为实现目的基因与运载体结合,以便在大肠杆菌中大量表达相应的蛋白质,研究人员进行了如图所示操作。请分析回答下列问题:
(1)图表示用BamH I切割含目的基因的__________,质粒经相同限制酶处理后,经 ________酶的作用获得a,a称作_________。将a与感受态大肠杆菌混合后,混合物应接种在含有________的培养基上。质粒中抗氨苄青霉素基因称为______,在筛选过程起作用。若要证明培养基是否符合实验要求,培养基上需接种________的感受态大肠杆菌,培养后不出现菌落则培养基合格。
(2)DNA分子中,一条链中的两个核苷酸通过_________相连,已知碱性磷酸酶能除去核苷酸末端的5’磷酸,构建a的过程中用该酶处理质粒,但目的基因不用碱性磷酸酶处理,这样做的目的是___________。如果要检测目的基因 是否成功表达,须提取培养后大肠杆菌的__________,用相应抗体检测
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为实现目的基因与运载体结合,以便在大肠杆菌中大量表达相应的蛋白质,研究人员进行了如图所示操作。请分析回答下列问题:
(1)如图表示用BamH I切割含目的基因的__________,质粒经相同限制酶处理后,经 ________酶的作用获得a,a称作_________。
(2)将a与感受态大肠杆菌混合后,混合物应接种在含有________的培养基上。质粒中抗氨苄青霉素基因称为______,在筛选过程起作用。若要证明培养基是否符合实验要求,培养基上需接种________的感受态大肠杆菌,培养后不出现菌落则培养基合格。
(3)DNA分子中,一条链中的两个核苷酸通过_________相连,已知碱性磷酸酶能除去核苷酸末端的5’磷酸,构建a的过程中用该酶处理质粒,但目的基因不用碱性磷酸酶处理,这样做的目的是___________。
(4)如果要检测目的基因是否成功表达,可采用________________的方法。
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为实现目的基因与运载体结合,以便在大肠杆菌中大量表达相应的蛋白质,研究人员进行了如图所示操作。请分析回答下列问题:
(1)图表示用BamH I切割含目的基因的__________,质粒经相同限制酶处理后,经 ________酶的作用获得a,a称作_________。将a与感受态大肠杆菌混合后,混合物应接种在含有________的培养基上。质粒中抗氨苄青霉素基因称为______,在筛选过程起作用。若要证明培养基是否符合实验要求,培养基上需接种________的感受态大肠杆菌,培养后不出现菌落则培养基合格。
(2)DNA分子中,一条链中的两个核苷酸通过_________相连,已知碱性磷酸酶能除去核苷酸末端的5’磷酸,构建a的过程中用该酶处理质粒,但目的基因不用碱性磷酸酶处理,这样做的目的是___________。如果要检测目的基因 是否成功表达,须提取培养后大肠杆菌的__________,用相应抗体检测
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为实现目的基因与载体结合,以便在大肠杆菌中大量表达相应的蛋白质,研究人员进行了如图所示操作。请分析回答下列问题:
(1)将_________________________同时用BamH I切割并混合,加入___________进行连接,再与大肠杆菌感受态细胞混合,最后,将混合物接种在含有________________的平板培养基上。
(2)切割后的载体用碱性磷酸酶处理,除去末端的5’磷酸,可防止载体自我连接,目的基因片段不用碱性磷酸酶处理,仍然能与用碱性磷酸酶处理过的载体连接。在5组平板培养基上接种了不同操作的大肠杆菌感受态细胞,如下表
所示。
①第1组实验目的是确认___________________________________是否符合实验要求。
②第2组平板培养基菌落数目最大,说明大肠杆菌感受态细胞能够_________________。
③第3组实验用来检验_____________________酶是否具有活性。第4组实验用来检验________________酶是否具有活性。
④实验中用碱性磷酸酶处理载体可以降低仅有载体的菌落数,增加携带_____________的菌落比例。
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回答下列问题:
(1)博耶( H.Boyer)和科恩(S.Coben)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达,该研究除证明了质粒可以作为目的基因的___________外,还证明了______________,________________________(答出两点即可)。
(2)体外重组的质粒可通过Ca2+参与的________________方法导入大肠杆菌细胞:而体外重组的噬菌体DNA通常需与________________组装成完整噬菌体后,才能通过侵染的方法将重组的噬菌体DNA导入宿主细胞,在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中,可作为重组噬菌体宿主细胞的是________________。
(3)真核生物基因(目的基因)在大肠杆菌细胞内表达时,表达出的蛋白质可能会被降解。为防止蛋白质被降解,在实验中应选用________________的大肠杆菌作为受体细胞,在蛋白质纯化的过程中应添加________________的抑制剂。
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研究人员利用基因工程借助大肠杆菌生产人的生长激素。回答下列问题。
(1)借助PCR技术可在短时间内大量扩增目的基因,原因之一是利用了____酶。
(2)要使目的基因在大肠杆菌细胞内稳定存在并表达,需要借助质粒载体,原因是______。将目的基因导入大肠杆菌,常用____处理细胞,使其成为感受态。
(3)研究人员在大肠杆菌提取液中未能检测到生长激素,但在细胞中检测到生长激素基因,推测可能是转录或翻译过程出错,通过实验进行判断的方法及预期结果是________。
(4)能否利用基因工程通过大肠杆菌直接生产人体细胞膜上的糖蛋白?请做出判断并说明理由_________。
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在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的是
A.人工合成目的基因 B.目的基因与运载体结合
C.将目的基因导入受体细胞 D.目的基因的检测表达
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在基因工程操作的基本步骤中,没有进行碱基互补配对的是
A.人工合成目的基因
B.目的基因与运载体结合
C.将目的基因导入受体细胞
D.目的基因的检测表达
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在基因工程操作的基本步骤中,没有进行碱基互补配对的是
A.人工合成目的基因 B.目的基因与运载体结合
C.将目的基因导入受体细胞 D.目的基因的检测表达
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菊天牛是菊花的主要害虫之一,为达到防治目的,科研人员通过转基因技术培育出了抗虫菊花。请回答下列问题:
(1)在基因工程操作过程中的“运载体”的化学本质是_________(填“蛋白质”、“DNA”或“RNA”)。培育“抗虫菊花”的基因工程操作步骤中,其核心是________________,其中标记基因的功能为_______________________________________________________。
(2)在基因工程操作中,首先将目的基因A(编码“蛋白A”)插入至_________________,然后将此重组质粒导入农杆菌中。当植物体受损伤时,伤口处的细胞会分泌大量的____________,吸引农杆菌移向这些细胞,此时修饰的T-DNA可以转入植物细胞,并整合到__________中。
(3)实践发现,在构建重组质粒的过程中,若直接在启动子的下游接上编码蛋白A的DNA序列(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA),则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白A。请根据基因表达原理分析,其原因是___________________________________。
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基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的.在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的是( )
A.人工合成目的基因
B.目的基因与运载体结合
C.将目的基因导入受体细胞
D.目的基因的检测表达
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