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（四）回答下列有关生物工程的问题
从人的胰岛细胞中制备胰岛素编码基因，将其与合适的质粒用产自大肠杆菌的DNA连接酶拼接成重组分子，后者导入酵母中便可实现重组人胰岛素的工业化生产，用于糖尿病的治疗。
1.下列与质粒的基本单位相同的有_____________ （填编号）
① 胰岛素基因 ② mRNA ③ 拟核DNA ④ 人胰岛素
2.若人胰岛素编码基因两端是用限制酶PstI（识别序列和切割位点如图2所示）切开的，那么如图1所示的质粒应使用限制酶________切开，才能保证人胰岛素编码基因与质粒直接粘连拼接。
3.已转到重组质粒上的单个人胰岛素编码基因能否再用2题中的限制酶切开？__________，理由是_________________。
4.将重组质粒导入酵母细胞，并进行大规模培养便可获得人胰岛素产品。上述人胰岛素产品生产过程中利用到的生物工程领域有___________。（填编号）
①发酵工程 ②基因工程 ③细胞工程 ④酶工程
5.医学上还利用生物工程技术将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，融合后细胞经培养可产生单克隆抗体，其理论依据有___________ 。（填编号）
①骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖
②骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体
③B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖
④B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合才能产生抗体
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（五）回答下列有关基因工程的问题
从人的胰岛细胞中制备胰岛素编码基因，再用DNA连接酶与合适的质粒拼接成重组质粒。将重组质粒导入酵母菌中便可实现重组人胰岛素的工业化生产，用于治疗糖尿病。
1.本实验操作中，所选用的受体细胞是_________。
2.若人胰岛素编码基因是使用限制酶PstI（识别序列和切割位点如图1所示）切开的，那么如图2所示的质粒应使用限制酶________切开，才能保证人胰岛素编码基因与质粒直接粘连拼接。
3.如果人胰岛素编码基因和质粒的大小分别为0.5 kb和3.2 kb（1 kb = 1000对碱基），那么安装了单个人胰岛素编码基因的重组质粒用限制酶EcoRI和AatII联合酶切后，所产生的DNA片段大小应为______kb和_____kb。
4.将上述人胰岛素编码基因与质粒的连接产物和受体细胞混合进行导入操作，之后还需要筛选，这是因为_______。（可多选）
A. 人胰岛素基因和质粒连接形成重组质粒
B. 导入成功的概率很低，大部分酵母菌没有导入任何质粒
C. 人胰岛素基因自我连接
D. 连接之后可能产生空质粒，导入后产生含有空质粒的酵母菌
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下列关于基因工程的叙述，错误的是（ ）
A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物
B．限制性核酸内切酶、DNA连接酶和质粒是三类常用的工具酶
C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性
D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞
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下列对生物工程的有关叙述正确的一项是（ ）
① 从禽流感患者血清中分离出的病毒基因制备的DNA探针可检测肝炎病毒
②人的胰岛素基因可通过基因工程技术导入大肠杆菌，并在其体内表达产生胰岛素
③在对癌细胞有特异性结合能力的单克隆抗体上连接抗癌药物可制成定向消灭癌细胞的"生物导弹"
④胰蛋白酶能使动物组织分散成单个细胞，能用于动物细胞培养
⑤DNA连接酶可把目的的基因与运载体的黏性末端碱基黏合，形成重组DNA
⑥一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列，能用于提取目的基因
⑦纤维素酶、果胶酶可分解所有生物的细胞壁，能用于植物体细胞杂交
A．②③④⑥ B．①②⑤⑥ C．③④⑤⑥ D．③④⑥⑦
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人们利用基因工程的方法，用大肠杆菌生产人类胰岛素，这一过程不涉及到
A．用适当的酶对胰岛素基因与运载体进行切割并拼接
B．把重组后的DNA分子导入受体细胞内并进行扩增
C．检测重组DNA分子是否导入受体细胞内并表达出相应的性状
D．检测目的基因是否发生结构上的改变
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人们利用基因工程的方法，用大肠杆菌生产人类胰岛素，这一过程不涉及
A．用适当的酶对胰岛素基因与运载体进行切割并拼接
B．把重组后的DNA分子导入受体细胞内并进行扩增
C．检测重组DNA分子是否导入受体细胞内并表达出相应的性状
D．检测目的基因是否发生结构上的改变
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下列关于基因工程的叙述中，正确的是
A．目的基因的核苷酸序列都是已知的
B．接受外源基因的转基因植物成为一个新物种
C．可从人肝脏细胞中提取胰岛素原的mRNA，逆转录获得人胰岛素原基因
D．DNA连接酶、限制性核酸内切酶及载体是构建重组DNA分子必需的工具
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研究发现色氨酸合成酶是大肠杆菌自身蛋白，如果该酶与胰岛素原“拼接”为融合蛋白，能有效抵抗菌体内蛋白酶对胰岛素原的水解。研究人员利用基因工程技术合成融合蛋白。请回答下列问题。
(1)为避免胰岛素原在菌体内不被降解，在基因层面的操作是将____连接成融合基因。
(2)利用基因工程生产融合蛋白时，常选用大肠杆菌作为受体菌，其优点是____。科研人员通过Ca2+参与的____方法将含有融合基因的重组DNA分子导人大肠杆菌细胞，最终在宿主细胞中表达出融合蛋白，从中可以得到的启示有____（答出两点即可）。
(3)将目的基因导入动物细胞核内，再进行核移植得到转基因动物。哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。动物体细胞核移植的难度____（填“高于”、“等于”或“低于”）胚胎细胞核移植，原因是____。
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如图所示，大肠杆菌R1质粒DNA片段上有hok基因和sok基因，其中hok基因编码的毒蛋白能导致细胞裂解死亡；sokmRNA能与hokmRNA结合，结合产物能被酶降解。回答下列问题。
（1）DNA与RNA在化学组成上的区别是__________。
（2））图中过程②发生的场所是__________，其产物毒蛋白的基本组成单位是__________。
（3）sokmRNA与hokmRNA的碱基序列__________（填“相同”或“不相同”）。
（4）据图可知，sokmRNA能够抑制hok基因表达中的__________过程。
（5）如果hok基因发生突变，导致hokmRNA中一个碱基被另一个碱基替换，但未引起毒蛋白中氨基酸序列的改变，其原因可能是____________________。
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科学家运用基因工程技术将人胰岛素基因与大肠杆菌的质粒DNA分子重组，并且在大肠杆菌体内获得表达。胰岛素基因与大肠杆菌质粒DNA能彼此结合的依据是
A．基因自由组合定律 B．半保留复制原则
C．基因分离定律 D．碱基互补配对原则