人类是乙型肝炎病毒的唯一宿主，现有的肝硬化、肝癌多从乙肝发展而来，接种乙肝疫苗是预防乙肝病...

人类是乙型肝炎病毒的唯一宿主，现有的肝硬化、肝癌多从乙肝发展而来，接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法。乙型肝炎疫苗的研制先后经历了血源性疫苗和基因工程疫苗阶段。血源性“乙型肝炎疫苗”是取用乙肝病毒感染者的血液，用高速离心提纯血液中的乙肝病毒，之后再灭活，制成乙肝疫苗。基因工程乙肝疫苗的生产和使用过程如图1，图2示意大肠杆菌质粒的相关基因与限制酶切点；图3示意有关限制酶在DNA分子中的具体切点。请回答相关问题：

（1）从图1可知，该目的基因的具体功能是______________。

（2）选择大肠杆菌质粒作为运载体的原因是______________。

（3）用基因工程疫苗接种比血源性疫苗更安全，试从疫苗的结构特点解释原因:__________。

（4）形成有效的重组质粒，选择适当的限制性内切酶很重要。某学习小组根据图2和图3提出了三种方案：单独使用BamHⅠ、分别使用BamHⅠ和EcoRⅠ以及分别使用HindⅢ和EcoRⅠ，且认为选择使用BamHⅠ和EcoRⅠ最佳。该方案的优点是________________。如果选择使用HindⅢ和EcoRⅠ，则在构建重组质粒后，还需要运用_________技术以检测目的基因是否导入受体细胞。

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人类是乙型肝炎病毒的唯一宿主，现有的肝硬化、肝癌多从乙肝发展而来，接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法。乙型肝炎疫苗的研制先后经历了血源性疫苗和基因工程疫苗阶段。乙肝基因工程疫苗的生产和使用过程如下：

（1）从图可知，该目的基因的具体功能是______。

（2）若要迅速获取大量的目的基因，以提高重组质粒生产的效率，常用的技术是（写全称）______。过程②常需要　　　　　　 处理大肠杆菌细胞，促使转化完成。

（3）要形成有效的重组质粒，选择适当的限制性内切酶很重要，图1示意大肠杆菌质粒的相关基因与限制酶切点；图2示意有关限制酶在DNA分子中的具体切点。

①要成功转入目的基因，有两种选择限制酶的方案，它们分别是______或______。

②下图是筛选、获取含有目的基因大肠杆菌的基本过程：B、C培养基中除基本营养物质外还应分别加入的抗生素　　　　　　 、　　　　　　　 ，在B、C两个培养基中含有重组质粒的大肠杆菌形成的菌落共有　　　　　　 个。

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现有的肝硬化、肝癌多从乙肝发展而来，接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法。现在乙型肝炎疫苗的研制已经到了基因工程疫苗阶段。

图为“乙肝基因工程疫苗”的生产和使用过程，将乙肝病毒表面蛋白(HBsAg)基因片段导入大肠杆菌，让重组后的大肠杆菌在培养过程中产生HBsAg。其中选用的质粒lacZ基因可使细菌利用加入培养基的物质X-gal，从而使菌落显现出蓝色，若无该基因，菌落则成白色。

1.下列①～④表示基因工程疫苗研制的步骤，其中步骤①是___________；①-④步骤的正确排序是________________。

①　　　 ？　　　　　 　　　　 ②重组DNA分子导入大肠杆菌　　

③获取HBsAg基因　　　　 ④HBsAg基因与运载体的连接

2.据图可知获取HBsAg基因选用的限制酶方案是　　　　　 。

A.EcoRV和BamHI B.只用EcoRV C.只用EcoRI D.只用BamHI

3.图中所示抗原蛋白HBsAg和相应抗体的基因表达过程中，不同的是　　　　　　　　 。

A.基因所来源的物种 B.转录出的mRNA碱基序列

C.氨基酸对应遗传密码子表 D.翻译出的氨基酸序列

4.为了获得产生HBsAg的大肠杆菌，培养一段时间挑选出_____（蓝色/白色）的菌落进一步培养，分子HBsAg属于免疫反应中的_____________。

5.接种基因工程疫苗比接种灭活获减毒的病毒疫苗更安全，试从疫苗的结构特点解释原因：___________________________________________________。

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人类是乙型肝炎病毒的唯一宿主，接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法。乙型肝炎疫苗的研制先后经历了血源性疫苗和基因工程疫苗阶段。请回答：

（1）血源性“乙型肝炎疫苗”是取用乙肝病毒感染者的血液，用高速离心提纯血液中的乙肝病毒，之后再灭活，制成乙肝疫苗。乙肝病毒结构中的__________________________成分是激发免疫反应的抗原。

（2）上图为“乙肝基因工程疫苗”的生产和使用过程，质粒中lacZ基因可使细菌利用加入培养基的物质X-gal，从而使菌落显现出蓝色，若无该基因，菌落则成白色。图中过程①有两种限制酶选择方案，它们分别是__________________。

（3）获取目的基因的方法除了图中用酶切的方法从细胞中分离以外，还可以通过_______________来获得。据图可知，该目的基因的具体功能是___________________________________________________________。

