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胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)是一种活性蛋白多肽物质,它是人体内肝细胞、肾细胞、脾细胞等十几种细胞分泌的产物。某研究小组利用原核细胞表达、纯化IGF-Ⅰ,并制备其单克隆抗体。回答下列问题:

(1)以人的肝组织中的总RNA处理得到的_______为模板,加入针对IGF-Ⅰ的特异引物(如下图所示)进行PCR扩增,提取目的基因。正向引物中含有NdeⅠ酶的识别序列,逆向引物含有BamHⅠ酶的识别序列。已知NdeⅠ酶和BamHⅠ酶的识别序列均为6个核苷酸,则NdeⅠ酶和BamHⅠ酶的识别序列分别是________和_________。

正向引物为:5’-CGCATATGATGCACACCATGTCCTCCTC-3’

逆向引物为:5’-CGGGATCCCTACTTGCGTTCTTCAAATG-3’

(2)使用PCR扩增的目的基因构建基因表达载体,并用该表达载体转化大肠杆菌,通过纯化获取足量的IGF-Ⅰ。选择大肠杆菌作为受体细胞的原因是_____________。

(3)用IGF-Ⅰ处理免疫小鼠,一段时间后,处死免疫小鼠,采集血清备用。取小鼠脾细胞与_______细胞进行细胞融合得到多种杂种细胞。除对这些杂种细胞进行选择培养外,还需进行专一抗体检验。检验杂交瘤细胞的培养液时,需要进行对照实验:以检验__________作为阳性对照,以检验_______________和_____________作为阴性对照。

高三生物综合题中等难度题

少年,再来一题如何?
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