（3）为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，应在培养基中加入________________，理由是_______。

（4）将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用__________________技术，愈伤组织经________进而形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加________。

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图1是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图，载体质粒P0具有四环素抗性基因(tetr)和氨苄青霉素抗性基因(ampr)。请回答下列问题：

（1）用Taq DNA聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段，其两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸。载体P1用酶处理，在两端各添加了一个碱基为________的脱氧核苷酸，形成P2；P2和目的基因片段在________酶作用下，形成重组质粒P3。

（2）为筛选出含有重组质粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到A、B、C三类菌落，其生长情况如下表(“＋”代表生长，“－”代表不生长)。根据表中结果判断，应选择的菌落是________(填表中字母)类，另外两类菌落质粒导入情况分别是______________________、________________________。

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