（4）为了筛选含目的基因的重组质粒的大肠杆菌，可在培养大肠杆菌的通用培养基中加入______和______，培养一段时间挑选出_________色的菌落进一步培养获得大量目的菌。

（5）用基因工程疫苗接种比血源性疫苗更安全，因为血源性疫苗制备过程中需要保证_______________成功。

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人类是乙型肝炎病毒的唯一宿主，接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法。下图为“转基因酵母乙肝疫苗”的生产过程示意图，该过程所用酵母菌为毕赤酵母菌，其体内无天然质粒，科学家改造出了下图所示的pPIC9K质粒（松弛控制型，复制不受宿主细胞控制）用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合与染色体组已实现表达。请回答下列问题：

（1）如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上限制酶_________的识别序列，这样设计的优点是可避免质粒和目的基因的自身环化。步骤1应选用___________（填“E•coli”或“T4”）DNA连接酶。

（2）步骤2的目的是______________________。已知大肠杆菌每20分钟分裂一次，若1个大肠杆菌中导入了 10个重组质粒，则1小时后可从1个大肠杆菌的后代中得到重组质粒的个数___________。

（3）步骤4中应选用限制酶___________切割重组质粒以获得一段线性DNA，然后将其导入毕赤酵母菌细胞。为了确认毕赤酵母菌转化是否成功，应在培养基中加入___________以便筛选。除此以外，还可以用分子杂交技术鉴定上图中的毕赤酵母菌转化是否成功，过程如下图所示:

根据图中显示结果推算，若要获得16个成功导入该基因的酵母菌菌落，则上图中的酵母菌菌落数至少要为___________个。

（4）已知质粒在细胞传代过程中有丢失现象，试分析毕赤酵母表达系统的遗传稳定性高于大肠杆菌表达系统的主要原因_________________________________。

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我国大概有9300万的乙肝感染者，接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法，随着乙肝疫苗的推广应用，我国乙肝病毒感染率逐年下降。下列相关叙述不正确的是

A．乙肝疫苗是一种抗原

B．初次接种该疫苗后，刺激机体免疫系统，可产生相应的效应T细胞和抗体

C．乙肝患者体内的浆细胞产生的抗体可能不同

D．入侵的乙肝病毒被抗体结合后失去致病能力，逐渐被T细胞吞噬分解清除

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我国曾经是乙型肝炎病毒（HBV）感染的高发地区，母婴传播是HBV传播的途径之一。母亲为HBV感染者的新生儿是高危新生儿。接种乙肝疫苗可有效阻断HBV的母婴传播，然而仍有5%〜15%的高危新生儿在接种疫苗后，免疫失败或不产生抗体，即阻断失败。请回答下列问题：

（1）疫苗在使用时需要满足以下两个条件:一是不能致病，二是会被____________细胞识别、摄取和处理，进而引起机体的特异性免疫。

（2）从免疫学角度看，接种乙肝疫苗后，成功阻断母婴传播的高危新生儿体内应该出现的现象包括:________________________、________________________。

（3）请推测部分高危新生儿，在接种乙肝疫苗后阻断失败的原因可能是:________________________（答出1点即可）。

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我国曾经是乙型肝炎病毒(HBV)感染的高发地区，母婴传播是HBV传播的途径之一。母亲为HBⅤ感染者的新生儿是高危新生儿。接种乙肝疫苗可有效阻断HBV的母婴传播，然而仍有5%~15%的高危新生儿在接种疫苗后，免疫失败或不产生抗体，即阻断失败。请回答下列问题：

(1)疫苗的作用是作为___________，它需要满足以下两个条件：一是不能致病，二是会被___________细胞识别、摄取和处理，进而引起机体的___________免疫。

(2)从免疫学角度看，接种乙肝疫苗后，成功阻断母婴传播的高危新生儿体内应该出现的现象包括______________________、______________________。

(3)请推测部分高危新生儿L，在接种乙肝疫苗后阻断失败的原因可能是：___________(答出1点即可)。

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乙型肝炎病毒（HBV）是一种DNA病毒，可通过多种途径传染。研究表明肝炎患者的肝癌发病率比自然人群高，HBV与原发性肝癌密切相关。注射乙型肝炎疫苗是预防乙型肝炎最有效的方法，以下说法正确的是（　　　 ）

A. HBV携带者一般是不需要注射乙肝疫苗的

B. 接种乙肝疫苗后人体会产生相应抗体，该抗体可与病毒类的所有抗原结合

C. 抗HBV的抗体也能和侵入肝细胞内的病毒特异性结合，阻止其增殖

D. 第一次接触HBV时，由于体内没有相应的记忆细胞，因此只能发生非特异性免疫

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乙肝疫苗是一种预防乙型肝炎的疫苗，是从乙型肝炎病毒携带者血浆中，分离出乙肝表面抗原，经处理制成的。下列有关分析错误的是（　　 ）

A.浆细胞产生的抗体可以结合并裂解乙肝病毒

B.第一次接种乙肝疫苗后机体能产生记忆细胞

C.接种乙肝疫苗后产生的免疫活性物质有淋巴因子

D.再次接种乙肝疫苗后能使机体产生更多的淋巴细胞

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