如图所示为培育二倍体转基因抗虫玉米的两种思路。EcoRⅠ、SmaⅠ、BamHⅠ为限制酶（箭...

如图所示为培育二倍体转基因抗虫玉米的两种思路。EcoRⅠ、SmaⅠ、BamHⅠ为限制酶（箭头所指为酶切位点）。回答下列问题：

（1）据图，获取目的基因时不能选择SmaⅠ的原因是它_________________________。选择EcoRⅠ和BamHⅠ的优点是可避免目的基因与质粒________连接。

（2）与思路1相比，思路2的最大优点是获得的转基因抗虫玉米________________。

（3）培育转基因抗虫玉米的核心步骤是__________________________，其目的是使目的基因在受体细胞中_____________________________________________________。

（4）将重组质粒导入受精卵，采用最多的方法是农杆菌转化法，这跟农杆菌的____________________________________有关。

（5）操作⑤常用的方法是_________________________。

高三生物非选择题中等难度题查看答案及解析

如图所示为培育二倍体转基因抗虫玉米的两种思路。EcoRⅠ、SmaⅠ、BamHⅠ为限制酶（箭头所指为酶切位点）。回答下列问题：

（1）据图，获取目的基因时不能选择SmaⅠ的原因是它_________________________。选择EcoRⅠ和BamHⅠ的优点是可避免目的基因与质粒________连接。

（2）与思路1相比，思路2的最大优点是获得的转基因抗虫玉米________________。

（3）培育转基因抗虫玉米的核心步骤是__________________________，其目的是使目的基因在受体细胞中_____________________________________________________。

（4）将重组质粒导入受精卵，采用最多的方法是农杆菌转化法，这跟农杆菌的____________________________________有关。

（5）操作⑤常用的方法是_________________________。

高三生物非选择题中等难度题查看答案及解析

如图为某种质粒的简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，P为转录的启动部位。已知目的基因的两端有EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，受体细胞为无任何抗药性的原核细胞。下列有关叙述正确的是(　　)

A. 将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoRⅠ酶切，在DNA连接酶作用下，生成由两个DNA片段之间连接形成的产物有两种

B. DNA连接酶的作用是将酶切后得到的黏性末端连接起来形成一个重组质粒，该过程形成两个磷酸二酯键

C. 为了防止目的基因反向粘连和质粒自身环化，酶切时可选用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠ

D. 能在含青霉素的培养基中生长的受体细胞表明该目的基因已成功导入该细胞

高三生物选择题困难题查看答案及解析

（16分）下表中列出了几种限制酶识别序列及其割位点，图一、图二中箭头表示相关限制酶的位点。请回答下列问题：

（1） 一个图一所示的质粒分子经Sma I切割前后，分别含有___________个游离的磷酸基团。

（2） 若对图一中质粒进行改造，插入Sma I 酶切位点越多，质粒的稳定性越_____________。

（3） 用图中的质粒和外源ＤＮＡ构建重组质粒，不能使用Sma I切割，原因是____________。

（4） 与只是用EcoR I 相比较，使用BamH I和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止___________。

（5） 为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入_______________。

（6） 重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了_____________。

（7） 为了从cDNA 文库中分离获取蔗糖转基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖的能力的大肠杆菌突变体，然后在________________的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。

（8）若将某一目的基因转入某一植物的核基因组中，确定该目的基因是否已整合到某一染色体上，方法之一是测定该染色体的___________________。

高三生物综合题困难题查看答案及解析

如图为某质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制酶39．如图为某质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tctR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。又知植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。已知耐旱基因两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。据图回答：

（1）获得耐旱基因常用基因文库法。理论上，　　　　　　 文库中含有该生物的全部基因；而　　　　 文库中含有生物的部分基因。

（2）实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是　　　　　　　　 。酶切产物用DNA连接酶处理后，两两连接的产物有　　　　　　　　　 种。

（3）将上述连接产物导入无任何抗药性的宿主细胞后，将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能正常生长的宿主细胞所含有的连接产物是　　　　 　　　　 。

（4）目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是　　　　　　　　 ，其合成的产物是　　　　　　　　 。

（5）假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱植株与不耐旱植株的数量比为3：1时，则可推测该耐旱基因整合到了　　　　　　　　 （填“同染色体的一条上”或“同染色体的两条上”）。

高三生物综合题困难题查看答案及解析

回答有关生物工程的问题。

转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。

⑴若要获得抗病基因，能否用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割？_____，说明理由______________________________________________________________。要获得含抗病基因的重组质粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割质粒？________。

⑵卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有___________基因，作为标记基因。

⑶利用组织培养技术能将香蕉组织细胞培育成植株，这是因为香蕉组织细胞具有__________，图中①→②、②→③依次表示香蕉组织细胞的___________和_____________的过程。

⑷②、③阶段是否可使用同种培养基？ _________；

理由是____________________________________________________________________。

④阶段是否可使用不添加植物激素的培养基？_________；理由是_____________________。

高三生物综合题中等难度题查看答案及解析

回答有关生物工程的问题。（11分）

转基因抗病香蕉的培育过程如上图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下图表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。

1．若要获得抗病基因，能否用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割？_____，说明理由______________________________________________________________。要获得含抗病基因的重组质粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割质粒？________。

2．卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有___________基因，作为标记基因。

3．利用组织培养技术能将香蕉组织细胞培育成植株，这是因为香蕉组织细胞具有__________，图中①→②、②→③依次表示香蕉组织细胞的___________和_____________的过程。

4．②、③阶段是否可使用同种培养基？_____________；理由是___________________。

④阶段是否可使用不添加植物激素的培养基？_________；理由是___________________。

高三生物综合题中等难度题查看答案及解析

（11分）回答有关生物工程的问题。

转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。

1．若要获得抗病基因，能否用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割？_____，说明理由______________________________________________________________。要获得含抗病基因的重组质粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割质粒？________。

2．卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有___________基因，作为标记基因。

3．利用组织培养技术能将香蕉组织细胞培育成植株，这是因为香蕉组织细胞具有__________，图中①→②、②→③依次表示香蕉组织细胞的___________和_____________的过程。

4．②、③阶段是否可使用同种培养基？ _________；

理由是____________________________________________________________________。

④阶段是否可使用不添加植物激素的培养基？_________；理由是___________________ ________________________________________________________________。

高三生物综合题中等难度题查看答案及解析

转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下图表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。

下列有关叙述错误的是(　 )

A．获得含抗病基因的重组质粒不可用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割质粒

B．由①→②、②→③阶段均涉及细胞的分裂与分化

C．④阶段可用不添加植物激素的培养基

D．上述培育过程涉及的生物技术有基因工程、植物组织培养等

高三生物选择题中等难度题查看答案及解析

转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下图表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。

下列有关叙述错误的是(　 )

A．获得含抗病基因的重组质粒不可用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割质粒

B．由①→②、②→③阶段均涉及细胞的分裂与分化

C．④阶段可用不添加植物激素的培养基

D．上述培育过程涉及的生物技术有基因工程、植物组织培养等

高三生物选择题中等难度题查看答案及解析