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我国科学家通过基因工程成功培育出转基因抗虫棉。请回答下列问题。
（1）基因工程常用质粒作为载体，是由于质粒具有 、 等特点。
（2）利用农杆菌转化法将抗虫基因导入植物细胞，构建重组Ti质粒时，需将含抗虫基因的DNA片段插入到Ti质粒DNA的 区域上。
（3）利用PCR技术扩增抗虫基因过程中，将温度加热至90-950C，然后冷却至55-600C，再加热至70-75℃的目的是
（4）农杆菌侵染植物细胞后，可以使抗虫基因插入到植物细胞中染色体的DNA上，则是否一定能表现出抗虫性状？ ，理由是
（5）可利用 技术将含有抗虫基因的植物细胞培育成抗虫植株，该技术证明了分化的植物细胞，仍然具有
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基因工程常用土壤农杆菌Ti质粒作为载体，需把目的基因插入Ti质粒的T-DNA才能整合到植物染色体DNA上。下图表示抗虫棉培育中使用的三种限制酶A.B.C的识别序列以及Ti质粒上限制酶切割位点的分布，抗虫基因内部不含切割位点，两侧标明序列为切割区域。下列叙述错误的是
A.应该使用酶B和酶C切取抗虫基因
B.应该使用酶A和酶B切割Ti质粒
C.成功建构的重组质粒含1个酶A的识别位点
D.成功建构的重组质粒用酶C处理将得到2个DNA片段
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科学家以质粒为载体，将金属硫蛋白基因导入烟草细胞中，培育出了汞吸收能力极强的转基因烟草。下列叙述正确的是（ ）
A.质粒作为载体必须具备的条件之一是具有标记基因
B.构建基因表达载体时需要限制酶和DNA聚合酶参与
C.金属硫蛋白基因插入启动子和终止子之间以便大量复制
D.培育转基因烟草时选用的受体细胞一定是受精卵
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我国科学家研制成功具有自主知识产权的融合Bt杀虫基因，并将其导入棉花，创造出Bt转基因抗虫棉。请回答该技术中的有关问题：
(l)基因工程是在____水平上进行设计和施工的，常用的DNA连接酶有____。
(2)PCR技术扩增目的基因的前提是____，以便根据这一序列合成引物。PCR中需要的特殊酶为____。
(3)Bt毒蛋白基因必须插入棉花细胞的____，检测Bt毒蛋白基因是否导入棉花细胞的方法是________。
(4)要检测抗虫棉是否成功，除了进行分子检测外，还需进行____水平的鉴定，如做____实验。
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请回答基因工程方面的问题：
（1）基因工程中目的基因的来源是___________和___________。
（2）实践中常用某些病毒载体作为基因工程工具，除具备普通“质粒载体”的条件外，还应具有的条件是
___________、___________（答出两点即可）。在基因表达载体中，启动子的功能是___________。定性检测目的基因表达产物可采用___________的方法。
（3）让人干扰素基因在大肠杆菌细胞中正确表达，需要将该目的基因中___________除去；若将该基因表达载体导入牛受精卵细胞常用方法是______________________。
（4）假设以大肠杆菌质粒作为运载体，以同种限制酶切割运载体与目的基因，将切割后的运载体、目的基因片段和DNA连接酶混合。在适宜条件下可能产生的环状 DNA 分子有________、________、________。
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我国科学工作者已经成功培育了转基因抗虫棉,从而减少了农药的使用，减少了水土污染。请回答下列问题：
（1）在培育转基因抗虫棉时,最关键的技术环节是__________，其作用是使目的基因在受体细胞稳定存在、复制并且表达。选取受体细胞，一般用植物____细胞即可,将目的基因导入受体细胞的常用方法是___________，导入受体细胞后还需要采用______________技术培育成抗虫植株。
（2）转基因操作工具之一是限制性核酸内切酶，该酶所具有的特异性具体表现在：一种限制酶只能_________________。当限制酶的切割位点在识别序列中轴线的两侧时，切割产生的是_________末端。
（3）桑基鱼塘生态农业模式将蚕粪喂鱼，塘泥肥田，提高了经济效益，也有良好的生态效益,但这种模式并不适合全国各地，只有在南方降水较多、气候温暖的地区才适用。以上表述体现了生态工程的_____________、______________原理。
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科学家通过基因工程,成功培育出能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉,其过程大致如图所示。下列是有关基因工程和细胞工程的问题,请据图分析回答:
（1）细菌的基因之所以能“嫁接”到棉花细胞内,原因是 。
（2）上述过程中,将目的基因导入棉花细胞内使用了 法,这种导入方法较经济、有效。目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是 ,还需要通过检测才能知道,检测采用的方法是 。
（3）利用基因工程技术培育抗虫棉,相比诱变育种和传统的杂交育种方法,具有 和 等突出的优点,但是目前基因工程仍不能取代传统的杂交育种和诱变育种。与基因工程技术相比,杂交育种和诱变育种方法主要具有 的优点。
（4）某棉农在食用该抗虫棉种子压榨的棉籽油炒芹菜后,出现鼻塞流涕,皮肤骚痒难忍症状。停用一段时间后这些症状会自然消失,该现象很可能是 。
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科学家通过基因工程,成功培育出能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉,其过程大致如图所示。下列是有关基因工程和细胞工程的问题,请据图分析回答:
(1)细菌的基因之所以能“嫁接”到棉花细胞内,原因是 。
(2)上述过程中,将目的基因导入棉花细胞内使用了 法,这种导入方法较经济、有效。目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是 ,还需要通过检测才能知道,检测采用的方法是 。
(3)利用基因工程技术培育抗虫棉,相比诱变育种和传统的杂交育种方法,具有 和 等突出的优点,但是目前基因工程仍不能取代传统的杂交育种和诱变育种。与基因工程技术相比,杂交育种和诱变育种方法主要具有 的优点。
(4)某棉农在食用该抗虫棉种子压榨的棉籽油炒芹菜后,出现鼻塞流涕,皮肤骚痒难忍症状。停用一段时间后这些症状会自然消失,该症状很可能是 。
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下列是有关基因工程和细胞工程的问题，请据图分析回答。
科学家通过基因工程，成功培育出能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉，其过程大致如图所示。
（1）基因工程的核心是________ ，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，可遗传给下一代，并能够 和发挥作用。获得cDNA片段的方法是________。
（2）上述过程中，将目的基因导入棉花细胞内使用了________法，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的________中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的________上。这种导入方法首先必须用________处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为________态细胞；然后将________在缓冲液中混合培养完成转化过程。 目的基因在棉株体内能否成功转录，从分子水平上检测可采用的方法是________，其中用 ________ 作为探针。如果把该基因导入叶绿体DNA中，将来产生的配子中________（填“一定”或“不一定”）含有抗病基因。
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科学家通过基因工程方法，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入普通棉株体细胞内，并成功实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉。回答问题：
（1）培育转基因抗虫棉的核心步骤是_____________________。
（2）将目的基因导入普通棉株体细胞的方法是_______________。Bt毒蛋白基因是否已经成功整合到染色体DNA上，可通过____________技术进行检测；如果想从个体水平鉴定转基因抗虫棉是否培育成功，应采取的方法是______________________________。
（3）Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞中并成功实现表达的过程，在基因工程中称为_________________。
（4）抗虫棉能抗棉铃虫的生态效果显著，有人认为抗虫棉就是无虫棉花，不必防治害虫，你认为这种观点是_____________（填“正确”或“错误”），理由是_________________________。
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